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湖北野生春兰资源的遗传多样性研究

作　者: 高丽
导　师: 杨波
学　校: 中国科学院研究生院（武汉植物园）
专　业: 植物学
关键词: Cymbidium goeringii 野生资源 ISSR 居群遗传结构 保护
分类号: S682.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 287次
引　用: 5次
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内容摘要


近年来，由于过度采挖和生境片断化，湖北野生春兰资源正面临着灭绝的危险。本文采用ISSR分子标记技术对湖北省内的11个春兰野生居群共325个个体的遗传多样性水平及居群遗传结构进行了研究。11个引物共扩增出127个位点，其中112个为多态位点，占88.19％。POPGENE分析结果表明：与其他兰科植物相比，春兰具有丰富的遗传变异（在物种水平上，He=0.2628，Ho=0.4037；在居群水平上，PPL=63.06％，He=0.1945，Ho=0.2958）。Nei’s遗传多样性分析和AMOVA分析表明，各居群间产生了一定程度的遗传分化(GST=0.2440，FST=0.2207)。居群间一定程度的遗传分化可能是由基因流障碍（Nm=0.8828）和对生境的人为破坏引起。UPGMA聚类分析可知，恩施地区的5个居群优先聚成一支，而大悟（DW）居群与其他居群分开单独聚为一支。Mantel检验结果表明居群间的地理距离和遗传距离之间没有显著相关性（r=0.25093，p=0.9704）。根据以上研究结果，我们提出如下保护措施：（1）来凤（LV）、京山（JS）、大悟（DW）居群现存个体尚多，遗传多样性损失不甚严重，因此以保护其所在的生境为基础，设立保护点进行就地保护是比较合适的保护策略；（2）毛坝（MB）和宣恩（XE）居群目前受破坏程度非常严重，所剩个体很少，遗传多样性较低，已经很难进行有效的就地保护。因此，对这两个居群应采用迁地保护的手段抢救目前尚存的个体。

全文目录


中文摘要  3-4
英文摘要  4-7
第一章 前言  7-17
  1.1 遗传多样性概述  7-8
    1.1.1 遗传多样性的含义  7
    1.1.2 遗传多样性的研究意义  7
    1.1.3 遗传多样性的检测方法  7-8
  1.2 ISSR分子标记技术  8-11
    1.2.1 ISSR标记技术的原理  8-9
    1.2.2 ISSR标记技术的特点  9
    1.2.3 ISSR标记技术的操作步骤  9-10
    1.2.4 ISSR标记技术的应用  10-11
  1.3 兰科植物的现状及保护意义  11-14
  1.4 春兰研究概况  14-15
  1.5 本研究的目的和意义  15-17
第二章 材料和方法  17-24
  2.1 实验材料  17-18
  2.2 基因组 DNA的提取  18-19
  2.3 筛选引物  19
  2.4 ISSR反应条件的优化  19-22
    2.4.1 模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响  20
    2.4.2 Mg~(2+)浓度对ISSR-PCR反应的影响  20
    2.4.3 dNTPs浓度对ISSR-PCR反应的影响  20-21
    2.4.4 引物浓度对ISSR-PCR反应的影响  21
    2.4.5 Taq DNA聚合酶的含量对ISSR-PCR反应的影响  21
    2.4.6 退火温度对 ISSR-PCR反应的影响  21
    2.4.7 循环次数对 ISSR-PCR反应的影响  21-22
  2.5 PCR扩增及产物检测  22
  2.6 数据统计分析  22-24
第三章 结果与分析  24-28
  3.1 ISSR-PCR反应体系的建立  24
  3.2 ISSR-PCR扩增结果  24
  3.3 物种和居群水平的遗传多样性  24-25
  3.4 居群遗传结构  25-26
    3.4.1 居群间遗传分化程度的比较分析和基因流  25-26
    3.4.2 居群间的遗传距离和遗传一致度  26
  3.5 聚类分析  26-28
第四章 讨论  28-33
  4.1 反应成分及条件对ISSR-PCR扩增反应的影响  28-29
  4.2 春兰的遗传多样性  29-30
  4.3 春兰居群的遗传分化与基因流  30-31
  4.4 野生春兰资源的保护  31-33
参考文献  33-40
致谢  40-41
附录  41

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 观赏园艺（花卉和观赏树木） > 多年生花卉类 > 其他花卉类 > 兰科植物
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