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耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药机制研究

作　者: 廖亚龙
导　师: 孙自镛
学　校: 华中科技大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 鲍曼不动杆菌 PFGE MLST OXA-23 OXA-58 ISaba1
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的研究我院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）对碳青霉烯类耐药的分子机制,并通过分子流行病学研究探讨我院CRAB的分离率迅速上升的原因。方法收集我院2009年5月分离的非重复耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌30株,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术分析它们的同源性,应用多位点序列分型（MLST）技术明确各克隆株的ST型。筛查各种β-内酰胺酶（主要是碳青霉烯类水解酶）:表型筛查;基因型筛查——DNA扩增、测序（各种金属β内酰胺酶如IPM、VIM、SIM等;能够水解碳青霉烯类抗生素的D类β内酰胺酶如OXA-23、OXA-24、OXA-58、OXA-51等; AmpC酶等）。PCR筛查Ⅰ类整合子和插入序列ISAba1。结果PFGE显示我院CRAB存在两个克隆,分为A、B型,2009年5月分离的30株非重复CRAB中,有19株属于克隆株A,11株属于克隆株B,克隆株A和克隆株B均广泛分布于各科室,创伤外科、ICU、呼吸内科等科室同时存在两个CRAB克隆。MLST结果显示,克隆株A属于ST91,克隆株B属于ST90,ST91同时携带bla_OXA-23和bla_OXA-58,而ST90只携带bla_OXA-23。11株ST90克隆株均检出整合酶基因intⅠ1,而19株ST91克隆株未扩增出整合酶基因。所有菌株bla_OXA-23、blaOXA51基因的上游均发现有ISaba1,9株ST90克隆株bla_AmpC的上游发现插入序列ISaba1。金属酶表型实验未发现阳性,PCR未扩增出IMP、VIM、SIM等金属β-内酰胺酶基因。结论我院同时存在两个不同遗传背景的CRAB克隆在科室间传播,临床应予以重视。插入序列ISAba1介导bla_OXA-23是我院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药的主要分子机制。两个CRAB克隆可能是由相应ST型的敏感株独立进化而来,在应对抗生素选择性压力时各有优势,ST91同时携带bla_OXA-23和bla_OXA-58,ST90携带bla_OXA-23,且存在插入序列ISAba1介导bla_AmpC基因的高表达,具有整合酶基因intⅠ1。

全文目录

中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
第一部分耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分子流行病学研究  10-27
  材料与方法  10-14
  结果  14-25
  讨论  25-27
第二部分耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药机制研究  27-45
  材料与方法  27-34
  结果  34-44
  讨论  44-45
参考文献  45-48
综述  48-59
  参考文献  55-59
致谢  59

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药机制研究

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