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甘草抗肝炎有效部位及其纳米粒的制备

作　者: 朱中佳
导　师: 熊富良
学　校: 武汉理工大学
专　业: 药学
关键词: 甘草总皂苷指纹图谱提取纯化大孔吸附树脂纳米粒
分类号: R283
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

肝炎是危害人类健康的严重疾病之一,近年来中医药在治疗肝炎方面取得了长足的发展,从传统的中药中寻找有效部位治疗病毒性肝炎已成为研究的热点。豆科甘草属植物甘草是常用中药材,它的主要成分为甘草酸等三萜皂苷和甘草苷为主的甘草黄酮,近年的研究发现其具有解痉镇痛,抗病毒,抗炎症,抗癌等多种药理作用,而甘草治疗肝炎的应用在国内外均有报道。一般的抗肝炎药物靶向性差,而利用纳米粒作为药物载体可有效地促进药物进入肝细胞,从而增强药物的肝靶向性和疗效,因此可用于治疗病毒性肝炎。本课题为甘草抗肝炎有效部位及其纳米粒的制备。首先为全面控制甘草药材的质量,为制剂提供稳定的药材来源,用高效液相色谱法建立了不同产地甘草药材的指纹图谱,然后提取纯化了甘草抗肝炎有效部位—甘草总皂苷,考察了甘草总皂苷的提取纯化工艺,接着以羧甲基壳聚糖为载体制备了甘草总皂苷纳米粒并对其进行了质量评价。主要研究内容和结论如下：1.采用高效液相色谱法(HPLC)建立了不同产地甘草药材的指纹图谱。采用Hypersil ODS2C18 (4.6mm×250mm; 5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,检测波长254nm,采集时间为90min。结果得到了分离度较好的甘草药材HPLC指纹图谱,标定出了11个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。确定的指纹图谱研究方法稳定、可靠,可用于甘草药材的质量控制。2.研究了提取纯化甘草总皂苷的工艺条件及参数。以正交试验考察了甘草总皂苷的提取工艺；以甘草总皂苷质量浓度为指标,考察了大孔树脂纯化工艺。结果确定甘草总皂苷的最佳提取工艺为：加水量8倍,煎煮时间2h,煎煮次数3次；采用HPD300型树脂的纯化工艺为上样液质量浓度为0.2g生药／mL,上样量为5倍柱体积,50%乙醇洗脱,用量为6倍柱体积。实验结果表明在所确定的工艺条件下,可较好地提取纯化甘草总皂苷。3.制备了甘草总皂苷纳米粒并对其进行了质量评价。以正交试验设计法优化了甘草总皂苷纳米粒的制备条件,以透射电镜观察纳米粒形态,紫外分光光度仪测定纳米粒包封率和载药量,激光散射仪测定粒度分布,同时进行纳米粒的体外释放性能研究。结果显示纳米粒外观形态圆整,平均粒径为114nm,包封率为43.4%,载药量为16.4%。所确定的实验方法为甘草总皂苷纳米粒制剂的研究和.应用提供了参考。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第1章引言  9-25
  1.1 课题研究的目的、意义  9-10
  1.2 中药指纹图谱的研究现状  10-14
    1.2.1 中药指纹图谱的概念  10-11
    1.2.2 中药指纹图谱的分类  11-12
    1.2.3 中药指纹图谱的应用  12-13
    1.2.4 中药指纹图谱的发展前景  13-14
  1.3 中药提取纯化工艺  14-18
    1.3.1 中药提取新技术  14-15
    1.3.2 中药有效部位的纯化方法  15-16
    1.3.3 大孔树脂吸附法概述  16-18
  1.4 纳米粒研究概述  18-25
    1.4.1 纳米粒的类型  18-20
    1.4.2 纳米粒的特点  20
    1.4.3 纳米粒的制备方法  20-22
    1.4.4 壳聚糖纳米粒  22-23
    1.4.5 纳米中药  23-25
第2章甘草药材HPLC指纹图谱研究  25-33
  2.1 仪器与材料  25-26
  2.2 色谱条件考察  26-27
    2.2.1 不同流动相条件及洗脱梯度考察  26-27
    2.2.2 色谱条件的确定  27
  2.3 供试品溶液的制备  27-28
    2.3.1 提取溶剂的考察  27
    2.3.2 提取方法的考察  27-28
    2.3.3 供试品溶液制备方法的确定  28
  2.4 对照品溶液的制备  28
  2.5 方法学考察  28-29
    2.5.1 精密度实验  28
    2.5.2 重复性实验  28-29
    2.5.3 稳定性实验  29
  2.6 指纹图谱的建立与分析  29-31
    2.6.1 指纹图谱的建立  29-31
    2.6.2 相似度计算结果  31
  2.7 讨论  31-33
第3章甘草总皂苷的提取纯化工艺  33-45
  3.1 仪器与材料  33-34
  3.2 分析方法  34-38
    3.2.1 甘草中甘草酸含量测定方法(HPLC)  34-36
    3.2.2 甘草总皂苷含量测定方法(UV)  36-38
  3.3 甘草总皂苷的提取工艺  38-39
  3.4 大孔树脂纯化工艺  39-42
    3.4.1 树脂型号筛选  39-40
    3.4.2 上样液质量浓度的确定  40
    3.4.3 最大上样量的确定  40-41
    3.4.4 洗脱剂体积分数的确定  41-42
    3.4.5 洗脱剂用量的确定  42
    3.4.6 甘草总皂苷的制备  42
  3.5 甘草提取物的初步质量标准研究  42-44
    3.5.1 甘草提取物的初步质量标准  42-44
    3.5.2 甘草提取物的初步质量标准起草说明  44
  3.6 讨论  44-45
第4章甘草总皂苷纳米粒制备  45-52
  4.1 仪器与试剂  45-46
  4.2 纳米粒的制备方法  46
  4.3 纳米粒的质量评价方法  46
    4.3.1 外观形态及粒径  46
    4.3.2 包封率和载药量  46
  4.4 不同分子量羧甲基壳聚糖的筛选  46-47
  4.5 正交试验优化制备条件  47-48
  4.6 纳米粒的质量评价  48-50
    4.6.1 包封率和载药量测定  48-49
    4.6.2 纳米粒形态  49-50
    4.6.3 纳米粒粒径分布  50
  4.7 体外释药试验  50-51
  4.8 讨论  51-52
第5章结论和展望  52-54
  5.1 主要结论  52
  5.2 展望  52-54
参考文献  54-60
致谢  60-61
硕士在读期间发表论文  61

甘草抗肝炎有效部位及其纳米粒的制备

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