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单味中药对兔骨髓基质细胞增殖影响的实验研究

作　者: 李士华
导　师: 徐展望
学　校: 山东中医药大学
专　业: 中医骨伤科学
关键词: 骨髓基质细胞骨碎补醇提取液淫羊藿苷自然铜
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的：研究中药骨碎补提取液、淫羊藿苷、自然铜对兔骨髓基质细胞增殖作用的影响,探讨中药促进骨折愈合的机制。方法：取新西兰大白兔骨髓液,经licoll淋巴细胞分离液分离后行培养,以P2代细胞为研究对象,分为四组(标准培养基组、骨碎补醇提取液培养组、淫羊藿苷培养组、自然铜培养组)分别进行培养,MTT法测定其生长曲线,测量其分裂指数,行HE染色观察细胞形态,对测量的结果行统计学分析。结果：经过统计学分析,骨碎补醇提液培养组、淫羊藿苷培养组与标准培养基组有显著性差异,自然铜组与标准培养基组无显著性差异。结论：中药骨碎补和淫羊藿苷对骨髓基质细胞的增殖有明显促进作用,而自然铜对骨髓基质细胞的增殖的促进作用不明显。

全文目录

提要  3-4
Abstract  4-8
引言  8-10
材料与方法  10-16
  一、实验材料  10
    (一) 主要设备及仪器  10
    (二) 主要试剂  10
    (三) 实验动物  10
  二、单味中药的提取过程  10-11
    (一) 骨碎补醇提液的提取过程  10
    (二) 淫羊藿苷  10
    (三) 煅自然铜  10-11
  三、培养液的配制  11
    (一) 标准培养液  11
    (二) 含骨碎补醇提物培养液  11
    (三) 含淫羊藿苷的培养液  11
    (四) 含自然铜浓度的培养液  11
  四、骨髓基质细胞的原代培养  11
  五、骨髓基质细胞的传代培养  11
  六、实验分组  11-12
  七、骨髓基质细胞的条件培养  12
  八、组织形态学观察  12
    (一) 倒置相差显微镜逐日观察  12
    (二) HE染色具体步骤  12
  九、MTT比色法测不同组别的生长曲线  12-13
  十、细胞表型鉴定  13-15
    (一) 碱性磷酸酶染色  13
    (二) 碱性磷酸酶的生物学测定  13-14
    (三) Ⅰ型胶原免疫组织化学染色  14-15
  十一、统计方法  15-16
实验结果  16-20
  一、倒置相差显微镜观察结果  16
  二、HE染色的结果  16
  三、MTT法测定结果  16-17
  四、碱性磷酸酶染色结果  17-18
  五、碱性磷酸酶的生物学测定结果  18
  六、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色结果  18-20
讨论  20-32
  一、骨髓基质细胞体外培养技术操作特征  20-22
  二、中药对骨髓基质细胞的影响  22-23
  三、骨碎补的现代药理研究  23-27
    (一) 临床治疗骨损伤、骨折的研究进展  24
    (二) 临床治疗骨折疏松症的研究进展  24
    (三) 对骨细胞及骨代谢的作用研究进展  24-25
    (四) 骨碎补促进骨折愈合作用其它机制研究进展  25-26
    (五) 骨碎补在诱导骨髓间质细胞分化的研究进展  26-27
  四、淫羊藿苷的现代药理研究  27-29
    (一) 淫羊藿苷对成骨细胞增殖与分化的影响  27
    (二) 淫羊藿苷可促进机体产生成骨因子  27-28
    (三) 淫羊藿苷可促进性腺的分泌  28
    (四) 淫羊藿对破骨细胞的影响  28-29
  五、自然铜的现代药理研究  29
  六、本实验中中药对骨髓基质细胞增殖及成骨分化的影响  29-30
  七、应用前景和展望  30-32
结语  32-33
参考文献  33-36
综述  36-48
  参考文献  45-48
附录  48-51
致谢  51-52
中文详细摘要  52-57

单味中药对兔骨髓基质细胞增殖影响的实验研究

内容摘要

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