学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

Numb和Numblike在哺乳动物听觉感受上皮发育中的表达及功能研究

作　者: 高震
导　师: 迟放鲁
学　校: 复旦大学
专　业: 耳鼻喉科
关键词: Numb Numblike 大鼠 听觉感受上皮 发育脂质体转染
分类号: R764
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 80次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


基因Numb和Numblike是果蝇基因Numb(d-Numb)在哺乳动物体内的两个同源基因,诸多研究表明它们在哺乳动物的神经发育中起着重要作用。本课题采用Westernblot、Real-time PCR、免疫荧光染色、质粒转染等实验技术,系统地研究了Numb和Numblike在大鼠听觉感受上皮发育中的表达情况及其所发挥的功能。Western blot和半定量RT-PCR等实验表明在哺乳动物的听觉感受上皮内Numb和Numblike均有表达,并且基因Numb的四种亚型在耳蜗发育过程中的表达情况存在着动态变化。免疫荧光染色表明在大鼠听觉感受上皮发育早期(E13,E15,E17)Numb和Numblike表达于听觉感上皮内的所有前体细胞;在大鼠听觉感受上皮发育晚期(E18.5,P0)Numb和Numblike主要表达在听觉感受上皮顶层细胞的胞质中,并且两者的定位分布已有了显著差别。为了简单、便捷的转染耳蜗铺片,本课题建立了用脂质体试剂转染耳蜗铺片的方法。最后,质粒转染实验和real-time PCR证明在新生大鼠的耳蜗铺片内过量表达基因Numb和Numblike能够有效上调基因Rath1(Atoh1 in rat)的mRNA水平。本研究的诸多结果表明,基因Numb和Numblike在哺乳动物听觉感受上皮发育中存在表达并可能起着重要作用,它们很可能是能够促进毛细胞发育的重要胞内因子。

全文目录


目录  3-5
摘要  5-6
Abstract  6-7
前言  7-9
第1章 Numb和Numblike在大鼠听觉感受上皮发育过程中的表达情况研究  9-17
  1 材料与方法  9-12
    1.1 新生大鼠听觉感受上皮western blot实验  9-11
    1.2 新生大鼠听觉感受上皮real-time PCR实验  11-12
    1.3 耳蜗组织半定量RT-PCR实验  12
    1.4 统计学分析  12
  2 结果  12-15
    2.1 新生大鼠听觉感受上皮内Numb和Numblike在蛋白水平表达情况  12
    2.2 新生大鼠听觉感受上皮内Numb和Numblike在mRNA水平表达情况  12-13
    2.3 Numb的四种亚型在大鼠耳蜗发育过程中表达的动态变化  13-15
  3 讨论  15-16
  4 结论  16-17
第2章 Numb和Numblike在大鼠听觉感受上皮发育过程中的定位研究  17-23
  1 材料与方法  17-18
    1.1 冰冻切片制备  17
    1.2 免疫荧光染色  17-18
    1.3 激光共聚焦扫描  18
  2 结果  18-21
  3 讨论  21-22
  4 结论  22-23
第3章 脂质体转染耳蜗铺片方法的建立  23-29
  1 材料与方法  23-25
    1.1 pIRES-EGFP质粒抽提  23-24
    1.2 新生大鼠耳蜗铺片培养  24
    1.3 新生大鼠耳蜗铺片转染实验  24
    1.4 免疫荧光染色和激光共聚焦扫描  24
    1.5 统计学分析  24-25
  2 结果  25-28
    2.1 质粒pIRES-EGFP的提取和鉴定  25
    2.2 不同浓度的转染试剂对耳蜗铺片的转染效率  25
    2.3 不同浓度的转染试剂对毛细胞的损伤程度  25-28
  3 讨论  28
  4 结论  28-29
第4章 Numb和Numblike在新生大鼠耳蜗铺片内的过量表达研究  29-35
  1 材料与方法  29-30
    1.1 Numb-pIRES-EGFP及Numblike-pIRES-EGFP质粒构建  29
    1.2 Numb-pIRES-EGFP及Numblike-pIRES-EGFP质粒抽提  29
    1.3 新生大鼠耳蜗铺片培养  29
    1.4 新生大鼠耳蜗铺片转染实验  29
    1.5 western blot及real-time PCR  29-30
    1.6 免疫荧光染色  30
    1.7 统计学分析  30
  2 结果  30-33
    2.1 质粒Numb-pIRES-EGFP及Numblike-pIRES-EGFP的提取和鉴定  30
    2.2 Numb和Numblike在耳蜗铺片内的过量表达研究  30-33
  3 讨论  33-34
  4 结论  34-35
结束语  35-36
参考文献  36-40
综述:Notch信号通路与耳蜗毛细胞发育  40-45
致谢  45-46

相似论文

  1. 丙酮酸肌酸对大鼠蛋白质代谢的影响,S865.12
  2. 丹参酮ⅡA及烟酸对肥胖幼鼠心血管功能的影响,R285.5
  3. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  4. 甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝炎大鼠的治疗作用及部分机制研究,R575.5
  5. 阿伐他汀对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白表达的影响及其分子机制,R587.2
  6. 拘束冷应激对大鼠组织超微结构及HSP70表达的动态影响,S858.91
  7. 穴位埋线对哮喘模型大鼠IL-4等影响的实验研究,R245
  8. 植物异黄酮对去卵巢大鼠骨代谢影响的相关研究,R580
  9. 微波对坐骨神经损伤大鼠脊髓内GAP-43表达的影响,R651.3
  10. NF-κB与IL-6在大鼠极限门静脉结扎模型中的表达及作用机制,R657.3
  11. 大鼠股神经结扎损伤修复方法的实验研究,R651.3
  12. 大鼠颅内外动脉血管平滑肌细胞的体外培养与鉴定,R743.3
  13. 不同属种肉类对大鼠生长、消化代谢及抗氧化性的影响,S865.12
  14. 慢病毒介导hVEGF-165基因转染骨髓间充质干细胞治疗大鼠后肢缺血实验研究,R329
  15. 大鼠脑积水侧脑室周围神经干细胞的实验研究,R742.7
  16. 大鼠再生肝脏细胞周期的研究,Q253
  17. 抗痛风胶囊对痛风性关节炎的治疗作用及机制,R259
  18. 归芩合剂治疗大鼠阿霉素肾病的实验研究,R285.5
  19. 大鼠骨髓间充质干细胞p38MAPK信号通路对机械应力刺激的反应,R329
  20. 氯沙坦对自发性高血压大鼠近端肾小管上皮细胞Na~+，K~+-ATP酶的影响,R544.1
  21. 缺氧预处理MSCs移植对心肌梗死区SDF-1/CXCR4轴表达变化的实验研究,R542.22

中图分类: > 医药、卫生 > 耳鼻咽喉科学 > 耳科学、耳疾病
© 2012 www.xueweilunwen.com