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兴奋性氨基酸受体各亚型所介导非洲爪蟾卵母细胞跨膜电流的特征不同偶联模式的受体所介导非洲爪蟾卵母细胞跨膜电流的相互影响

作　者: 张浚
导　师: 陈厚昌
学　校: 第一军医大学
专　业: 药理学
关键词: 非洲爪蟾卵母细胞信使RNA 兴奋性氨基酸受体离子型谷氨酸受体代谢型谷氨酸受体 KA QA L-SOP Carb 交叉脱敏
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2000年
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内容摘要

用异硫氰酸胍-酚-氯仿法从成年大鼠脑中提取总RNA，以寡聚脱氧胸苷酸纤维素亲和层析法分离得mRNA，将其注射到非洲爪蟾卵母细胞中进行表达。以全细胞双电极电压钳位法，快速灌流兴奋性氨基酸受体之离子型受体激动剂kainate（KA）及兴奋性氨基酸受体之代谢型Ⅰ型受体激动剂quisqualate（QA）检测表达之离子型及代谢型Ⅰ型受体所介导的膜电流。100μM KA产生一主峰电流后缓慢下行，成为一稳定电流平台，最终脱敏，脱敏时间平均为37.57min。2μM QA产生一峰值电流后转为一持续性钙振荡或直接出现钙振荡，振荡维持时间为6.72±1.33min。脱敏时间均随激动剂浓度的增加而缩短。同法在表达成功的卵母细胞上，快速灌流兴奋性氨基酸受体之代谢型Ⅲ型受体激动剂L-phosphoserine（L-SOP）检测表达之代谢型Ⅲ型受体所介导的膜电流。0.8mM L-SOP灌流一定时间后，细胞膜电流出现一规律性电流振荡。电流振荡维持时间为20.17±8.47min。给药后至出现振荡所需要的时间与浓度没有必然的联系，振荡维持时间随激动剂浓度增加而缩短。此D 振荡电流可被代谢型谷氨酸1型受体桔抗剂L－AP。所桔抗，提示代谢型谷Dl 氨酸受体激动剂 L－SOP不仅是＊型受体的激动剂，而且是 1型受体的弱的 lD 激动剂。Dl 在同时表达了代谢型谷氨酸l型受体和M－胆碱受体的卵母细胞上连续l 给予 QA及 Carb，研究两类受体所介导的膜电流脱敏的相互影响。结果表l 明，代谢型谷氨酸1型受体介导的膜电流与M－胆碱受体介导的膜电流之ll 间存在双向交叉脱敏现象。即对 QA脱敏的卵母细胞，对 Carb无反应，对 lICarb脱敏的，对QA亦无反应。同法，我们研究了兴奋性氨基酸之代谢型 l11型与离子型受体，代谢型I型与代谢型＊型受体，离子型与代谢型＊型 lD 受体两两之间膜电流的相互影响，发现它们均存在双向交叉脱敏现象。我D 们的结论是，蛋白激酶CRKC）可能在这种异源性脱敏中发挥了关键作D 用。在多种受体共存的细胞中，受体之间存在着广泛的相互作用。D

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-7
前言  7-9
材料与方法  9-14
实验结果  14-39
讨论  39-43
致谢  43-44
参考文献  44-47
附表  47-49
综述  49-59

兴奋性氨基酸受体各亚型所介导非洲爪蟾卵母细胞跨膜电流的特征不同偶联模式的受体所介导非洲爪蟾卵母细胞跨膜电流的相互影响

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