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穿心莲对肝硬化大鼠肠道通透性、肠道细菌过度生长和细菌移位的影响

作　者: 吴春明
导　师: 宋建新
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 高压液相色谱肝硬化肠道通透性甘露醇乳果糖肠道细菌过度生长穿心莲细菌移位
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

一.建立高压液相色谱方法检测肝硬化大鼠肠道通透性(intestinal permeability, IP)目的鉴于肠道通透性在肝硬化细菌移位中重要作用,故建立通过双糖吸收试验评价肝硬化大鼠肠道通透性的高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC),以研究肝硬化细菌移位的发生机制。方法建立大鼠四氯化碳肝硬化模型,成功制得肝硬化大鼠30只,另取正常大鼠30只作为对照。禁食8-12小时,经口灌服2ml乳果糖/甘露醇混合液(含乳果糖100mg,甘露醇50mg),收集8小时尿液,通过煮沸和添加离子交换树脂去除蛋白和离子后送检。色谱工作条件:色谱柱:NH2柱(4.6mm×250mm×5um,Warters);流动相:乙腈∶水(70∶30V/V);流速:1.0ml/min;进样量:20ul;柱温:室温;检测仪:示差折光检测器2000(refractive index detector2000,RI2000)。结果在上述色谱条件下,尿样中甘露醇和乳果糖能得到良好分离,甘露醇和乳果糖的保留时间分别为6.721min和9.242min。甘露醇和乳果糖的线性范围分别为5-1000ug/ml、2.5-500ug/ml。甘露醇的加样回收率在92.7%-98%之间,乳果糖的加样回收率在91.3%-97.4%之间。肝硬化大鼠肠道通透性(L/M:0.03578±0.01245)较正常大鼠肠道通透性(L/M: 0.02563±0.00871)显著增高(P <0. 05)。结论成功建立了检测肝硬化大鼠肠道通透性的高效液相色谱方法,并证实肝硬化大鼠存在肠道通透性升高。二.穿心莲对肝硬化大鼠肠道细菌肠道通透性、肠道细菌过度生长(intestinal bacterial overgrowth, IBO)和细菌移位(bacterial translocation, BT)的影响目的探讨穿心莲对肝硬化大鼠肠道通透性、肠道细菌过度生长和细菌移位的作用,为其临床应用提供依据。方法建立大鼠四氯化碳肝硬化模型。将制得30只肝硬化大鼠随机分为4组:AN组(穿心莲组,n=8,穿心莲0.5g/kg*d)、NF组(诺氟沙星组,n=8,诺氟沙星0.3g/kg*d)、AN+NF组(穿心莲+诺氟沙星组,n=8,穿心莲0.5g/kg*d+诺氟沙星0.3g/kg*d)、CN组(对照组,n=6,生理盐水4ml/kg*d),给药2周后结束。比较各组死亡率,取外周静脉血检测血浆TNF-a、NO水平,并获取肠系膜淋巴结、血液、肝、脾和回肠内容物做细菌培养。采用高压液相色谱法检测肠粘膜通透性,部分肝脏和回肠组织作病理切片。结果与CN组相比,AN组、NF组和AN+NF组的TNF-a、NO的浓度显著降低(P <0.05),回肠细菌计数和细菌移位发生率显著下降(P <0.05);AN组和NF组的肠道通透性显著下降(P <0.05)。病理检查发现CN组肝硬化大鼠回肠绒毛变短、破坏,炎症细胞浸润增多。结论给予肝硬化大鼠穿心莲能抑制肝硬化大鼠肠道细菌过度生长,减少细菌移位的发生率,对肝硬化大鼠肠道通透性有保护作用,服用穿心莲可能有益于防治肝硬化肠源性细菌感染。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-11
第一部分建立高压液相色谱方法检测肝硬化大鼠肠道通透性  11-20
  材料与方法  11-14
  结果  14-17
  讨论  17-19
  参考文献  19-20
第二部分穿心莲对肝硬化大鼠肠道细菌过度生长、细菌移位和肠道通透性的影响  20-31
  材料与方法  21-25
  结果  25-26
  讨论  26-29
  参考文献  29-31
全文总结  31-32
综述肝硬化细菌移位的机制及后果  32-42
  参考文献  39-42
附录  42-43
致谢  43

穿心莲对肝硬化大鼠肠道通透性、肠道细菌过度生长和细菌移位的影响

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