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体外培养人树突状细胞脂质体介导转染HBcAg基因的实验研究

作　者: 郭小芙
导　师: 李军
学　校: 南京医科大学
专　业: 内科学
关键词: 肝炎病毒,乙型肝炎核心杭原,乙型树突状细胞脂质体转染
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus HBV)感染是一个世界范围内的高感染率、高危害性的疾病：全球约有3.5亿HBV感染者，仅我国乙肝病毒感染率就达约60-70％，其中15-25％感染者最终会死于HBV相关性疾病，这使得HBV感染成为危害人类最严重的疾病之一。目前，抗乙肝病毒的主要治疗药物为干扰素和核苷类似物拉米夫定等，但是由于二者均不能消除病毒复制模板共价闭合环状DNA(cccDNA)的存在，故停药后病情仍会反复。因此对于慢性HBV感染治疗上的深入研究有着极强的现实意义。现有的研究发现在持续性HBV感染的发病机制中，特异性细胞免疫能力的低下或不足起着至关重要的作用，而树突装细胞(DC)作为目前已知的人体内最强大的抗原递呈细胞，机体免疫反应的始动者，通过参与抗原的摄取加工与递呈，对诱导免疫应答起着关键性的作用，与慢性乙型肝炎的发病机理和治疗都有十分紧密的联系。以DC为基础的免疫治疗正成为慢性HBV感染研究的新方向。既往研究证实慢乙肝患者的DC存在成熟与功能的异常，导致其激活特异性抗病毒免疫反应特别是细胞免疫反应能力低下。因此，恢复慢性乙型肝炎患者DC的功能以增强其激活特异性抗HBV免疫反应能力，则可能达到打破免疫耐受，彻底清除HBV的作用。要保持高水平的持久的抗病毒免疫效应需要以致敏的DC反复刺激机体。为了使DC

全文目录

中文摘要(关健词)  3-5
英文摘要(关键词)  5-8
第一部分体外培养人树突状细胞以及质粒的提取  8-17
  引言  8
  材料与方法  8-12
    一、材料  9-10
      1研究对象  9
      2主要试剂  9
      3主要仪器  9-10
    二、方法  10-12
      1 DC的分离及诱导培养  10-11
      2 DC的形态学鉴定  11
      3质粒的提取  11-12
  结果  12-14
  讨论  14-15
  参考文献  15-17
第二部分脂质体介导质粒转染树突状细胞及其表达的实验研究  17-30
  引言  17
  材料与方法  17-24
    一脂质体介导的转染  17-18
    二设计引物扩增目的基因  18-19
    三western-Blotting技术验证其表达产物  19-24
      (一)材料  19-20
      (二)一些主要试剂的配制  20-22
      (三)具体步骤  22-24
  结果  24-26
  讨论  26-28
  参考文献  28-30
附录  30-31
致谢  31-32
发表的相关论文  32-41
综述及参考文献  41-58
论文独创性声明  58
论文使用授权声明  58

体外培养人树突状细胞脂质体介导转染HBcAg基因的实验研究

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