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黄芪扶正汤抑制Lewis肺癌移植瘤生长及其机制的实验研究
作 者: 薛松
导 师: 钟美佐
学 校: 中南大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 黄芪扶正汤 顺铂 肺癌 HIF-1α VEGF
分类号: R734.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
目的:建立荷Lewis肺癌皮下移植瘤小鼠模型,用黄芪扶正汤灌胃处理小鼠,用腹腔注射顺铂作为对照,观察黄芪扶正汤单用及与顺铂联用对肿瘤生长的影响,并观察其对肿瘤组织中HIF-1α及VEGF表达的影响,为黄芪扶正汤在临床上的进一步应用提供实验依据。方法:培养Lewis肺癌细胞,建立荷Lewis肺癌皮下移植瘤小鼠模型,随机分为4组:对照组、顺铂组、中药组、联合治疗组,每组7只。皮下接种后第7天,同时开始给药:顺铂组予以顺铂2mg/kg,腹腔注射,隔日一次,共给药8次,同时每日予以生理盐水10ml/kg灌胃;中药组每日灌服黄芪扶正汤溶液10ml/kg,共15天,同时隔日予以生理盐水10ml/kg腹腔注射;联合治疗组两药用法同前;对照组给予生理盐水10ml/kg灌胃和腹腔注射,用法同前,每天固定时间给药。每天密切观察小鼠生活状态及体重变化,根据体重调整用药剂量,每3天使用游标卡尺测量肿瘤最长径(a)和最短径(b),计算肿瘤体积,绘制生长曲线,给药的第15天处死小鼠,完整剥离移植瘤瘤体,用中性甲醛溶液固定后制作病理切片,光学显微镜下观察移植瘤的病理改变,用免疫组织化学法检测移植瘤HIF-1α及VEGF的表达情况,观察黄芪扶正汤对小鼠移植瘤HIF-1α及VEGF表达的影响。结果:1.对肿瘤生长的影响:各个实验组的肿瘤体积及肿瘤重量均小于模型组,中药组瘤重较对照组明显减轻(P<0.05);顺铂组瘤重较对照组明显减轻(P<0.05);联合治疗组瘤重较对照组明显减轻(P<0.05);顺铂组瘤重低于中药组(P<0.05)。中药组、顺铂组、联合治疗组的抑瘤率分别是38.7%,52.0%,68.96%,联合治疗组的平均瘤重低于中药组、顺铂组(P<0.05),联合治疗组抑瘤率优于顺铂组和中药组(P<0.05)。2.免疫组织化学染色检测结果:顺铂组、中药组以及联合治疗组HIF-1α及VEGF表达均低于对照组(P<0.05),提示黄芪扶正汤可降低肿瘤组织HIF-1α及VEGF表达。结论:1.黄芪扶正汤可以抑制荷Lewis肺癌小鼠移植瘤的肿瘤生长。2.黄芪扶正汤可以对顺铂化疗起到增效作用。3.黄芪扶正汤可以抑制肿瘤组织中HIF-1α及VEGF的表达,这可能为其抗肿瘤的机制之一。
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全文目录
摘要 4-6 ABSTRACT 6-8 目录 8-9 专业名词缩写中英文对照表 9-10 第一章 前言 10-12 第二章 材料及方法 12-18 1. 材料 12-13 1.1 细胞系 12 1.2 实验动物 12 1.3 主要实验药物 12 1.4 主要试剂 12-13 1.5 实验仪器及设备 13 2. 实验方法 13-18 2.1 实验试剂的配制 13-14 2.2 Lewis肺癌(LLC)细胞的培养 14-15 2.3 Lewis肺癌细胞的皮下传代 15 2.4 实验动物的饲养 15 2.5 实验动物的分组及给药 15-16 2.6 标本采集 16 2.7 检测指标及方法 16-17 2.8 统计学分析 17-18 第三章 结果 18-21 1. 肿瘤生长曲线的绘制 18 2. 抑瘤率的测定 18-19 3. 联合用药效应的计算 19 4. 小鼠移植瘤的病理学观察 19-20 5. 免疫组织化学法检测HIF-1α及VEGF的表达 20-21 第四章 讨论 21-27 1. 肺癌的中医辨证及黄芪扶止汤抗肿瘤的依据 21-22 2. 黄芪扶正汤中各个单药的抗肿瘤机制 22-23 3. 黄芪扶正汤抑制小鼠Lewis肺癌的机制 23-27 3.1 黄芪扶正汤对小鼠Lewis肺癌VEGF表达的影响 23-25 3.2 黄芪扶正汤对小鼠Lewis肺癌HIF-1α表达的影响 25-27 第五章 结论 27-28 参考文献 28-35 附图 35-38 综述 38-57 参考文献 51-57 致谢 57
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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