学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

重组腺病毒p55PIK对肿瘤细胞成瘤性的影响

作　者: 董硕
导　师: 胡俊波
学　校: 华中科技大学
专　业: 外科学
关键词: p55PIK 腺病毒 Ad-p55PIK-GFP SW480结肠癌细胞
分类号: R730.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 13次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


背景与目的:磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphoinositide 3-kinases,PI3K)家族在机体内发挥着重要的调节作用,如细胞增殖、细胞死亡、细胞分化、细胞迁移等。除此以外,在某些肿瘤组织中可以看到PI3Ks的活性与功能异常。p55PIK作为PI3Ks的一个重要调节亚基,其在机体内的生物学功能尚不完全明确。本研究目的在于构建携带有编码p55PIK基因的腺病毒表达载体,以此为工具探求p55PIK在体内对肿瘤细胞形成肿瘤的情况。方法:以Flag-cmv-p55PIK重组质粒为模板用PCR方法进行基因扩增,将扩增的p55PIK基因构建至穿梭质粒pAdTrack-CMV内,用限制性内切酶PmeI使其线性化,然后转化至含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ5183细菌中,由此获得携带有p55PIK目的基因的重组腺病毒质粒pAd-p55PIK-GFP,经鉴定无误后,用限制性内切酶PacI使其线性化后转染入HEK293A细胞中,并通过绿色荧光观察其在细胞内的包装情况,随后经过3轮大量扩增后,收获带有目的基因的重组腺病毒载体。将扩增后的重组腺病毒感染至SW480结肠癌细胞中,然后将高效表达目的基因的该系肿瘤细胞种植于裸鼠皮下,观察其在体内对形成肿瘤的效果。结果:经酶切鉴定重组腺病毒质粒pAd-p55PIK-GFP构建成功,通过观察其绿色荧光表明其在HEK293A中包装;重组腺病毒Ad-p55PIK-GFP感染入SW480肿瘤细胞后,SW480细胞中p55PIK的表达水平明显增高,感染Ad-p55PIK-GFP的SW480细胞在体内形成的肿瘤体积明显大于空白组和空腺病毒组。结论:重组腺病毒Ad-p55PIK-GFP构建成功,高表达p55PIK蛋白促进肿瘤细胞在体内形成肿瘤。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-10
材料与方法  10-18
结果  18-21
讨论  21-23
参考文献  23-25
综述  25-41
  参考文献  37-41
致谢  41

相似论文

  1. Let-7 microRNA在小鼠胎肺发育时期的表达检测及其腺病毒穿梭质粒的构建,Q78
  2. Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1
  3. 小鼠雌激素受体α重组腺病毒感染神经细胞及小鼠中枢神经系统的鉴定,R363
  4. Ad-ING4-IL-24双基因共表达对肺癌的抑癌增效和化疗增敏的体外实验研究,R734.2
  5. 携带Ubc9基因的病毒表达载体的构建及其在细胞中的表达,Q78
  6. 携带hIL12-p40-L△p35的双靶向溶瘤腺病毒联合CIK细胞的抗癌作用研究,R730.5
  7. p55PIK慢病毒表达载体的构建及鉴定,R373
  8. p55PIK对肿瘤血管生成的影响,R730.2
  9. 溶瘤腺病毒治疗实体瘤安全性及临床疗效的初步评价,R730.5
  10. smad4及Wnt3a对MSCs的miRNA谱的影响,R580
  11. 过表达ANT1基因诱导血管平滑肌细胞凋亡与Bax/Bcl-2表达的关系研究,R541.4
  12. HGF基因促进内皮祖细胞增殖的体外研究,R329
  13. 体外重编程人脐带间充质干细胞向胰腺前体细胞分化的研究,R329
  14. 高效分泌表达内皮抑素的腺病毒载体研究,Q78
  15. 结核分枝杆菌MPT83重组腺病毒载体的构建及表达,Q789
  16. 携带IL-24基因的E1区双调控溶瘤腺病毒治疗肿瘤的研究,R73-36
  17. 携带TIMP-3基因的重组腺病毒增加HPV阳性宫颈癌放疗敏感性的体内外实验研究,R737.33
  18. 重组腺病毒AdhNIS介导荷肝癌裸鼠放射性碘摄取的实验研究,R735.7
  19. NR4A1基因调控卵泡膜细胞激素生成的研究,R711.75
  20. 人心肌特异表达新激酶TNNI3K的大鼠同源基因克隆及相关腺病毒载体构建,R541

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 一般性问题 > 肿瘤病理学、病因学
© 2012 www.xueweilunwen.com