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HBV preS基因变异的临床意义及其突变位点的检测方法的建立

作　者: 胥飚
导　师: 杨致邦
学　校: 重庆医科大学
专　业: 病原生物学
关键词: 乙型肝炎病毒 preS基因基因突变临床意义突变位点反向斑点杂交技术
分类号: R512.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

第一部分HBVpreS基因变异的临床意义目的:对重庆地区HBV感染患者的HBV preS基因序列进行分析,观察preS基因变异发生的位点、频率和类型,探讨重庆地区HBV preS基因变异特点,研究不同的HBV preS基因变异与疾病转归、预后的关系。方法:选取2009年3月至11月重庆医科大学附属第一医院就诊的38例乙肝病毒感染者,其中无症状携带者(ASC)13例、慢性乙肝患者(CHB)19例,肝细胞癌患者(HCC)6例。采用PCR扩增HBV preS基因,将扩增产物进行序列测定分析,并与GeneBank数据库中收录的EF325674序列进行比对,筛选突变位点。结果:共筛选出五个位于T-淋巴细胞识别位点的基因点突变:第155、165氨基酸的密码子突变发生率在CHB组均显著高于ASC组,均有显著性差异(P<0.05);第35位、第39位、第48位氨基酸的密码子突变在三个组的发生频率无显著性差异(P>0.05);并且发现第35位和第155位氨基酸的密码子突变发生率在高病毒血症组高于低病毒血症组(P<0.01)。结论:HBV preS基因变异与疾病的进展、预后有关。其中第155或165位氨基酸密码子突变易导致肝炎的慢性化,与临床预后关系密切,而第35、39、48位氨基酸密码子突变与疾病发展、转归关系不大。第二部分检测HBV preS基因常见突变位点的反向斑点杂交技术的建立目的:利用反向斑点杂交技术建立用于检测HBV preS基因常见突变位点的方法。方法:根据HBV preS基因变异中的第155、165氨基酸位点突变设计寡核苷酸探针,利用反向斑点杂交技术对HBV患者突变位点进行检测。结果:建立了检测HBV preS基因常见突变位点的方法,对前述38例HBV患者的preS基因突变位点进行了检测,需时仅4小时,并且符合率100%。结论:反向斑点杂交技术可一次性筛查多个不同的位点,方便快捷,费用低,能应用于临床进行HBV preS基因突变检测,利于判断HBV感染患者的预后。

全文目录

缩略语名词英汉对照  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-11
前言  11-15
第一部分 HBV PRES 基因变异的临床意义  15-32
  1 材料与方法  15-19
  2 结果  19-28
  3 讨论  28-30
  参考文献  30-32
第二部分检测HBV PRES 基因常见突变位点的反向斑点杂交技术的建立  32-39
  1 材料与方法  32-34
  2 结果  34-36
  3 讨论  36-38
  参考文献  38-39
全文总结  39-40
附图  40-42
文献综述  42-48
  参考文献  46-48
致谢  48-49
攻读硕士期间发表的论文  49

HBV preS基因变异的临床意义及其突变位点的检测方法的建立

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