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溶解氧型酶生物传感器的研制及分析应用
作 者: 武宝利
导 师: 双少敏
学 校: 山西大学
专 业: 分析化学
关键词: 生物传感器 葡萄糖酶生物传感器 硫代葡萄糖苷酶生物传感器 鸡蛋壳膜 葡萄糖氧化酶 葡糖硫苷酶 光化学传感器 吐温-60 四苯基卟啉
分类号: TP212
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
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内容摘要
第一章:本章对生物传感器的概念、基本组成、工作原理、分类、特点及各种类型传感器的研究进展进行了综述。 第二章:本章以戊二醛为交联剂,将葡萄糖氧化酶共价交联固定于鸡蛋壳膜载体上,再将固定有酶的鸡蛋壳膜紧贴于氧电极表面制成葡萄糖生物传感器,并对最佳实验条件、电极的响应特性、可能存在的干扰物及实际样品进行了考察。实验结果表明,酶的固定化及样品测定的最佳实验条件为:交联剂戊二醛浓度为2.5%,底液磷酸缓冲溶液浓度为200 mM,pH=7,实验温度为室温。该传感器的平均响应时间为100秒,葡萄糖浓度在1.0×10-5—1.3×10-3mol/L间呈良好的线性关系(r=0.9975),检出限为0.5×10-5mol/L,RSD为3.26%(n=7),连续使用4个月后,响应值降为初始值的85.2%。实际样品中可能存在的干扰物对测定无干扰。对葡萄糖注射液、葡萄酒和人血浆样品中葡萄糖的含量进行了测定,并与葡萄糖试剂盒法测定的结果进行了对照。结果表明,此传感器具有操作简便,干扰少,检测速度快,使用寿命长等优点,对于食品和临床的葡萄糖检测具有重要的意义。 第三章:本章以戊二醛为交联剂,将葡萄糖氧化酶和葡糖硫苷酶以一定比例固定于鸡蛋壳膜载体上,再将固定有酶的鸡蛋膜紧贴于氧电极表面制成硫代葡萄糖苷酶生物传感器。并对最佳实验条件、电极的响应特性、可能存在的干扰物及实际样品进行了考察。实验结果表明,酶的固定化及样品测定的最佳实验条件为:葡糖硫苷酶与葡萄糖氧化酶的比例为6:1(质量比),底液磷酸缓冲溶液浓度为50mM,pH=6,实验温度为室温,激活剂抗坏血酸的最佳浓度为0.4 mmol/L。该传感器的平均响应时间为100秒,硫代葡萄糖苷浓度在2.5×10-5-7.5×10-4mol/L间呈良好的线性关系(r=0.9975),RSD为4.15%(n=6),连续使用3个月后,响应值仍为初始值的85以上。实际样品中可能存在的干扰物对测定无干扰。将该方法成功应用于食用蔬菜籽、传统中草药样品中硫代葡萄糖苷含量的
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全文目录
中文摘要 9-11 Abstract 11-13 第一章 概论 13-25 1.1 生物传感器概述 13 1.2 生物传感器的基本组成、工作原理、分类及特点 13-14 1.3 生物传感器的研究进展 14-22 1.4 本论文的立题背景和主要内容 22-23 参考文献 23-25 第二章 葡萄糖酶传感器的研制及分析应用 25-39 2.1 引言 25-26 2.2 实验部分 26-27 2.2.1 仪器与试剂 26 2.2.2 酶电极的制备 26 2.2.3 样品预处理 26-27 2.2.4 测定方法 27 2.3 结果与讨论 27-36 2.3.1 葡萄糖传感器的响应行为 27-28 2.3.2 戊二醛浓度的影响 28-29 2.3.3 缓冲溶液pH的影响 29-30 2.3.4 缓冲溶液浓度的影响 30-31 2.3.5 温度的影响 31-32 2.3.6 传感器的分析性能 32-33 2.3.7 干扰试验 33-34 2.3.8 分析应用 34-36 2.4 结论 36 参考文献 36-39 第三章 硫代葡萄糖苷酶传感器的研制及分析应用 39-51 3.1 引言 39-41 3.2 实验部分 41-42 3.2.1 仪器与试剂 41 3.2.2 酶电极的制备 41 3.2.3 样品预处理 41 3.2.4 测定方法 41-42 3.3 结果与讨论 42-49 3.3.1 双酶比例的影响 42-43 3.3.2 缓冲溶液pH的影响 43 3.3.3 激活剂抗坏血酸浓度的影响 43-44 3.3.4 缓冲溶液浓度的影响 44-45 3.3.5 温度的影响 45-46 3.3.6 传感器的分析性能 46-47 3.3.7 干扰试验 47-48 3.3.8 分析应用 48-49 3.4 结论 49 参考文献 49-51 第四章 酶生物传感器相关机理探讨 51-60 4.1 鸡蛋壳膜基质上酶的固定化作用机理 51-55 4.1.1 酶固定化类型 51-53 4.1.2 葡萄糖氧化酶交联固定于鸡蛋膜上的固定化机理 53-55 4.2 抗坏血酸对硫代葡萄糖苷酶激活作用的机理 55-58 参考文献 58-60 第五章 荧光化学传感器初步探索 60-65 5.1 引言 60 5.2 实验部分 60-61 5.2.1 仪器与试剂 60 5.2.2 敏感膜的制备 60-61 5.2.3 实验方法 61 5.3 结果与讨论 61-64 5.3.1 Tween-60 荧光化学传感器的测量原理 61-63 5.3.2 Tween-60 荧光化学传感器的响应行为 63-64 5.4 结论 64 参考文献 64-65 攻硕期间所发表的论文及获得的奖励 65-66 致谢 66-67 附录:已发表论文首页 67-72 承诺书 72
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中图分类: > 工业技术 > 自动化技术、计算机技术 > 自动化技术及设备 > 自动化元件、部件 > 发送器(变换器)、传感器
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