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三七凝胶预防腰椎术后硬膜外粘连的实验研究

作　者: 张兆杰
导　师: 周卫
学　校: 中国中医研究院
专　业: 中西医结合临床
关键词: 椎板切除术 粘连 三七 Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


一 前言 椎板减压术是脊柱外科最常用的手术方式,它能够解除椎管内神经根和硬膜囊的压迫,以治疗临床上一些脊柱疾病,其中有部分病人术后症状未能解除,或残存部分症状和体征,或症状曾一度缓解而后症状再次复发和加重者,临床上称腰椎手术失败综合症(Failed back surgery syndrome,FBSS)。FBSS发病率约在10%-40%。发生FBSS的原因较为复杂,其中因椎板切除术后硬膜周围组织纤维化和瘢痕形成而引起硬膜和神经的粘连,是导致腰椎术后症状复发的最常见的原因之一,所以临床上如何预防硬膜周围组织纤维化和瘢痕粘连一直是骨科领域亟待解决的难题之一。西医一直在用各种生物学材料和非生物学材料植于椎板缺损的部位,企图预防硬膜周围瘢痕粘连,取得一些效果,但仍存在不少问题。因为腰椎术后硬膜外粘连的形成并非单一因素引起的,而是多种因素共同作用下形成的。所以,预防腰椎术后硬膜外粘连应该采用多种方法协同作用,即在局部有三维立体的机械屏障作用,又能够在局部起到抑制成纤维细胞生长,减少血肿形成,同时又不影响椎间盘纤维环和正常组织的愈合,从而达到有效地预防腰椎术后硬膜外粘连。中医药在治疗和预防硬膜外瘢痕粘连等方面有独到的见解之处,它主要通过活血化瘀,益气止血通络抑制成纤维细胞的活性,对抗炎症介质的释放,促进正常组织的无瘢痕化修复。在腰椎术后使用中药或者中西医并用来预防和治疗腰椎手术失败综合症是一个新的研究方向,本文拟通过动物实验的大体观察、组织形态学角度和免疫组织化学三方面分别对术后硬膜外瘢痕粘连进行肉眼观察粘连成度、单位面积内成纤维细胞计数、Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)在瘢痕组织单位面积内的平均光密度值、Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)在瘢痕组织单位面积内的阳性细胞记数和椎管内预防粘连百分率进行计算机图象分析和统计学处理,探讨椎板缺损处放置三七凝胶(NG)预防腰椎术后硬膜外腔瘢痕粘连的有效性和可行性。 二 实验一.三七凝胶预防腰椎术后粘连的组织形态学实验研究 [实验目的];根据动物实验从大体观察、组织形态学角度分析三七凝胶预防腰椎术后粘连的有效性和可行性; [实验方法];90只Sprague-Dawley大鼠(S-D大鼠)被随机分为以下四组:实验组—三七凝胶组(NG)21只、对照组—1单纯三七组(N)21只、—2空白组(C)21只、—3纤维蛋白胶组(FG)21只。共84只,其余6只作为备份。每组再分别按术后处死时间2周、4周、8周分为三个时间段,三七凝胶组(NG)、单纯三七组(N)、空白组(C)、纤维蛋白胶组(FG)、四组在每个时间段各处死7只,其中1只作大体标本观察瘢痕的量、范围、致密程度以及解剖过程中硬膜囊的完整性。其余6只将术段脊柱连带骶脊肌整块取材、固定、脱钙、修块、石蜡包埋、作组织切片观

全文目录


摘要  7-11
  一 前言  7
  二 实验一.三七凝胶预防腰椎术后粘连的组织形态学实验研究  7-8
  三 实验二.三七凝胶预防腰椎术后粘连对Ⅰ型胶(collagen-Ⅰ)表达的影  8-10
  四 小结  10-11
综述预防腰椎术后硬膜外粘连的研究进展  11-19
  前言  11
  一 硬膜外粘连的形成机理  11-12
  二 硬膜外瘢痕与FBSS的关系  12-13
  三 组织修复与微循环改变的关系  13
  四 实验动物模型的建立  13-14
  五 腰椎术后硬膜外粘连的预防  14-18
    (一) 术中预防措施  14-17
    (二) 抑制瘢痕生成药物的应用  17
    (三) 中医药预防硬膜外粘连  17-18
  六 小结  18-19
正文  19-52
  三七凝胶预防腰椎术后硬膜外粘连的实验研究  19-52
    一 前言  19-20
    二 实验一.三七凝胶预防腰椎术后粘连的组织形态学实验研究  20-39
      (一) 实验目的  20
      (二) 材料与方法  20-25
        1 实验条件  20-21
          1.1 实验动物  20
          1.2 动物实验室  20
          1.3 形态学研究室  20
          1.4 实验药物  20-21
            1.4.1 三七的来源  20
            1.4.2 三七浓缩液的制作方法  20
            1.4.3 凝胶的来源  20
            1.4.4 三七凝胶的配制  20-21
            1.4.5 三七凝胶的消毒方法  21
            1.4.6 三七凝胶消毒的检测  21
            1.4.7 纤维蛋白胶的来源  21
        2 主要仪器  21
        3 主要试剂  21
        4 实验方法  21-23
          4.1 腰椎椎板减压手术模型的建立  21
          4.2 实验药物浓度的确定  21-22
          4.3 随机分组  22
          4.4 干预方法  22
          4.5 标本制作方法  22-23
        5 标本蜡快制作  23
        6 制作切片  23
        7 HE染色  23-24
        8 图象分析  24-25
      (三) 观察标准  25
      (四) 统计学处理  25
      (五) 结果  25-38
        1 大体观察  25-28
        2 组织学观察  28-31
        3 瘢痕组织单位面积内成纤维细胞计数  31-36
        4 椎管内预防粘连百分率(c)的计算  36-38
      (六) 结论  38-39
    三 实验二.三七凝胶预防腰椎术后粘连对Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)表达的影响  39-46
      (一) 实验目的  39
      (二) 材料与方法  39-41
        1 实验条件同实验一  39
        2 主要仪器同实验一  39
        3 主要试剂  39
        4 实验方法同实验一  39
        5 标本蜡快制作同实验一  39
        6 制作切片  39
        7 免疫组化检测  39-41
        8 图象分析  41
      (三) 观察标准  41
      (四) 统计学处理  41
      (五) 结果  41-46
      (六) 结论  46
    四 讨论  46-50
      1.关于椎板切除术动物模型的建立  46-47
        (1) 动物的选择  46-47
        (2) 椎板切除部位和方法的确定  47
      2.椎板切除术后瘢痕粘连的原因与机制  47
      3.各种物质预防硬膜外瘢痕粘连的效果  47-50
    五 总结  50-52
参考文献  52-57
  1 综述参考文献  52-55
  2 论文参考文献  55-57
致谢  57-58
个人简历  58

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