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我国主要小麦品种的AFLP指纹图谱的建立
作 者: 顾丽红
导 师: 张树珍;翁跃进
学 校: 华南热带农业大学
专 业: 作物遗传与育种
关键词: 小麦 AFLP 指纹图谱
分类号: S512.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2004年
下 载: 233次
引 用: 4次
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内容摘要
小麦种质资源是小麦遗传学研究与育种的基础。本试验利用AFLP分子标记技术,建立了我国普通小麦部分骨干亲本、大面积推广品种的指纹图谱,并分别对骨干亲本和生产上大面积推广的小麦品种进行了聚类分析。研究取得以下进展。 1 筛选引物 利用对甲基化敏感的内切酶MseⅠ-PstⅠ组合,通过多态性位点数(n)、平均遗传多样性系数(H~1)和等位基因有效数目和(SENA),选出5对多态性百分率较高、且带性丰富的引物组合,用于供试85材料的AFLP分析。 2 建立AFLP指纹图谱 利用筛选出的5对引物,建立了85分供试材料的AFLP指纹图谱,共发现33个供试材料具有特征性带,其中,有不少为我国小麦育种骨干亲本所特有。一些材料具有两条甚至更多的特征带,这些条带有助于这些材料的快速鉴别和筛选;另外,还在两份材料中得到了特异的条带,通过这些特异的条带还可以把这些品种从供试材料中快速准确地鉴别出来。 3.对供试材料进行遗传关系分析 通过聚类分析,发现:一、我国地方品种与国外引进种质之间存在明显的差异。二、由AFLP揭示的品种之间遗传关系与品种实际来源大体一致。三、我国大面积推广品种的遗传基础是相对狭窄的。
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全文目录
摘要 5-6 Abstract 6-8 前言 8-9 第一部分 文献综述 9-22 1 蛋白质指纹图谱的研究概况 9-11 1.1 同工酶技术的研究概况 9-10 1.2 小麦醇溶蛋白(gliadin)的研究概况 10-11 2 DNA指纹图谱的研究 11-19 2.1 RFLP技术的研究概况 11 2.2 RAPD技术的研究概况 11-12 2.3 小卫星DNA技术的研究概况 12 2.4 SSR技术的研究概况 12-13 2.5 AFLP技术的研究概况 13-17 2.5.1 原理 14-15 2.5.2 影响AFLP反应的因素 15-17 2.5.2.1 限制性核苷酸内切酶 15-16 2.5.2.2 引物选择 16 2.5.2.3 反应条件 16-17 2.6 其它分子标记技术 17-18 2.6.1 SSR技术的研究概况 17-18 2.6.2 STS技术的研究概况 18 2.6.3 SNP和SSCP技术的研究概况 18 2.7 几种常见的DNA指纹图谱技术的比较 18-19 3 小麦指纹图谱的研究现状 19 4 指纹图谱技术的主要应用 19-22 4.1 新品种登记和品种鉴定 19-20 4.2 品种的真实性和纯度检验 20 4.3 品种的亲缘关系和遗传多样性研究 20-22 第二部分 材料与方法 22-33 1 供试材料 22-24 2 研究方法 24-33 2.1 实验方法 24-31 2.1.1 DNA提取(酚-氯仿提取法) 24-25 2.1.2 模板DNA浓度的检测 25-26 2.1.3 DNA的酶切与连接 26-27 2.1.4 扩增过程 27-29 2.1.5 电泳 29-30 2.1.6 DNA的银染 30-31 2.2 指纹图谱的构建 31 2.3 统计分析 31-33 第三部分 结果与分析 33-50 1 纯度检测结果 33-34 1.1 AFLP电泳结果 33 1.2 田间形态性状与室内电泳结果的比较 33-34 2 引物的筛选 34-35 3 AFLP指纹技术应用于供试种质的鉴别 35-39 4 品种鉴别效率与多态性位点的关系 39-42 5 各种质APLP指纹图谱模式图 42 6 我国小麦骨干亲本的遗传关系分析 42-48 7 我国小麦生产上大面积种植品种遗传关系分析 48-50 第四部分 讨论 50-53 1 关于AFLP用于小麦品种鉴别的可行性 50 2 关于区分小麦品种所需多态性条带数的思考 50 3 小麦品种DNA指纹图谱在种子检验中的应用 50-51 4 DNA指纹图谱技术的应用问题 51-53 第五部分 结论 53-54 参考文献 54-62 附录1 部分溶液的配置 62-64 附录2 DNA接头和引物序列 64-66 致谢 66
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 麦 > 小麦
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