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瑞士引种葡萄Granior工厂化高效育苗技术研究

作　者: 王艳妮
导　师: 王华
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 葡萄与葡萄酒学
关键词: Granior 组培快繁生根壮苗移栽驯化
分类号: S663.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本实验以瑞士引种红色酿酒葡萄品种Granoir(V. vinifera L.Granoir)茎段为试材进行离体培养,主要对其初代繁殖、继代繁殖、壮苗与生根以及炼苗与苗期管理进行研究,取得的主要结果如下:0.1%升汞溶液是比较理想的消毒剂。通常,单芽茎段的外植体用75%酒精溶液浸泡30 s+0.1%升汞溶液消毒7 min效果最好,但升汞具体消毒时间要根据材料的幼嫩程度而定。Granior初代培养外植体最佳取材时间为3~5月份,最佳外植体材料为幼年树靠近主干1~3节位腋生枝,腋生枝优于当年生半木质化顶芽枝条。初代培养中,枝条中多酚含量、PPO活性及IAAO活性与外植体褐变率呈显著的正相关,与生根率呈显著的负相关。Granior初代培养最佳培养基成分和光照强度为:1/4 MS基本培养基附加20 g/L蔗糖和0.3 mg/L IBA,光照强度1000 Lx.Granior继代培养最佳培养基配方为:1/2 MS + 0.2 mg/L IBA + 6~7 g/L琼脂+ 2%食用白砂糖。培养基中添加蔗糖和食用白砂糖对Granior培养效果无显著差异。Granior继代培养接种外植体适宜的苗龄为33 d左右,其继代的试管苗成活率和生根率高,可分别达到91.33%和84%,且玻璃化率较低,仅为6.67%,增殖倍数为5.47。双芽茎段的接种方式培养效果较好,其成活率达92.22 %,生根率为91.11 %,增殖倍数达到5.32倍。Granior试管苗2~3节位的芽继代培养生根指数最高,6~7节位生根指数和增殖倍数最小。在继代培养中应尽量避免用6~7节位的芽作为外植体。在Granior继代培养中,不同节位多酚含量和IAAO活性与生根指数呈负相关,PPO活性与生根相关性不明显。Granior组培苗首次继代生根率最低,仅为68.33%,第5次继代生根率可达90%,从第7次继代开始,随着继代次数的增加,生根率无显著差异,达98%以上。经5次继代后,可将Granior试管苗转接至不添加或添加低浓度(<0.1 mg/L)IBA的培养基中培养,试管苗生长良好,增殖率较高。Granior生根培养阶段,20~48μmol·m-2·s-1弱光和1~3%低蔗糖浓度有利于生根壮苗,移栽后环境适应能力较强,存活率高,生长较好。在杨凌地区,Granior试管苗适宜在5~8月进行驯化移栽。试管苗长至瓶口,有3~4片正常叶片,根系良好即可炼苗,移栽成活率较高。驯化移栽的最佳基质为珍珠岩:大田土:腐殖土:有机肥(1:1:1:0.3),移栽一周后开始每周喷施0.1%~0.2%尿素和磷酸二氢钾混合溶液,并及时打顶去副梢。在温室营养钵中培养2个月后即可定植到大田中,成活率90%以上。

全文目录

摘要  6-8
ABSTRACT  8-12
第一章文献综述  12-17
  1.1 葡萄组织快繁研究现状  12-15
    1.1.1 葡萄再生体系的建立  12-14
    1.1.2 葡萄继代增殖  14
    1.1.3 生根和驯化移栽  14-15
  1.2 Granoir 在我国的研究现状  15-16
  1.3 研究目的与意义  16
  1.4 试验路线  16-17
第二章瑞士引种葡萄Granior 快繁体系的建立  17-32
  2.1 试验材料  17-18
    2.1.1 试验品种  17
    2.1.2 培养条件  17
    2.1.3 试验指标  17-18
  2.2 试验内容与方法  18-20
    2.2.1 消毒剂和处理时间对无菌外植体快繁体系建立的筛选  18
      2.2.1.1 消毒剂种类的筛选  18
      2.2.1.2 消毒剂种类和处理时间最优组合的筛选  18
    2.2.2 不同树龄和取材部位对快繁体系建立的影响  18-19
    2.2.3 不同取材时间对再生体系建立的影响  19
    2.2.4 瑞引葡萄Granior 单芽茎段诱导培养基和光照强度的筛选  19-20
  2.3 结果与分析  20-30
    2.3.1 不同消毒剂和处理时间对无菌外植体快繁体系建立的影响  20-22
      2.3.1.1 消毒剂种类的筛选  20-21
      2.3.1.2 消毒剂与时间最优组合筛选  21-22
    2.3.2 不同树龄和取材部位对外植体快繁系统建立的影响  22-26
      2.3.2.1 不同树龄和取材部位对外植体污染率、褐变率、萌芽率及生根率的影响  22-24
      2.3.2.2 多酚含量、PPO 活性和IAAO 活性与外植体褐变及生根相关性研究  24-26
    2.3.3 外植体取材时间对再生体系建立的影响  26-27
    2.3.4 培养基种类和光照强度对外植体快繁体系建立的影响  27-30
  2.4 本章小结  30-32
第三章瑞士引种葡萄Granior 继代增殖及生根壮苗研究  32-57
  3.1 试验设计与方法  32-35
    3.1.1 试验培养条件  32
    3.1.2 试验指标  32-33
    3.1.3 继代培养基的筛选  33-34
      3.1.3.1 继代基本培养基筛选  33
      3.1.3.2 生长激素和琼脂浓度的筛选  33
      3.1.3.3 糖源和浓度对继代培养的影响  33-34
    3.1.4 不同苗龄及继代外植体对试管苗增殖及生长的影响  34
      3.1.4.1 不同苗龄对试管苗继代增殖的影响  34
      3.1.4.2 继代材料的选择  34
      3.1.4.3 不同节位组培苗再生及生长状况研究  34
    3.1.5 不同继代次数试管苗生根状况的研究  34
    3.1.6 不同光照强度和蔗糖浓度培养对组培苗生根壮苗以及生理特性影响的研究  34-35
    3.1.7 5 次继代后Granior 快繁IBA 浓度的筛选  35
  3.2 结果与分析  35-54
    3.2.1 继代培养基的筛选  35-44
      3.2.1.1 继代基本培养基的筛选  35-37
      3.2.1.2 生长激素IBA 浓度的筛选  37-39
      3.2.1.3 琼脂浓度的筛选  39-42
      3.2.1.4 糖源及浓度的筛选  42-44
    3.2.2 不同继代外植体对Granior 快速增殖的影响研究  44-47
      3.2.2.1 外植体苗龄对继代培养的影响  44-46
      3.2.2.2 接种外植体芽数对继代培养的影响  46
      3.2.2.3 不同节位外植体继代试管苗生理生长特性研究  46-47
    3.2.3 不同继代次数组培苗生根状况的研究  47-48
    3.2.4 不同光照强度和蔗糖浓度对生根壮苗影响的研究  48-52
      3.2.4.1 生根阶段不同组合对Granior 试管苗生长的影响  48-49
      3.2.4.2 生根阶段不同处理对Granior 试管苗生理特性的影响  49-52
    3.2.5 不同处理对Granior 试管苗移栽驯化的影响  52-53
    3.2.6 5 次继代培养后生长激素对组培苗生长效应研究  53-54
  3.3 本章小结  54-57
第四章瑞士引种葡萄Granior 的驯化移栽研究  57-65
  4.1 试验材料  57
  4.2 试验设计与方法  57-58
    4.2.1 瑞引Granior 试管苗炼苗基质及肥料的筛选  57-58
    4.2.2 炼苗时间对Granior 移栽驯化成活率的影响  58
    4.2.3 Granior 试管苗移栽驯化过程及后期管理探索  58
  4.3 结果与分析  58-64
    4.3.1 Granior 试管苗炼苗基质及肥料筛选  58-60
      4.3.1.1 不同基质和肥料移栽驯化的Granior 试管苗生长状况研究  58-59
      4.3.1.2 不同基质和肥料移栽驯化的Granior 组培苗生理状况研究  59-60
    4.3.2 Granior 移栽驯化时间的筛选  60-61
    4.3.3 Granior 试管苗移栽驯化流程及后期管理探索总结  61-64
      4.3.3.1 Granior 试管苗移栽驯化步骤  61-63
      4.3.3.2 移栽驯化流程图  63-64
  4.4 本章小结  64-65
第五章结论  65-67
  5.1 Granior 无菌快繁体系的建立  65
  5.2 Granior 继代培养技术要点  65-66
  5.3 移栽驯化的研究  66-67
参考文献  67-71
附录  71-73
致谢  73-74
作者简介  74

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