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补肾填精法调控辐射小鼠骨髓ATM/ATR通路的研究

作　者: 许爱琴
导　师: 冯全生
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中医临床基础
关键词: 补肾填精法 辐射损伤 肾精 骨髓 外感热病
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


辐射对人类的危害越来越受到重视,辐射虽可导致人体免疫、血液、生殖及其他多系统损害,但其根本原因是导致DNA这一重要射线靶的损伤,本文从外感热病角度研究补肾填精法调控辐射损伤的作用机理。目的：观察补肾填精方对Co60γ射线所致辐射损伤小鼠模型的作用,并通过观察其对DNA损伤修复ATM/ATR通路的影响,探讨该方抗辐射的作用机制。方法：将雌雄各半的balb/c小鼠,分成正常组,病理对照组,补肾组,补血组及补阴组。采用Co60γ射线损伤小鼠模型,在造模后取骨髓运用免疫组化方法对关键基因ATM/ATR信号通路上相关蛋白表达结合图像分析技术进行分析；摘取动物眼球取外周血,对其外周血进行血常规分析；造模后取睾丸和卵巢,采用HE染色观察其病理形态学。结果：1.免疫组化结果：补肾组和补血组与病理组相比在ATR蛋白表达方面存在差异(P<0.05)而ATM基因表达在各组中的差异不明显。2.生殖系统HE染色结果：睾丸的补肾组受损程度与模型组比较,差别较大,修复更为明显；补血和补阴组受损程度与模型组比较较轻；卵巢的补肾组,补血组和补阴组大多数颗粒细胞外层保留,内层出现部分坏死、脱落,部分卵母细胞损伤,受损程度均较模型组轻。3.外周血结果：白细胞总数,中性粒细胞,补肾组和补血组与病理组有差异(P<0.05),淋巴细胞来看,补阴组和病理组有差异(P<0.05)而血红蛋白来看,3个组和病理组均有差异(P<0.05)。结论：1.补肾填精方可促进ATR基因的表达增强；2.补肾填精方在一定程度上对受照小鼠生殖功能具有保护作用；3.补肾填精方对于放射后小鼠骨髓细胞的修复都有一定的促进作用,其对促进白细胞增生较为明显。综上补肾填精方具有抗辐射,保护小鼠生殖功能,促进血细胞生长的作用。

全文目录


中文摘要  3-4
Abstract  4-9
引言  9-11
一 理论探讨  11-15
  1. 辐射损伤的研究  11-12
    1.1 中医对辐射损伤的认识  11-12
      1.1.1 辐射损伤的病因当属外感热邪  11
      1.1.2 辐射损伤的临床表现符合外感热病的范畴  11
      1.1.3 辐射损伤的病理变化符合外感热病传变规律  11-12
      1.1.4 辐射极易深入下焦致肾精耗伤  12
    1.2 现代辐射损伤的本质  12
  2. 中医对肾精的认识  12-13
    2.1 中医学的肾精理论  12-13
    2.2 补益肾精的现代临床应用  13
  3. 补肾填精法立法处方依据  13-15
    3.1 补肾填精法的立法  13
    3.2 补肾填精法的处方  13-15
二 实验  15-19
  1. 实验动物与材料  15-16
    1.1 实验动物  15
    1.2 实验药品与试剂  15
      1.2.1 药物  15
      1.2.2 试剂  15
    1.3 主要仪器  15
    1.4 主要溶液配置  15-16
  2. 方法  16-19
    2.1 小鼠随机分组及给药途径  16
    2.2 药物的制备  16
      2.2.1 中药剂量的计算方法  16
      2.2.2 药物的制备过程  16
    2.3 模型的制备  16
    2.4 血清标本制备  16-17
    2.5 标本的制备  17
    2.6 骨髓免疫组化检测  17
      2.6.1 骨髓组织的制备  17
      2.6.2 骨髓细胞涂片  17
    2.7 生殖系统病理形态学研究  17-18
      2.7.1 睾丸和卵巢标本制备  17
      2.7.2 HE染色  17-18
    2.8 统计分析  18-19
结果  19-23
  1. 骨髓的ATM/ATR信号通路表达  19-20
    1.1 骨髓的ATM信号通路表达结果  19
    1.2 骨髓的ATR信号通路表达结果  19-20
  2. 生殖系统的病理形态学观察  20-21
  3. 外周血象观察  21-23
讨论  23-25
  1. 骨髓的ATR信号通路研究  23-24
  2. 生殖系统的病理形态学研究  24
  3. 外周血象研究  24-25
结论  25-26
  1. 骨髓的ATM/ATR信号通路研究  25
  2. 生殖系统的病理形态学研究  25
  3. 外周血象研究  25-26
问题与展望  26-27
致谢  27-28
参考文献  28-31
综述 现代中医防辐射研究进展  31-43
  参考文献  38-43
附件1:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  43-44

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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