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固体浸没透镜在荧光显微镜中的应用研究
作 者: 徐学明
导 师: 傅星;李艳宁
学 校: 天津大学
专 业: 测试计量技术及仪器
关键词: 荧光显微镜 固体浸没透镜 采集效率 分辨力
分类号: TH742
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
荧光显微技术是当今生物医学、分析化学、表面物理、材料学等领域主要的科研手段之一。随着科学研究不断地向微纳米量级深入发展,对荧光显微镜的空间分辨力也提出了越来越高的要求。荧光显微镜具有灵敏度和信噪比高、特异性强等优点。但是由于受到衍射极限的限制,荧光显微镜的分辨力被局限在λ/2。为了使荧光显微镜应用于微纳米量级的研究,必须进一步提高它的分辨力。通常某些物质的荧光比较微弱,以至于探测器无法分辨,因此提高荧光显微镜的荧光采集效率也是非常必要的。固浸透镜不仅可以提高荧光显微镜的分辨力和放大倍数,而且可以提高它的荧光采集效率。同时,固浸透镜具有加工简单、使用方便、环境适用性强等优点。本论文深入研究了固浸透镜在荧光显微镜中的应用,这为将来把固浸透镜引入单分子跟踪研究领域提供了依据。本论文的主要内容包括:1.介绍了荧光显微镜和固浸透镜的原理、分类及应用,分析了固浸透镜在荧光显微镜中应用的优缺点,并进一步提出了本论文的研究意义及主要工作。2.从理论上分析了三种固浸透镜在荧光显微镜中应用对分辨力、荧光采集效率及放大倍数的影响。3.设计了适合荧光显微镜的半球型和超半球型固浸透镜,并论述了其加工方法。4.评价了固浸透镜的表面粗糙度,以及它们应用到荧光显微镜中的效果。研究表明半球型固浸透镜和Weierstrass超半球型固浸透镜分别可以使荧光采集效率提高2.54倍和5.5倍,分别可以使放大倍数提高2.06倍和7.9倍,两种固浸透镜都可以提高分辨力。5.分析了不同半径和厚度及底面是否镀膜的固浸透镜对分辨力、荧光采集效率和放大倍数的影响,研究表明半径变大,荧光采集效率降低,分辨力保持不变;厚度变大,荧光采集效率、分辨力和放大倍数相应变大,但是厚度超过Weierstrass超半球厚度后,荧光采集效率和分辨力都开始逐渐降低;镀膜可以提高荧光采集效率,但不影响分辨力和放大倍数。6.对课题内容进行了总结,对今后的工作进行了展望。
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全文目录
摘要 3-4 ABSTRACT 4-8 第一章 绪论 8-23 1.1 荧光显微镜概述 8-15 1.1.1 荧光简介 8-10 1.1.2 荧光显微镜的原理、分类及应用 10-14 1.1.3 荧光显微镜的发展 14-15 1.2 固体浸没透镜技术概述 15-20 1.2.1 固体浸没透镜技术的概念 15-17 1.2.2 固体浸没透镜技术的应用及发展动态 17-20 1.3 本课题的意义及主要工作 20-23 第二章 固体浸没透镜技术理论分析 23-36 2.1 平板型固浸透镜技术 23 2.2 半球型固浸透镜技术 23-29 2.2.1 半球型固浸透镜提高空间分辨力的理论分析 24-26 2.2.2 半球型固浸透镜提高荧光采集效率的理论分析 26-27 2.2.3 半球型固浸透镜提高显微系统放大倍数的理论分析 27-29 2.3 超半球型固浸透镜技术 29-33 2.3.1 超半球型固浸透镜提高空间分辨力的理论分析 29-31 2.3.2 超半球型固浸透镜提高荧光采集效率的理论分析 31-32 2.3.3 超半球型固浸透镜提高显微镜放大倍数的理论分析 32-33 2.4 三种固浸透镜的比较 33 2.5 增透膜理论分析 33-36 第三章 固体浸没透镜的设计与加工 36-45 3.1 材料的选择 36-37 3.2 结构设计 37-41 3.2.1 半球型SIL 的结构设计 37-39 3.2.2 超半球型SIL 的结构设计 39-41 3.3 固浸透镜的加工 41-45 第四章 SIL 粗糙度评价及应用实验 45-63 4.1 固浸透镜的表面粗糙度评价 45-46 4.2 实验设备及样本 46-48 4.3 平板型固浸透镜的应用实验 48-51 4.4 半球型固浸透镜的应用实验 51-56 4.4.1 半球型SIL 厚度变化实验 52-54 4.4.2 半球型SIL 半径变化实验 54-55 4.4.3 半球型SIL 底面镀膜实验 55-56 4.5 超半球型固浸透镜应用实验 56-63 4.5.1 超半球型SIL 厚度变化实验 57-59 4.5.2 超半球型SIL 半径变化实验 59-60 4.5.3 超半球型SIL 底面镀膜实验 60-63 第五章 总结与展望 63-65 参考文献 65-68 发表论文和参加科研情况说明 68-69 致谢 69
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中图分类: > 工业技术 > 机械、仪表工业 > 仪器、仪表 > 光学仪器 > 显微镜
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