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纤维素酶高产菌株的选育

作　者: 蒋琼凤
导　师: 谢达平
学　校: 湖南农业大学
专　业: 微生物学
关键词: 真菌纤维素酶羧甲基纤维素酶活滤纸酶活固体发酵筛选诱变鉴定
分类号: TQ925
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

纤维素酶广泛应用于食品、酿酒、饲料加工等诸多领域。目前菌种产酶性能不佳,菌种易退化,使得纤维素酶的生产成本高、生产规模小。提高纤维素酶的产率,使其更好的应用于工业领域,筛选出具有较高产纤维素酶活力的真菌菌株具有重要意义。笔者从腐烂的稻草、谷壳和树叶等采集样品,以刚果红染色法进行初筛,筛选出菌落生长良好、透明圈明显的产纤维素酶真菌35株,然后通过DNS法测酶活复筛,并结合滤纸崩解情况观察,发现液体摇瓶下具有较高CMCase和FPAase活性的真菌16株,最后经固体发酵,得到酶活较高且稳定的野生菌株6株,其中酶活最高的菌株命名为H,其CMC酶活力和FPA酶活力分别达到2993.3U/g、346.56U/g。采用三种不同的方法提取菌株H的DNA,使用真菌保守序列通用引物ITS1和ITS4对真菌ITS区段的DNA进行扩增,依据ITS区段的DNA序列在NCBI数据库中的比对结果,结合其孢子和菌丝等形态学特征,参考真菌鉴定手册,可初步确定菌株H为新种。同时,本研究还将菌株H作为出发菌株,对其进行紫外诱变处理,发现以160s UV诱变最佳,该剂量下诱变筛选到突变株H1, H1的CMC酶活力为3554.88 U/g、FPA酶活力为506.76 U/g,其CMC酶活是出发菌种的1.18倍,FPA酶活是出发菌株的2.48倍,且H1经传代后酶活较高且稳定。

纤维素酶高产菌株的选育

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