学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

CarO蛋白与鲍曼不动杆菌耐药性的相关性研究

作　者: 邓俊
导　师: 夏忠弟
学　校: 中南大学
专　业: 医学微生物学
关键词: 鲍曼不动杆菌 CarO蛋白 环丙沙星 亚胺培南 喹诺酮耐药 碳氢霉烯耐药
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 125次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的:研究CarO蛋白的表达与临床鲍曼不动杆菌耐环丙沙星及亚胺培南的相关性,了解CarO蛋白的结构与鲍曼不动杆菌耐药的相关性。方法:①收集长沙地区四家医院的56株鲍曼不动杆菌进行环丙沙星及亚胺培南药敏实验;②对临床敏感株进行环丙沙星体外诱导耐药实验;③PCR扩增CarO基因并测序;④实时荧光定量PCR测定各组CarO蛋白mRNA表达情况;⑤提取外膜蛋白并用SDS-PAGE分析CarO蛋白的表达水平;⑥利用生物信息学分析技术比对敏感菌株和耐药菌株CarO蛋白的结构与功能。结果:①所收集的临床鲍曼不动杆菌对环丙沙星的耐率为85.7%,对亚胺培南的耐药率为12.5%;②无论是临床耐药菌株与临床敏感菌株比较,还是临床敏感菌株被诱导成耐环丙沙星菌株以后,CarO mRNA的表达和蛋白的表达都有下降;③信息学分析发现耐药菌株与敏感菌株相比,氨基酸突变多发生在胞外区域;④信息学分析比对发现,耐药菌株CarO蛋白氨基酸序列在177位比敏感菌株多一个蛋白激酶C磷酸化位点,该处位点与细菌耐药的关系有待证明;⑤耐药菌株CarO蛋白的内在氢键网络可能与敏感株有差别。结论:①收集的临床鲍曼不动杆菌对环丙沙星的耐药情况较亚胺培南严重;②CarO蛋白的表达下调可能与临床鲍曼不动杆菌的耐药性相关;③CarO蛋白与鲍曼不动杆菌耐环丙沙星有一定相关性,佐证了CarO蛋白可能与细菌多重耐药有关;④CarO蛋白可能与细胞信号传导有关;⑤敏感菌株与耐药菌株的CarO蛋白功能位点和内部结构有差异,可能与细菌耐药有关。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-11
英文缩略表  11-12
前言  12-14
第一章 材料与方法  14-25
  1.1 材料  14-18
    1.1.1 主要试剂以及来源  14-15
    1.1.2 菌株来源  15
    1.1.3 主要仪器  15-16
    1.1.4 培养基和试剂的配制  16-17
    1.1.5 生物信息学软件  17-18
  1.2 方法  18-25
    1.2.1 实验技术路线  18
    1.2.2 纸片扩散法药敏实验  18-19
    1.2.3 微量肉汤稀释法  19
    1.2.4 热裂解法提取细菌总DNA  19-20
    1.2.5 引物设计  20
    1.2.6 目的基因PCR扩增  20-21
    1.2.7 PCR产物分析  21
    1.2.8 测序结果分析  21
    1.2.9 细菌总RNA提取  21
    1.2.10 逆转录步骤  21-22
    1.2.11 荧光定量PCR  22
    1.2.12 数据分析  22-23
    1.2.13 体外诱导实验  23
    1.2.14 提取外膜蛋白  23-24
    1.2.15 SDS-PAGE电泳  24
    1.2.16 蛋白质生物信息学分析  24-25
第二章 结果  25-42
  2.1 CarO蛋白表达与鲍曼不动杆菌耐药的相关性  25-33
    2.1.1 药敏结果  25-27
    2.1.2 体外诱导实验结果  27
    2.1.3 各组PCR产物电泳结果  27-29
    2.1.4 各组mRNA的表达情况  29-32
    2.1.5 各组CarO的蛋白水平分析  32-33
  2.2 CarO蛋白的生物信息学研究  33-42
    2.2.1 各组CarO蛋白核酸序列比对  33-35
    2.2.2 各组CarO蛋白氨基酸序列比对  35-36
    2.2.3 各菌株CarO蛋白同源性分析  36-37
    2.2.4 各菌株CarO蛋白的理化性质  37-38
    2.2.5 各菌株CarO蛋白二级结构预测  38-39
    2.2.6 各菌株CarO蛋白功能位点预测  39-40
    2.2.7 各菌株CarO蛋白三级结构模型与功能的推测  40-42
第三章 讨论  42-46
  3.1 CarO蛋白的表达与临床鲍曼不动杆菌耐药的相关性研究  42-43
  3.2 CarO蛋白与环丙沙星的相关性研究  43
  3.3 CarO蛋白生物信息组学的研究  43-46
第四章 结论  46-47
第五章 进一步实验  47-48
参考文献  48-52
综述  52-61
  参考文献  57-61
致谢  61-62
在读期间完成的论文  62

相似论文

  1. 鲍曼不动杆菌OXA基因的检测及ISAba1对其的影响,R440
  2. ICU病人鲍曼不动杆菌定植的流行病学特征及危险因素探讨,R181.3
  3. 耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药机制研究,R446.5
  4. 盐酸环丙沙星聚乳酸—羟基乙酸共聚物缓释微球在大鼠股骨GustiloII型开放性骨折一期内固定辅助治疗中的应用,R687.3
  5. 某医院新老病区鲍曼不动杆菌的耐药性和分子流行病学,R181.3
  6. 耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌相关耐药基因及同源性分析,R440
  7. 新生儿重症监护病房多重耐药鲍曼不动杆菌耐药机制及同源性研究,R446.5
  8. 95株碳青酶烯类不敏感鲍曼不动杆菌耐药性的初步分析,R446.5
  9. 复方乳酸环丙沙星治疗仔猪黄白痢试验,S858.28
  10. 多重耐药鲍曼不动杆菌质粒相关耐药基因的研究以及有效中草药的探索,R446.5
  11. 环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定,S859.84
  12. 耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶及整合子研究,R446.5
  13. 鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物双圈耐药现象的研究,R446.5
  14. 白细胞减少性鲍曼不动杆菌肺炎大鼠模型的构建及相关研究,R-332
  15. 开胸术后重症肺炎诊治分析,R563.1
  16. 环丙沙星特异性抗体的制备及ELISA方法的建立,S859.84
  17. 左氧氟沙星对绿脓杆菌生物膜诱导作用及药物治疗方法研究,R516
  18. 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶检测及流行病学分析,R446.5
  19. 环丙沙星分子印迹聚合物的制备及其吸附与分离性能的研究,O631.3
  20. 盐酸环丙沙星胃漂浮片制备及生物利用度研究,R96
  21. 中药抑制牛源致病性大肠杆菌对环丙沙星耐药的研究,S858.23

中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 微生物学检验
© 2012 www.xueweilunwen.com