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丹参组织培养及辐射诱变技术研究

作　者: 闫文蓉
导　师: 李先恩；齐建军；周莉丽
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 生药学
关键词: 丹参幼叶 60Co-γ射线愈伤组织半致死剂量酶活
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 91次
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内容摘要

本研究首次以组织培养技术作为一种辅助手段,结合运用⁶⁰Co-γ辐射处理以丹参“99-2、99-3、Bj-shh”三个品系为试验材料进行了丹参组织培养结合辐射诱变复合育种技术的初步探索,得到如下试验结果:本研究首先以丹参初春萌发的幼叶为外植体,研究了不同品系、不同植物生长激素对愈伤组织的诱导及芽分化的影响,研究了愈伤组织生长周期的变化特征。同时对品系99-2进行植株再生,研究了壮苗及生根的最佳方法,建立了一套快速、高效、稳定的丹参组培繁殖技术。其次,以丹参不同品系叶片诱导的愈伤组织为材料,利用5、10、15、20、25、30、40、60、80、100 Gy十个剂量的⁶⁰Co-γ射线对愈伤组织进行辐射处理,研究了辐射后丹参不同品系愈伤组织的生长及生理指标的变化,并筛选出丹参三个品系愈伤组织的最佳辐射剂量,即半致死剂量;用5、10、15、20、25、30、40 Gy七个不同剂量⁶⁰Co-γ射线对愈伤组织诱导芽分化进行辐射处理,研究了辐射对丹参不同品系愈伤组织诱导芽分化的半致死剂量及生理指标的变化,研究结果表明:1丹参三个品系愈伤组织的诱导及芽分化诱导最适培养基分别为:愈伤组织诱导:品系99-2添加2,4-D 2.0 mg/L、6-BA3.0 mg/L、IBA0.1 mg/L;品系99-3添加2,4-D1.0 mg/L、6-BA0.5 mg/L、IBA0.1 mg/L,品系;Bi-shh添加2,4-D2.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L+IBA0.5 mg/L。芽分化:品系99-2、99-3、Bj-shh均以添加6-BA1.0 mg/L、NAA0.5 mg/L为最优2 ⁶⁰Co-γ射线对三个品系丹参愈伤组织的生长有明显的抑制作用。品系99-2辐射剂量为40 Gy时愈伤组织已全部褐化,品系99-3辐射剂量为100 Gy全部褐化,品系Bj-shh辐射剂量为80Gy时全部褐化。筛选出半致死剂量分别为:品系99-2为14 Gy,品系99-3为31 Gy,品种系Bj-shh为33 Gy。3三个品系的SOD酶活性基本表现为在较低剂量辐射时随辐射剂量的增加而逐渐先升高后降低,表明其抗辐射能力随着剂量的增加逐渐减弱。品系99-2愈伤组织中POD活性随着剂量的增大逐渐降低,品系99-3和Bj-shh愈伤组织辐射后则先降低后升高在降低的马鞍型变化。三个品系丹参愈伤组织的CAT酶活性随着辐射剂量的增加先逐渐升高后逐渐降低,表明生理损伤与剂量成正相关,但愈伤组织生长到一定程度后,会出现随着损伤的修复而逐渐消失。辐射对愈伤组织的生理指标产生了较大的影响,其中SOD酶活性在较低剂量辐射时随辐射剂量的增加而逐渐先升高后逐渐降低,品系99-2和Bj-shh的POD活性随剂量的增加先逐渐升高后降低再升高再降低的变化曲线,品系99-3则随着辐射剂量的增加而逐渐升高;三个品系CAT酶活性随着辐射剂量的增加先逐渐升高后随着培养天数的延长而逐渐降低。4 ⁶⁰Co-γ射线抑制了三个品系愈伤组织的芽分化能力。筛选出半致死剂量分别为:品系99-2的10 Gy,品系99-3为35 Gy,品系Bj-shh为13 Gy。5辐射对愈伤组织芽分化生理指标产生了很大的影响,其中三个品系的SOD酶活性随辐射剂量的增加而逐渐先升高后降低,品系99-2 POD酶活随着剂量的增大逐渐降低,品系99-3和Bj-shh POD活性则呈马鞍型变化曲线,品系99-2、99-3 CAT酶活性随着辐射剂量的增加而逐渐升高,而Bj-shh则表现出先降低后升高。三个品系的SOD酶活性基本表现为在较低剂量辐射时增加,是由于自由基积累过多,SOD活性随之升高,而在较高剂量时SOD酶活性逐渐降低,表明其抗辐射能力逐渐减弱品系99-2的POD酶活性表现出先升高随着剂量的增大逐渐降低,品系99-3和Bj-shh的POD活性表现出先升高后降低变化曲线品系99-2、99-3的CAT酶活性则表现出随着辐射剂量的增加而逐渐升高有效清除植物体内的H₂O₂,保护细胞膜系统,但在辐射剂量较高时降低,品系Bj-shh则表现出先降低后逐渐升高

全文目录

缩略词  6-7
摘要  7-9
Abstract  9-11
引言  11-12
第一章文献综述  12-23
  第一节丹参概况  12-15
    1 丹参本草应用记载  12-13
    2 丹参的生物学特性  13
    3 植物生长习性和资源分布  13-14
    4 丹参主要的化学成分和药理药效  14-15
  第二节丹参组织培养研究进展  15-16
  第三节辐射诱变育种研究概况  16-23
    1 辐射诱变的原理  16-17
    2 辐射育种的优点  17
    3 辐照剂量的研究  17-18
    4 辐射诱变育种的发展前景  18
    5 辐射诱变在药用植物育种中的应用  18-21
    6 药用植物辐射诱变存在的问题与展望  21-22
    7 本研究目的  22
    8 本研究意义  22-23
第二章丹参组织培养技术的研究  23-45
  第一节丹参外植体灭菌方法的研究  23-28
    1 材料与方法  23-25
    2 结果与分析  25-27
    3 结论与讨论  27-28
  第二节丹参愈伤组织的诱导  28-35
    1 材料与方法  28-29
    2 结果与分析  29-34
    3 结论与讨论  34-35
  第三节愈伤组织不定芽的诱导分化  35-40
    1 材料与方法  35-37
    2 结果与分析  37-40
    3 结论与讨论  40
  第四节壮苗生根培养及练苗移栽  40-43
    1 材料和方法  40-41
    2 结果与分析  41-43
    3 结论与讨论  43
  第五节小结  43-45
第三章丹参细胞辐射诱变技术的研究  45-83
  第一节辐射对丹参愈伤组织生长的研究  45-68
    1 材料与方法  45-49
    2 结果与分析  49-66
    3 结论与讨论  66-68
  第二节辐射对丹参愈伤组织诱导芽分化的研究  68-81
    1 材料与方法  68-69
    2 结果与分析  69-80
    3 结论与讨论  80-81
  第三节小结  81-83
第四章结论  83-88
  1 丹参组织培养的研究  83-84
  2 丹参辐射技术的研究  84-88
参考文献  88-92
附图  92-95
2009年毕业生在校己发、拟发论文登记表  95

丹参组织培养及辐射诱变技术研究

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