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rSNSR1和5-HT_（2A）受体调节伤害性感受的细胞学基础

作　者: 戴飞红
导　师: 洪炎国
学　校: 福建师范大学
专　业: 细胞生物学
关键词: rSNSR1 5-HT2A受体 NO CGRP PKCε 共表达背根神经节
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

大鼠感觉神经元特异性受体rSNSR1与5-HT2A受体已分别发现在吗啡抗伤害性效力调节和外周炎性痛觉过敏中起重要作用。研究指出背根神经节细胞信号分子如NO、CGRP和PKCε参与疼痛感受的形成或调制。本项研究旨在探讨rSNSR1与5-HT2A受体通过这些信号分子起作用的细胞学基础。实验应用组织培养、酶联免疫吸附(ELISA)和免疫荧光双标等实验手段对rSNSR1与NO、PKCs关系以及5-HT2A受体与的PKCε关系进行了研究。对背根神经节和三叉神经节组织进行体外培养；并连续4天给予rSNSR1的特异性激动剂BAM8-22。观察到在培养液中同时给予一氧化氮合酶的非选择性抑制剂L-NAME,会促进CGRP表达上调。免疫荧光双标结果显示,大鼠DRG中,nNOS集中性表达于rSNSR1阳性细胞内,这些细胞为中小型细胞；PKCε也与rSNSR1有明显共表达。5-HT2A受体与PKCs的共定位研究则显示,5-HT2A受体与PKCε在DRG的中小型神经元中共存。以上实验结果为本实验室过去观察到的慢性激活rSNSR1后CGRP的表达上调、吗啡镇痛效力下降,以及5-HT2A受体通过激活PKCε通路导致炎性痛觉过敏等研究结果,提供了细胞学依据。

全文目录

中文摘要  2-3
Abstract  3-4
中文文摘  4-6
目录  6-9
第一章绪论  9-23
  1.1 疼痛的治疗现状与发展  9
  1.2 疼痛的发生过程  9-11
  1.3 感觉神经元特异性受体  11-12
  1.4 5-羟色胺2A受体与疼痛  12-14
    1.4.1 5-羟色胺及其受体简介  12-13
    1.4.2 5-HT_(2A)受体在疼痛中的调节作用  13-14
  1.5 阿片类药物镇痛效力下降的研究概况  14-15
  1.6 一氧化氮和一氧化氮合酶对疼痛调节的双重作用  15-18
  1.7 降钙素基因相关肽  18-20
    1.7.1 CGRP及其受体概述  18-19
    1.7.2 CGRP与痛觉感受  19-20
    1.7.3 CGRP与吗啡耐受  20
  1.8 蛋白激酶C(PKC)与疼痛  20-22
    1.8.1 PKC简介  20
    1.8.2 PKC对疼痛的调节作用简述  20-22
    1.8.3 PKC与吗啡镇痛  22
  1.9 本课题的研究背景和意义  22-23
第二章慢性激活RSNSR1上调CGRP表达的NNOS机制  23-35
  2.1 前言  23-24
  2.2 材料与方法  24-26
    2.2.1 实验动物  24
    2.2.2 实验仪器  24
    2.2.3 实验试剂  24
    2.2.4 实验分组  24-25
    2.2.5 样本采集  25
    2.2.6 神经节外植体培养  25
    2.2.7 蛋白提取和定量  25-26
    2.2.8 竞争法ELISA测定CGRP含量  26
    2.2.9 数据处理  26
  2.3 结果  26-29
    2.3.1 DRG组织培养条件下,慢性激活rSNSR1上调CGRP的表达  26-28
    2.3.2 抑制nNOS促进慢性激活rSNSR1对CGRP表达的上调作用  28-29
  2.4 讨论  29-35
    2.4.1 慢性激活rSNSR1诱导CGRP表达上调  30
    2.4.2 抑制NOS对慢性刺激rSNSR1诱导CGRP表达的影响  30-31
    2.4.3 rSNSR1与阿片受体的相似性提示其潜在生理意义  31-35
第三章 RSNSR1与NNOS、PKCE在DRG神经元细胞内的共定位研究  35-43
  3.1 前言  35-36
  3.2 材料与方法  36-38
    3.2.1 实验动物  36
    3.2.2 实验仪器  36
    3.2.3 实验试剂  36
    3.2.4 实验方法  36-37
    3.2.5 数据处理  37-38
  3.3 结果  38-39
    3.3.1 DRG神经元中,nNOS集中于rSNSR1阳性细胞内  38-39
    3.3.2 DRG细胞内,PKCε与rSNSR1存在共表达  39
  3.4 讨论  39-43
    3.4.1 nNOS和rSNSR1的细胞内共存与细胞间相互作用  39-40
    3.4.2 rSNSR1与PKCε的细胞共定位分析  40-43
第四章 5-HT_(2A)受体与PKCE在DRG神经元中的共定位研究  43-49
  4.1 前言  43-44
  4.2 材料与方法  44-46
    4.2.1 实验动物  44
    4.2.2 实验仪器  44
    4.2.3 实验试剂  44
    4.2.4 实验方法  44-45
    4.2.5 数据处理  45-46
  4.3 结果  46
    4.3.1 PKCε和5-HT2A在DRG中的分布与共表达  46
  4.4 讨论  46-49
    4.4.1 5-HT_(2A)受体在DRG中的分布  47
    4.4.2 PKCε与5-HT_(2A)受体的非重叠表达  47-49
结论  49-51
附录1  51-53
参考文献  53-61
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果  61-63
致谢  63

rSNSR1和5-HT_（2A）受体调节伤害性感受的细胞学基础

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