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海藻糖提高干燥晶状体组织的变性温度

作 者: 孙嘉楠
导 师: 赵梅生
学 校: 吉林大学
专 业: 临床医学
关键词: 海藻糖 脱水 变性温度 晶状体 差示扫描量热仪
分类号: R285
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 22次
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内容摘要


目的:通过差示扫描量热仪测定经100mM海藻糖溶液进行预处理后的干燥晶状体变性温度来探讨lOOmM海藻糖溶液是否能稳定晶状体蛋白质的构象。本实验是我们进行的一系列晶状体蛋白质研究及海藻糖在眼科应用的一个组成部分。方法:将28只猪眼晶状体平均分为4组。第1,2,3组分别与生理盐水,100mM海藻糖或100mM环状四糖共同培养150分钟后与第4组晶状体在室温及室内湿度下自然干燥到不再有重量变化。使用Seiko DSC-220进行变性温度的测量。在进行测量之前,先将晶状体切为两半,用镊子取出晶体核作为待测样品。为了让样品与测定变性温度所用铝盘的底部有着最佳的接触,我们用金属棒把晶体核碾为粉末状。将重量为10mg至11.2mg的每份样品转移至铝盘中,然后用样品密封器密封铝盘。在所有测定过程中均使用一个空铝盘作为测量变性温度的参照物。放入差示扫描量热仪的样品以10℃/min的速率从30℃降至0℃,并在0℃保持1分钟。随后,样品以10℃/min的速率从0℃提高至200℃。在冷却和加热过程中,液氮的流量为50 mL/min。结果:用100mM海藻糖,100mM环状四糖,生理盐水以及没有与任何溶液进行预处理的晶状体变性温度分别为:90.2±3.4℃,78.5±2.7℃,78.0±2.2℃,和77.1±2.5℃。使用100mM海藻糖进行预处理的晶状体的变性温度明显高于另外三组。(P<0.05, ANOVA, P<0.05, Student-Newman-Keuls test, n=7)。并且,用生理盐水,100mM环状四糖进行预处理及未经任何预处理的晶状体变性温度无统计学差异。结论:用100mM海藻糖预处理后的晶状体组织的变性温度较其他实验组相比有了很大的提升。也许海藻糖是通过稳定晶状体蛋白质来提高其变性温度。

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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