学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

人类心脏发育候选基因KBTBD7的表达与功能研究

作　者: 杨志远
导　师: 吴秀山；朱传炳
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: BTB-kelch transcriptional activator KBTBD7 AP-1 SRE
分类号: Q78
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 14次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


BTB-kelch蛋白家族参与细胞多种功能,包括转录调节、细胞骨架形成、离子通道、蛋白泛素化、血管形成及细胞凋亡等细胞生理活动。本研究中我们从心脏文库中克隆了一个新的BTB-kelch蛋白KBTBD7,KBTBD7定位于染色体13q14.11区,其cDNA全长3008个碱基,开放阅读框长2052个碱基,编码一个含684个氨基酸残基的蛋白质。该蛋白包含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域。从酵母,果蝇到小鼠等多个物种中均发现了它的同源蛋白,并且它们之间具有极高的保守度,Western blot检测发现KBTBD7在人体胚胎中广泛表达。在MCF-7细胞系中过表达KBTBD7发现其具有转录激活活性,拆片分析表明BTB、BACK和Kelch repeat结构域均具有转录激活活性。进一步的实验证明KBTBD7能够激活AP-1、SRE信号途径。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
第一章 引言  8-32
  1.1 心脏发育过程的研究  8-9
  1.2 心脏发育的基因调控  9-20
    1.2.1 心脏发育的重要调控因子  9-11
    1.2.2 NKX2.5基因  11-12
    1.2.3 MEF-2家族  12-13
    1.2.4 SRF基因  13-14
    1.2.5 HAND基因  14-15
    1.2.6 锌指蛋白(ZFP)基因家族  15-20
  1.3 BTB转录因子的结构与功能  20-23
  1.4 MAPK信号途径与心脏发育  23-30
    1.4.1 MAPK家族  24-27
    1.4.2 MAPK的特异性激活机制  27-28
    1.4.3 MAPK信号途径的功能  28-30
  1.5 本课题的研究意义  30-32
第二章 材料与方法  32-50
  2.1 材料  32-36
    2.1.1 生物信息学软件  32-33
    2.1.2 主要试剂  33-34
    2.1.3 细胞、菌株和质粒  34-35
    2.1.4 主要实验仪器和耗材  35-36
  2.2 方法  36-50
    2.2.1 人类心脏cDNA文库中分离KTBTD7  36-38
    2.2.2 连接T载体  38-39
    2.2.3 感受态细胞的制备  39
    2.2.4 连接产物的转化  39-40
    2.2.5 质粒的小量制备  40-41
    2.2.6 阳性克隆的筛选与鉴定  41
    2.2.7 测序  41
    2.2.8 原核表达重组质粒的制备  41-42
    2.2.9 真核表达重组质粒的大量制备  42-43
    2.2.10 原核细胞诱导蛋白质表达及纯化  43-44
    2.2.11 多克隆抗体的制备与纯化  44-46
    2.2.12 胚胎各组织蛋白的提取与检测  46
    2.2.13 常规细胞培养及转染  46-48
    2.2.14 亚细胞定位观察  48
    2.2.15 基因转录活性的报告分析  48-50
第三章 人类KBTBD7基因的克隆与表达研究  50-66
  3.1 人类KBTBD7基因计算机克隆及生物信息学分析  50-55
    3.1.1 KBTBD7基因计算机克隆  50
    3.1.2 KBTBD7的蛋白质产物  50-53
    3.1.3 KBTBD7与同源基因的编码蛋白的同源性比较及进化分析  53-55
  3.2 KBTBD7基因ORF克隆  55-56
  3.3 KBTBD7蛋白表达及抗体制备  56-58
    3.3.1 原核蛋白表达质粒构建  56-58
  3.4 KBTBD7基因在人体胚胎中的表达  58-59
  3.5 亚细胞定位分析  59-60
  3.6 KBTBD7的转录活性分析  60-61
  3.7 KBTBD7在MAPK信号途径中抑制AP-1和SRE的转录活性  61-66
第四章 讨论  66-67
结语  67-68
参考文献  68-77
附录1:中英文缩写词简表  77-79
附录2:攻读学位期间的学术论文和综述  79-80
后记  80-81

相似论文

  1. 双酚AP型苯并噁嗪树脂的合成及性能研究,TQ320.1
  2. Toll样受体4信号通路在脂多糖促进肺癌细胞增殖中的机制探讨,R734.2
  3. 拟AP（AGP）-内射模的自同态环的若干研究,O153.3
  4. 腋臭患者大汗腺中ApoD和AR的表达变化及AP-1在其中的作用,R758.741
  5. 双酚AP环氧树脂的制备与表征,TQ323.5
  6. LMP1-mtp53转基因小鼠AP-1信号转导通路特点及益气解毒方的干预作用初步研究,R739.63
  7. 秀丽线虫（C.elegans）CEM细胞死亡与分化调控的遗传学分析,Q343
  8. AP化学课程项目及其在我国初步实践的研究,O6-4
  9. Banach-值函数的C-积分,O177
  10. 人类心脏发育候选基因ZNF649的克隆与功能研究,Q78
  11. 不同形式的运动训练对老年SAMP8小鼠心肌ERK、JNK、c-Fos和c-Jun mRNA表达的影响,G804
  12. 白藜芦醇调节高脂饮食大鼠心肌PPARγ/AP-1信号转导的研究,R285.5
  13. 非双倍测度下Marcinkiewicz积分有界性,O177
  14. 多速率WLANs用户接入机制研究,TN925.93
  15. 城市VANET中基于AP和地理位置的路由协议研究,TN929.5
  16. 基于Android平台的网络共享研究与实现,TN929.5
  17. PPARγ和P38、AP-1在肝细胞癌中的表达及临床意义,R735.7
  18. 瘦AP系统中CAPWAP协议的改进与实现,TN925.93
  19. 纳米CuO及其复合金属氧化物的合成及性能研究,TB383.1
  20. 不同喂养方式对婴幼儿口腔变形链球菌定植的影响及母子变形链球菌基因型相关性分析,R781.1

中图分类: > 生物科学 > 分子生物学 > 基因工程（遗传工程）
© 2012 www.xueweilunwen.com