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机械通气致兔急性肺损伤后肺内VCAM-1和VEGF时序性表达的研究

作 者: 巫智勇
导 师: 熊平
学 校: 南华大学
专 业: 病理及病理生理学
关键词: 法医病理学 损伤时间 血管细胞粘附因子 血管内皮生长因子 免疫组织化学染色 免疫蛋白印迹
分类号: R563
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 98次
引 用: 1次
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内容摘要


目的:研究大潮气量机械通气致兔急性肺损伤(ALI)后肺组织在炎症发生发展及愈合修复过程中血管细胞粘附因子(VCAM-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的动态表达变化及其与损伤时间的关系。 方法:(1) 以兔存活率、肺水肿及病理组织改变程度为衡量标准,建立大潮气量机械通气致兔急性肺损伤的动物模型。(2)按兔急性肺损伤模型分别在急性肺损伤后不同时间点肺标本取材,实验方法包括:右上肺组织湿干重比(W/D)比较不同时间点肺水肿情况;常规HE染色反映肺损伤后肺组织病理形态学改变;免疫组织化学染色(SABC法)检测VCAM-1及VEGF的表达变化;免疫蛋白印迹(western blotting)检测VCAM-1和VEGF表达情况。 结果:实验组B(V_T 60ml/kg)与实验组A(V_T 45ml/kg)比较,肺组织病理改变和炎症反应明显,肺水肿程度严重;与实验组C(V_T 68ml/kg)比较,虽然病理改变和肺水肿程度差异小,但具有兔存活率高(91.67%)的特点。因此,选择试验组B作为大潮气量机械通气致急性肺损伤动物模型标准,符合下一步研究的实验需要。 在大潮气量机械通气致急性肺损伤动物模型的基础上,检测实验组(V_T60ml/kg)肺损伤后12~24h肺水肿程度及病理改变最严重;VCAM-1在急性肺损伤后3h开始在肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞内表达,3~12h内逐步上升,并在12h达到高峰,之后随时间延长逐渐下降,约在24h后未见表达:VEGF在急性肺损伤后12h在肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞内表达开始增加,在此后的36h内呈不断上升的趋势。 对图像分析数据进行统计学分析,分别曲线拟合VCAM-1在ALI后0~48h内及VEGF在ALI后6~48h内的数学回归方程式推断损伤时间。 结论:(1) 成功建立大潮气量机械通气致急性肺损伤动物模型,建立指标为V_T

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病 > 肺疾病
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