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用AFLP标记构建白桦遗传连锁图谱

作 者: 吕澈妍
导 师: 姜廷波
学 校: 东北林业大学
专 业: 林木遗传育种
关键词: AFLP 遗传连锁图谱 白桦 欧洲白桦
分类号: S792.153
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 44次
引 用: 1次
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内容摘要


白桦速生、优质、适应性强,是一种用途十分广泛的树种。为了满足林业生产对白桦的需要,应用分子育种技术对白桦进行遗传改良,构建遗传图谱是一项最基础工作。本研究通过对几种分子标记技术的比较,发现AFLP技术具有多态性高、稳定性强、可重复性好、分辨率高、所需DNA用量少,及操作简单等优点,是进行白桦分子标记相关研究的好方法。本研究以来自中国帽儿山种源的中国白桦(Betula platyphylla Suk)为母本,来自芬兰种源的欧洲白桦(Betula pendula Roth)为父本,RAPD标记检测表明,两亲本间存在较高的遗传多态性,2005年4月中旬通过人工授粉配制杂交组合,8月上旬采集成熟果穗,次年5月播种育苗,共获得400株生长发育正常的个体,随机挑选出78个个体作为待测植株。利用AFLP标记技术分析中国白桦×欧洲白桦的78个F1个体,并按照拟测交作图策略,建立了白桦和欧洲白桦遗传连锁图谱。从64对AFLP引物组合中筛选出45对多态性较好的引物组合。利用筛选出的45对引物组合,对父母本和78株白桦F1代进行扩增,共获得343个多态性分离位点。X2检验表明,有311个符合1:1拟测交分离位点。在这些位点中168个来自中国白桦,143个来自欧洲白桦。利用父母本分离标记位点,分别对中国白桦和欧洲白桦构建遗传连锁图谱。白桦的168个分离位点构成9个连锁群,11个三联体和14个连锁对,连锁标记覆盖的总距离为1909.2 cM,平均图距为16.9 cM。欧洲白桦的143个位点构成12个连锁群,4个三联体和9个连锁对,连锁标记覆盖的总距离为1857.3 cM,平均图距为15.2cM。该图谱的建立为白桦重要性状QTL定位和分子标记辅助选择奠定了研究基础。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-7
1 绪论  7-16
  1.1 课题背景  7-8
    1.1.1 白桦简介  7
    1.1.2 白桦的研究进展  7-8
  1.2 分子标记技术的发展  8-12
    1.2.1 分子标记的特点  8
    1.2.2 几种常见的分子标记  8-12
    1.2.3 几种常见分子标记的比较  12
  1.3 林木遗传图谱的发展及应用  12-15
    1.3.1 遗传图谱的原理  12-13
    1.3.2 遗传图谱的构建  13
    1.3.3 林木遗传图谱的研究进展  13-14
    1.3.4 遗传图谱的应用  14-15
  1.4 本研究的内容及意义  15-16
2 材料与方法  16-23
  2.1 实验材料  16
    2.1.1 亲本检测及作图群体建立  16
    2.1.2 白桦叶片的采集  16
  2.2 仪器与试剂  16-18
    2.2.1 主要仪器  16
    2.2.2 试剂  16-18
  2.3 实验方法  18-23
    2.3.1 DNA提取与纯化  18-19
    2.3.2 AFLP分析  19-22
    2.3.3 连锁图谱的构建  22-23
3 结果与分析  23-29
  3.1 白桦基因组DNA的提取  23
  3.2 AFLP分析  23-26
    3.2.1 AFLP多态性引物组合的筛选  23-24
    3.2.2 AFLP标记在白桦×欧洲白桦F1群体中的分离  24-25
    3.2.3 扩增位点的多态性  25-26
  3.3 连锁图谱构建  26-29
4 讨论  29-31
  4.1 白桦高质量模板DNA的有效提取  29
  4.2 AFLP作图标记的分析  29
  4.3 拟测交策略  29-30
  4.4 下一步工作的展望  30-31
结论  31-32
参考文献  32-36
附录  36-41
攻读学位期间发表的学术论文  41-42
致谢  42-43

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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶乔木 > 桦木 > 白桦
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