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LI-cadherin基因表达水平的变化对胃癌细胞生物学性状的影响研究

作　者: 奚海林
导　师: 牛建华
学　校: 石河子大学
专　业: 外科学
关键词: CDH17 转染胃肿瘤侵袭
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：我国胃癌发病率仍然居所有癌肿的第一位,死于胃癌人数约占全球该病死亡总人数的1/4。多数患者为进展期晚期胃癌,手术根治率低,术前术后放化疗效果差,毒副作用大,至今没有统一的化疗方案,因而肿瘤的基因治疗有望成为一种新的治疗策略。细胞的失调控的异常增殖和凋亡的抑制是肿瘤发生的重要环节。肝肠-钙黏连蛋白(LI-cadherin,CDH 17)作为一种与肿瘤侵袭和转移密切相关的蛋白,在胃黏膜上皮同样高特异性表达。最近发现CDX2与CDH17与胃癌的发生、分化、转移等密切相关,二者有望成为胃癌诊断新的生物学标志和肿瘤基因治疗新靶点。本研究抽提并鉴定CDH17/pcDNA3.1(-)真核表达质粒,脂质体介导转染BGC-826细胞,旨在观察外源CDH17基因可否有效转染胃癌细胞并初步研究其抗胃癌细胞生物学活性的效果,为进一步探讨CDH17基因在抗肿瘤方面的机制及用于基因治疗做准备。方法：1瞬时转染胃癌细胞并鉴定CDH17基因的表达：利用脂质体Lipofectamine 2000瞬时转染BGC-826胃癌细胞,抽提转染48h后细胞总蛋白,通过Western blot检测CDH17在蛋白质水平的表达情况。2转染后的体外实验：实验分三组,取48h转染CDH17/pcDNA3.1(-)质粒、阴性对照组及空载体pcDNA3.1(-)质粒组。鉴定转染CDH17成功的BGC-826细胞分别做侵袭实验和划痕实验。结果：1瞬时转染后应用、Vestern blot分别检测到CDH17基因的表达。2转染CDH17/pcDNA3.1(-)质粒的BGC-826细胞的侵袭力、迁移能力较转染阴性对照组及空载体pcDNA3.1(-)质粒组BGC-826细胞明显降低((P<0.05)。结论1. CDH17蛋白在人胃腺癌细胞株BGC-826中通过Western-blot蛋白质印迹法检测呈低表达。2.外源性CDH17基因转染入胃腺癌细胞株BGC-826中可提高人胃腺癌细胞株BGC-826细胞内CDH17蛋白水平表达。3.CDH17/pcDNA3.1(-)真核表达重组质粒转染入胃癌BGC-826细胞后,能降低胃癌细胞的侵袭能力及迁移能力,其作用方式可能是通过多种途径抑制人胃腺癌细胞株BGC-826的侵袭和转移能力。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-8
英文缩略词表  8-9
前言  9-11
第一部分:人CDH17基因真核表达质粒的抽提与鉴定  11-19
  材料与方法  11-14
    1 材料  11-12
    2 方法  12-14
  结果  14-17
  讨论  17-19
第二部分:外源CDH17对胃腺癌BGC-826细胞株蛋白表达的影响  19-31
  材料与方法  19-27
    1 材料  19-23
    2 方法  23-27
    3 统计学处理  27
  结果  27-29
  讨论  29-31
第三部分:CDH17过表达对胃腺癌BGC-826细胞株的影响及意义  31-37
  材料与方法  31-33
    1 材料  31-32
    2 方法  32-33
    3 统计学处理  33
  结果  33-34
  讨论  34-37
结论  37-38
参考文献  38-41
文献综述  41-46
  参考文献  44-46
致谢  46-47
作者简介  47-48
导师评阅表  48

LI-cadherin基因表达水平的变化对胃癌细胞生物学性状的影响研究

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