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青海黄绿蜜环菌菌丝体生物学特性及多糖发酵工艺研究

作　者: 肖前青
导　师: 刁治民
学　校: 青海师范大学
专　业: 植物学
关键词: 黄绿蜜环菌 菌丝体 多糖 生物学特性 检测 提取 发酵
分类号: S567.39
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


对在青海湖地区采集到的蘑菇子实体进行形态学观察,参照文献及有关资料,初步鉴定为黄绿蜜环菌（Armillaria luteo-virens）,属真菌门（Eumycota）、担子菌亚门（Basidiomycotina）、层菌纲（Hymenomcentes）、口蘑目（Tricholomatales）、口蘑科（Tricholomataceae）、蜜环菌属（Armillaria）。通过组织分离获得4株黄绿蜜环菌菌株,选出试验菌株QHH-1。本文对其生物学特性和多糖发酵进行了较为系统的研究。黄绿蜜环菌生理学特性单因素试验结果表明:黄绿蜜环菌菌丝体碳源对葡萄糖和甘露醇利用最好;氮源对草酸铵、氯化铵、麸皮煮汁、硫酸铵、牛肉膏利用较好;无机盐对磷酸二氢钾利用最好;生长因子对维生素B,利用最好;在pH值为7.0时生长最好。通过进一步正交试验获得优化培养基配方:葡萄糖20g,氯化铵2g,KH2PO40.2g,MgSO40.2g,FeSO40.2g,Al2（SO4）30.2g,维生素B1 1mg,维生素B21mg,水1000ml。黄绿蜜环菌菌丝体多糖检测采用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法两种检测方法进行试验,对葡萄糖、L-鼠李糖、半乳糖、D-果糖、木糖显色条件优化试验,最大吸收波长试验,稳定性试验,确定葡萄糖为苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法标准曲线标准品并制作标准曲线。通过对两种测定方法在稳定性和回收率方面的比较,选取苯酚-硫酸法作为黄绿蜜环菌多糖测定方法。黄绿蜜环菌菌丝体多糖提取试验先对热水法、碱法、酸法三种多糖提取方法进行优化。热水法多糖提取回归方程为:Y=10.38-0.31 x1-0.51 x2-0.18 x3+0.25x22-0.88x32,优化多糖提取条件为浸提比1:10,浸提时间1h,浸提温度79℃。碱法多糖提取回归方程为:Y=10.32+1.28 x1+0.38 x2-1.98 x22,优化多糖提取条件为pH值11.0,浸提时间1.16h,浸提温度71.3℃。酸法多糖提取回归方程为:Y=9.42+1.16 x3-2.1x1 x2+0.80 x12－1.09 x32,优化多糖提取条件为pH值5.0,浸提时间1.5h,浸提温度57.6℃。然后经比较,确定酸法多糖提取为最佳黄绿蜜环菌菌丝体多糖提取方法。黄绿蜜环菌菌丝体多糖发酵试验通过均匀设计和回归分析,获得多糖发酵模型方程:Y=13.747-0.27 x2-0.87 x3-0.562 x4+0.062 x5-0.065 x6,从而得到优化条件为:蔗糖5.0g,草酸铵0.5g,牛肉膏0.5g,K2HPO43.0g,维生素B10.05mg。初步总结了多糖发酵工艺和提取工艺。多糖发酵工艺:菌种→一级种子→二级种子→三级种子→液体发酵→多糖提取。多糖提取工艺:菌丝体→干燥→粉碎→酸法浸提→浓缩、醇析、洗涤→干燥→粗多糖。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-11
前言  11-12
第一章 文献综述  12-23
  1.1 食用菌业发展概况  12-15
    1.1.1 食用菌的营养价值  12-13
      1.1.1.1 富含蛋白质和氨基酸  12
      1.1.1.2 低脂肪、低热能  12-13
      1.1.1.3 维生素含量丰富  13
      1.1.1.4 富含多种矿物质元素  13
    1.1.2 食用菌的保健价值  13-14
      1.1.2.1 免疫抗肿瘤作用  13
      1.1.2.2 抗病毒作用  13
      1.1.2.3 调节血脂作用  13-14
    1.1.3 食用菌生产现状  14-15
  1.2 食用菌多糖研究进展  15-20
    1.2.1 食用菌多糖的生物活性  15-18
      1.2.1.1 调节机体免疫作用  15-17
      1.2.1.2 抗肿瘤作用  17
      1.2.1.3 对心血管的作用  17
      1.2.1.4 抗病毒活性  17-18
      1.2.1.5 健胃保肝作用  18
      1.2.1.6 抗炎作用  18
      1.2.1.7 抗氧化活性  18
      1.2.1.8 其它功能  18
    1.2.2 食用菌多糖的检测  18-19
    1.2.3 食用菌多糖的提取工艺  19-20
      1.2.3.1 食用菌多糖的提取  19
      1.2.3.2 食用菌多糖的纯化  19-20
  1.3 黄绿蜜环菌研究现状  20-23
第二章 黄绿蜜环菌菌丝体生物学特性  23-33
  2.1 试验材料  23
  2.2 试验方法  23-26
    2.2.1 菌种分离纯化  23-24
    2.2.2 菌株的保存  24
    2.2.3 黄绿蜜环菌试验菌株筛选  24
    2.2.4 黄绿蜜环菌菌丝体形态观察  24
    2.2.5 黄绿蜜环菌菌丝体生理学特性研究  24-26
      2.2.5.1 不同碳源对黄绿蜜环菌菌丝体生长试验  25
      2.2.5.2 不同氮源对黄绿蜜环菌菌丝体生长试验  25
      2.2.5.3 不同无机盐对黄绿蜜环菌菌丝体生长试验  25
      2.2.5.4 不同生长因子对黄绿蜜环菌菌丝体生长试验  25-26
      2.2.5.5 不同pH值对黄绿蜜环菌菌丝体生长试验  26
      2.2.5.6 不同温度对黄绿蜜环菌菌丝体生长试验  26
      2.2.5.7 黄绿蜜环菌菌丝体培养条件的优化  26
  2.3 结果与分析  26-33
    2.3.1 菌种分离纯化  26-27
    2.3.2 试验菌株筛选  27
    2.3.3 黄绿蜜环菌菌丝体形态  27
    2.3.4 黄绿蜜环菌生理学特性研究  27-33
      2.3.4.1 不同碳源对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响  27-28
      2.3.4.2 不同氮源对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响  28
      2.3.4.3 不同无机盐对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响  28-29
      2.3.4.4 不同生长因子对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响  29
      2.3.4.5 不同pH值对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响  29-30
      2.3.4.6 不同温度对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响  30
      2.3.3.7 黄绿蜜环菌菌丝体培养条件的优化  30-33
第三章 黄绿蜜环菌菌丝体多糖检测技术  33-59
  3.1 试验材料  33
  3.2 试验方法  33-37
    3.2.1 苯酚-硫酸法测定黄绿蜜环菌菌丝体多糖  33-35
      3.2.1.1 苯酚-硫酸法标准曲线条件选择  33-34
      3.2.1.2 苯酚-硫酸法的稳定性试验  34
      3.2.1.3 苯酚-硫酸法标准曲线制备  34
      3.1.1.4 苯酚-硫酸法的回收试验  34-35
    3.2.2 蒽酮-硫酸法测定黄绿蜜环菌菌丝体多糖  35-37
      3.2.2.1 蒽酮-硫酸法标准曲线条件选择  35-36
      3.2.2.2 蒽酮-硫酸法的稳定性试验  36
      3.2.2.3 蒽酮-硫酸法标准曲线制备  36
      3.2.2.4 蒽酮-硫酸法的回收试验  36-37
  3.3 结果与分析  37-59
    3.3.1 苯酚-硫酸法测定黄绿蜜环菌菌丝体多糖  37-48
      3.3.1.1 苯酚-硫酸法标准曲线条件选择  37-46
      3.3.1.2 苯酚-硫酸法的稳定性试验结果  46-47
      3.3.1.3 苯酚-硫酸法标准曲线制备  47-48
      3.3.1.4 苯酚-硫酸法的回收试验结果  48
    3.3.2 蒽酮-硫酸法测定黄绿蜜环菌菌丝体多糖  48-59
      3.3.2.1 蒽酮-硫酸法标准曲线条件选择  48-57
      3.3.2.2 蒽酮-硫酸法的稳定性试验结果  57
      3.3.2.3 蒽酮-硫酸法标准曲线制备  57-58
      3.3.2.4 蒽酮-硫酸法的回收试验结果  58-59
第四章 黄绿蜜环菌菌丝体多糖提取  59-73
  4.1 试验材料  59
  4.2 试验方法  59-63
    4.2.1 黄绿蜜环菌菌丝体热水法多糖提取  59-61
      4.2.1.1 浸提比对提取效果的影响试验  59
      4.2.1.2 浸提时间对提取效果的影响试验  59
      4.1.1.3 浸提温度对提取效果的影响试验  59
      4.1.1.4 乙醇沉淀浓度对提取效果的影响试验  59-60
      4.1.1.5 黄绿蜜环菌菌丝体热水法多糖提取条件优化  60-61
    4.2.2 黄绿蜜环菌菌丝体碱法多糖提取  61-62
      4.2.2.1 浸提比对提取效果的影响试验  61
      4.2.2.2 浸提时间对提取效果的影响试验  61
      4.2.2.3 浸提温度对提取效果的影响试验  61
      4.2.2.4 pH值对提取效果的影响试验  61
      4.2.2.5 黄绿蜜环菌菌丝体碱法多糖提取条件优化  61-62
    4.2.3 黄绿蜜环菌菌丝体酸法多糖提取  62-63
      4.2.3.1 浸提比对提取效果的影响试验  62
      4.2.3.2 浸提时间对提取效果的影响试验  62
      4.2.3.3 浸提温度对提取效果的影响试验  62
      4.2.3.4 pH值对提取效果的影响试验  62
      4.2.3.5 黄绿蜜环菌菌丝体酸法多糖提取条件优化  62-63
  4.3 结果与分析  63-73
    4.3.1 黄绿蜜环菌菌丝体热水法多糖提取  63-66
      4.3.1.1 浸提比对提取效果的影响  63
      4.3.1.2 浸提时间对提取效果的影响  63-64
      4.3.1.3 浸提温度对提取效果的影响  64
      4.3.1.4 乙醇沉淀浓度对提取效果的影响  64
      4.3.1.5 黄绿蜜环菌菌丝体热水法多糖提取条件优化  64-66
    4.3.2 黄绿蜜环菌菌丝体碱法多糖提取  66-69
      4.3.2.1 浸提比对提取效果的影响  66
      4.3.2.2 浸提时间对提取效果的影响  66-67
      4.3.2.3 浸提温度对提取效果的影响  67
      4.3.2.4 pH值对提取效果的影响  67
      4.3.2.5 黄绿蜜环菌菌丝体碱法多糖提取条件优化  67-69
    4.3.3 黄绿蜜环菌菌丝体酸法多糖提取  69-73
      4.3.3.1 浸提比对提取效果的影响  69
      4.3.3.2 浸提时间对提取效果的影响  69-70
      4.3.3.3 浸提温度对提取效果的影响  70
      4.3.3.4 pH值对提取效果的影响  70
      4.3.3.5 黄绿蜜环菌菌丝体酸法多糖提取条件优化  70-73
第五章 黄绿蜜环菌菌丝体多糖发酵  73-76
  5.1 试验材料  73
  5.2 试验方法  73-74
  5.3 结果与分析  74-76
第六章 结论与讨论  76-82
  6.1 黄绿蜜环菌菌丝体生物学特性  76-77
  6.2 黄绿蜜环菌多糖检测技术  77-78
    6.2.1 苯酚-硫酸法测定黄绿蜜环菌多糖  77
    6.2.2 蒽酮-硫酸法测定黄绿蜜环菌多糖  77-78
  6.3 黄绿蜜环菌菌丝体多糖提取  78-79
  6.4 黄绿蜜环菌菌丝体多糖发酵  79
  6.5 黄绿蜜环菌菌丝体多糖发酵初步工艺  79-80
  6.6 黄绿蜜环菌菌丝体多糖提取初步工艺  80
  6.7 存在的问题及展望  80-82
    6.7.1 存在的问题  80
    6.7.2 研究前景  80-82
参考文献  82-85
图版  85-87
致谢  87-88
个人简历  88-89
在校期间发表的学术论文  89

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 药用作物 > 菌类 > 其他
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