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HCMV感染人神经胶质瘤U251细胞株及对HOXB基因表达影响的研究

作　者: 戴橄
导　师: 陈利玉
学　校: 中南大学
专　业: 医学微生物学
关键词: 人类巨细胞病毒感染人神经胶质瘤细胞 HOX基因 RT-PCR
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
下　载: 51次
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内容摘要

目的：通过研究人类巨细胞病毒(HCMV)感染人神经胶质瘤细胞U251细胞株及对其HOXB1，HOXB2，HOXB3，HOXB4和HOXB9基因表达的影响，以探讨HCMV致畸的可能机制。方法：应用电镜观察感染HCMV的U251细胞的超微结构改变；免疫组化法检测被感染的U251细胞HCMV晚期抗原(HCMV-LA)；半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测U251细胞感染HCMV和/或全反式维甲酸(ATRA)处理前后HOXB1，HOXB2，HOXB3，HOXB4和HOXB9基因的相对表达水平。结果：(1)形态学观察显示HCMV感染U251细胞后出现细胞病变效应(CPE)，电镜观察有部分HCMV感染的U251细胞超微结构呈现凋亡形态学改变。(2)U251细胞表达HOXB1，HOXB2，HOXB3，HOXB4和HOXB9基因。(3)ATRA能上调U251细胞HOXB2基因的表达，对U251细胞HOXB1，HOXB3，HOXB4和HOXB9基因的表达无明显调节作用。(4)HCMV感染后，U251细胞HOXB1基因表达明显上调，HOXB2和HOXB4基因表达轻微上调，HOXB3基因于HCMV感染后第一天表达被抑制，第三天表达上调，第五天、第七天表达又被抑制。HOXB9基因的表达在HCMV感染后不同时间无明显变化。(5)ATRA能显著上调HCMV感染后U251细胞HOXB1基因的表达，而对HCMV感染后HOXB2，HOXB3，HOXB4和中南人学硕士学位论文·中文摘要HOXBg基因的表达无明显调节作用。结论：门）HCMV能感染人神经胶质瘤细胞 U25细胞株，产生细胞病变效应，部分细胞超微结构呈现凋亡形态学改变。（）HCMV感染诱导 U251细胞 HOXBI，HOXBZ和 HOXB4基因表达上调，而对 HOXB3 基因表达有抑制作用。HCMV有可能通过调控HOXB基因表达异常引起胚胎发育畸形。门）ATRA可上调U251细胞 HOXBZ基因的表达。K）ATRA育显著上调 HCMV感染后 HOXBI 基因的表达，提示 ATRA可与 HCMV协同作用调控HOXB基因表达异常。

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-8
缩略词表  8-9
前言  9-11
第一章材料与方法  11-19
  2.1 病毒与细胞  11
  2.2 主要试剂及仪器  11-12
  2.3 技术路线  12
  2.4 病毒增殖与TCID_(50)滴定  12-13
  2.5 实验分组  13
  2.6 形态学检查  13-14
  2.7 病毒增殖检测  14-16
  2.8 RT-PCR检测U251细胞HOXB基因的相对表达水平  16-19
第二章实验结果  19-28
  2.1 HCMV感染量的测定  19
  2.2 HCMV感染U251细胞形态学改变  19-20
  2.3 HCMV感染的U251细胞上清液检测  20
  2.4 免疫组化检测HCMV-LA  20
  2.5 PCR扩增HCMV-DNA  20
  2.6 RT-PCR检测U251细胞HOXB基因的相对表达水平  20-28
第三章讨论  28-33
第四章结论  33-34
第五章附图  34-42
参考文献  42-46
综述  46-57
致谢  57

HCMV感染人神经胶质瘤U251细胞株及对HOXB基因表达影响的研究

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