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鱼腥草注射剂致敏原性成分的研究

作 者: 邱云
导 师: 贺福元
学 校: 湖南中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 鱼腥草注射剂 抗原 抗体 免疫球蛋白E 致敏原性成分 代谢产物 GC-MS
分类号: R286
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 43次
引 用: 1次
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内容摘要


目的:利用抗原抗体特异性反应原理筛选鱼腥草注射剂中的致敏原性成分,为寻找鱼腥草注射剂的致敏原做初步探索。方法:鱼腥草注射剂致敏豚鼠后获得免疫血清,ELISA检测血清中总免疫球蛋白E的含量,采用盐析法和柱层析技术提纯并分离血清中免疫球蛋白E,根据抗原抗体特异性结合的原理,用免疫球蛋白E捕获鱼腥草注射剂原成分及代谢产物后通过GC-MS检测它们的差异性,从而筛选出致敏原性成分。结果:分别筛选出22种鱼腥草注射剂致敏原性原成分和20种致敏原性代谢产物。致敏原性原成分分别为:十四烷酸、7,9-二叔丁基-1-氧螺(4,5)癸-6,9-二烯-2,8-二酮、(1a,2β,5a)-(+/-)-5-甲基-2-(1-甲乙基)-环己醇、2,6,10-三甲基1-十五烷、十七烷、2,6,10,14-甲基-十五烷、正十二烷酸、三十四烷、4-甲基-1-(1-甲乙基)-3-环己烯-1-醇、2,6,10,14-四-甲基-十六烷、β-月桂烯、2-(十六烷氧基)-乙醇、3-己二氢-2(3H)-呋喃酮、2-甲基-十六烷、6,6-二甲基-2-次甲基-(1S)-二环[3.1.1]庚烷、十九烷、硬脂酸-2-羟乙酯、乙酸龙脑酯、甲基正壬酮、n-癸酸、a,a,4-三甲基-3-环己烯-1-甲醇、3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇;致敏原性代谢产物分别为:4-异丙基-1,3-环己二酮、1-异丙基-7-甲基-9,10-菲醌、5β,6β-环氧-17-氧-6a-戊基-4-去甲基-3,5-裂雄烷-3-酸甲酯、2-己基-1-癸醇、7-甲基-十八烷、甲氧基乙酸-4-十三烷基酯、3-环已基十二烷、2-(1H-嘌呤-6-硫)-N-[(四氢-2-呋喃基)甲基]-乙酰胺、2-羟甲基-肌苷、六十烷、(+-)-(6S,7R)-6,7-环氧-反-三环[7.3.0.0(2,6)]十二烷、3-乙烯基-3,7,7-三甲基-6,10,10b-三羟基-5-[(3-异丁胺基-3-氧代丙酰基)氧基]-全氢化-萘并[2,1-b]吡喃-1-酮、1R,3-反-二甲氧基-2-甲基环己烷、4,8-二甲基二十七烷、三十二烷、1-乙基-4-(4-哌啶基)-哌嗪、4-肟亚甲基-2,2,5,5-四甲基-3-咪唑-1-酮、5,8-十三烷二酮、8,11-十八烷二酸甲酯、3-(2,2,3,3-四甲基亚环丙基亚甲基)-4-甲基-己酸。结论:本文初步筛选出鱼腥草注射剂致敏原性原成分和代谢产物,为研究其临床过敏反应机制及排除鱼腥草注射剂的致敏原因提供依据,从而有望恢复其临床使用。

全文目录


中文摘要  5-7
Abstract  7-10
引言  10-14
第一章 豚鼠致敏及免疫球蛋白E的分离  14-30
  1.1 免疫血清的制备  14-19
    1.1.1 仪器与试药  14-15
    1.1.2 动物  15
    1.1.3 免疫血清的制备  15
    1.1.4 豚鼠血清总IgE的含量测定  15-16
    1.1.5 实验结果  16-18
    1.1.6 分析与讨论  18-19
  1.2 豚鼠免疫血清IgE的分离与鉴定  19-30
    1.2.1 仪器与试剂配制  19-22
    1.2.2 豚鼠血清免疫球蛋白的纯化  22
    1.2.3 豚鼠血清IgE的分离  22-23
    1.2.4 采用SDS-PAGE电泳鉴定豚鼠血清IgE  23-25
    1.2.5 实验结果  25-27
    1.2.6 分析与讨论  27-30
第二章 基于抗原抗体反应筛查鱼腥草注射剂致敏原性成分的研究  30-37
  2.1 仪器与试剂  31
  2.2 基于抗原抗体反应原理致敏原性成分的筛查  31-32
  2.3 致敏原性成分的检测  32-33
  2.4 实验结果  33-35
    2.4.1 方法学考察  33
    2.4.2 鱼腥草致敏原性成分的种类  33-35
  2.5 分析与讨论  35-37
第三章 基于抗原抗体反应筛查鱼腥草注射剂致敏原性代谢产物的研究  37-43
  3.1 仪器与试剂  37
  3.2 供试品的制备  37-38
  3.3 致敏原性代谢产物的检测  38
  3.4 实验结果  38-41
    3.4.1 方法学考察  38-39
    3.4.2 鱼腥草致敏原性成分的种类  39-41
  3.5 分析与讨论  41-43
结语  43-44
致谢  44-45
参考文献  45-47
综述 鱼腥草注射剂不良反应研究概况  47-60
  参考文献  57-60
攻读学位期间主要研究成果及发表论文  60

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药品
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