学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

壳聚糖-pGU6/GFP/Neo-shSTA纳米粒沉默stathmin基因对肺腺癌细胞化疗敏感性的影响

作　者: 宋银峰
导　师: 黄畦
学　校: 华中科技大学
专　业: 普胸外科
关键词: 肺癌纳米壳聚糖 shRNA stathmin 化疗
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 20次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:观察以天然纳米材料壳聚糖包裹stathmin基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒介导转染肺腺癌细胞A549,是否增强细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性,为壳聚糖纳米载基因颗粒在肺腺癌生物学治疗中的应用提供依据。方法:构建靶向stathmin基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,并酶切、测序鉴定;脂质体介导转染A549细胞,RT-PCR、Western Blot方法检测该质粒对靶基因的沉默效能;采用复凝聚法合成靶向stathmin的壳聚糖-shRNA纳米粒;分别以壳聚糖-shRNA纳米粒、阳离子脂质体基因复合物转染A549细胞,MTT法检测细胞对化疗药物紫杉醇敏感性的变化。结果:成功构建了靶向stathmin基因的shRNA真核表达质粒pGU6/GFP/Neo-shSTA;转染A549细胞后stathmin基因的mRNA、蛋白质表达水平较对照组均显著降低(P<0.05);成功制备了靶向stathmin的壳聚糖-shRNA纳米粒;该纳米粒转染A549细胞后在细胞内可检测到报告基因(GFP)的明显表达;壳聚糖-shRNA纳米粒、阳离子脂质体基因复合物转染A549细胞组与空白对照组相比,半数抑制率(IC50)均显著降低(P<0.05),壳聚糖组降低的程度小于脂质体组(P<0.05)。结论:质粒pGU6/GFP/Neo-shSTA能高效靶向沉默stathmin基因的表达;本实验制备了壳聚糖纳米载基因颗粒,成功转染了A549细胞;靶向stathmin的壳聚糖-shSTA纳米粒转染肺腺癌细胞,能显著增强细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性;壳聚糖介导shRNA转染对A549细胞的紫杉醇敏感性提高的程度低于脂质体。

全文目录

中文摘要  5-6
Abstract  6-8
中英文缩略词表  8-9
前言  9-13
材料与方法  13-16
实验方法  16-24
结果  24-30
讨论  30-33
结论  33-34
参考文献  34-37
综述  37-47
  参考文献  43-47
致谢  47

壳聚糖-pGU6/GFP/Neo-shSTA纳米粒沉默stathmin基因对肺腺癌细胞化疗敏感性的影响

内容摘要

全文目录

相似论文