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目的：利用体内噬菌体展示技术,筛选与人胃癌细胞株SGC7901特异性亲和的短肽,以利于指导临床胃癌的早期诊断和靶向性治疗,提高胃癌治疗的针对性。方法：建立裸鼠胃癌模型,将噬菌体通过尾静脉注射入裸鼠体内,经过四轮筛选,得到富集的噬菌体,即与短肽结合的目标噬菌体,回收肿瘤组织以及对照的心脏、肝脏和脑组织中的噬菌体并测定效价,同时利用免疫组化及ELISA等试验方法对目标噬菌体进行检测,提取噬菌体DNA,进行序列测定,得到特异性短肽序列。结果：成功构建裸鼠胃癌模型；经过四轮的筛选,免疫组化结果显示：肿瘤组织结合的噬菌体得到明显富集,心脏及脑组织结合的噬菌体没有富集。通过回收噬菌体效价的测定,肿瘤组织结合噬菌体为肝脏组织的88.8倍,脑组织的6.7×104倍,心脏组织9.7×104倍。ELISA结果显示P/N>2.1的阳性克隆有19个,P/N>2.5以上的克隆有13个,其中P/N>3.0的克隆有3个,一般来说当P/N(OD克隆/OD随机对照克隆)>2.1时,即可说明此克隆对SGC7901细胞有高亲和力。得到与噬菌体特异性结合的短肽,并成功测序。结论：利用体内噬菌体展示技术筛选与人胃癌组织特异性结合的短肽,经过四轮体内淘选,胃癌肿瘤组织噬菌体得到明显富集,测序比对后,LLRSTGF出现的次数最多,提示此短肽可能对荷瘤裸鼠模型的胃癌组织具有很强的结合力,有望成为胃癌治疗的靶点。
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