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转化生长因子-β1明胶微球的研制

作　者: 石婧圆
导　师: 陈燕忠；吕竹芬
学　校: 广东药学院
专　业: 药剂学
关键词: TGF-β1 明胶微球 ELISA
分类号: R943
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 36次
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内容摘要


本课题选择天然大分子材料明胶（Gelatin）为成球材料,制备可用于关节腔注射的载转化生长因子-β1（TGF-β1）缓释微球,并研究了其体外释药特性。本课题采用乳化-交联法制备空白明胶微球,对明胶浓度、乳化剂用量、丙酮用量、油水比例、转速、乳化时间、固化剂及固化时间等处方工艺因素进行了单因素考察,并根据单因素考察结果设计正交试验,以微球的形态、粒径及跨距为评价指标,筛选出明胶微球最优制备工艺。以明胶微球最优处方工艺制备微球用于TGF-β1载药,对载药方法及工艺影响因素作了考察。并考察了各处方载药量、包封率及释放行为。本课题采用光学显微镜,在线观察软件及SPSS统计软件等对微球各方面性质进行考察,获得最优处方工艺为:明胶浓度为10%、乳化剂用量为5%、丙酮用量为3 ml、油水比例为3:1、转速为1000 rpm、乳化时间为13 min、固化剂为37%甲醛、固化时间为18 h。结果表明微球球形圆整,表面光滑,分散均匀,平均粒径为6.31μm,跨距小于3.00。建立了TGF-β1的含量的ELISA检测分析方法,获得ELISA法检测TGF-β1含量的标准曲线,并对其专属性、精密度、重复性及回收率进行考察。ELISA法检测TGF-β1含量灵敏度好、专属性高。采用振摇-离心的载药方法,获得微球包封率达到98%以上,释放时间能够达到4天以上。本课题对TGF-β1明胶微球的制备及载药方法进行了初步的考察,获得微球性能良好,工艺稳定,重现性好,并表现出制备成缓释制剂的潜力,有望开发为新药。

全文目录


中文摘要  5-6
Abstract  6-8
第一章 前言  8-16
  1 类风湿性关节炎(RA)  8-11
  2 微球给药体系的研究进展  11-15
  3 本实验研究的内容  15-16
第二章 TGF-β1明胶微球的处方前研究  16-26
  1 仪器与试药  16
  2 TGF-β1 明胶微球含量及释放度测定方法的建立  16-21
    2.1 溶液的配制  17-18
    2.2 TGF-β1 含量的测定  18
    2.3 专属性考察  18-19
    2.4 标准曲线的制备  19
    2.5 精密度试验  19-20
    2.6 重复性试验  20
    2.7 回收率试验  20-21
  3 释放度的测定  21-22
  4 微球评价指标的确定及其检测方法  22-25
    4.1 微球形态特征的检查及平均粒径、粒径分布、跨距的测定  22-23
    4.2 微球包封率、载药量的测定  23-25
  5 讨论  25-26
第三章 明胶微球的处方设计及工艺研究  26-48
  1 仪器与试药  26-27
  2 明胶微球制备的单因素考察及工艺处方的优化  27-47
    2.1 明胶微球的制备方法  27
    2.2 明胶微球制备影响因素的考察  27-35
      2.2.1 明胶浓度对微球性质的影响  27-29
      2.2.2 乳化剂用量对微球性质的影响  29-30
      2.2.3 丙酮用量对微球性质的影响  30-31
      2.2.4 油水比例对微球性质的影响  31-33
      2.2.5 乳化时间对微球性质的影响  33-34
      2.2.6 转速对微球性质的影响  34-35
    2.3 固化剂的选择  35-42
      2.3.1 固化剂及洗脱次数的考察  36-38
      2.3.2 固化时间的影响  38-40
      2.3.3 预固化时固化剂的用量对微球性质的影响  40-41
      2.3.4 固化剂浓度对微球性质的影响  41-42
    2.4 明胶微球制备工艺处方的优化  42-44
    2.5 验证试验  44-47
      2.5.1 工艺确定  44-45
      2.5.2 验证试验  45-47
  3 讨论  47-48
第四章 TGF-β1明胶微球的制备及体外释放度的考察  48-58
  1 仪器与试药  48-49
  2 TGF-β1 明胶微球的制备  49-52
    2.1 明胶微球载药方法的考察  49-52
      2.1.1 低温静置法  49
      2.1.2 振摇-离心法  49-51
      2.1.3 两种方法结果对比  51-52
  3 TGF-β1 明胶微球工艺的重现性考察  52-54
  4 TGF-β1 明胶微球体外释放度的考察  54-57
    4.1 释放介质的选择  54
    4.2 处方因素对释放的影响  54-55
    4.3 释放曲线的绘制  55-57
  5 讨论  57-58
第五章 结论与展望  58-60
参考文献  60-62
缩略语  62-63
攻读学位期间发表的论文  63-64
致谢  64

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药剂学 > 制剂学
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