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应用多肽阵列研究非小细胞肺癌患者血清中的p53自身抗体

作　者: 唐恺
导　师: 许绍发；岳文涛
学　校: 北京市结核病胸部肿瘤研究所
专　业: 外科学
关键词: 多肽阵列 点合成 非小细胞肺癌 p53自身抗体 抗原决定簇
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


背景与目的多肽阵列是近年来发展起来的一种研究分子之间相互作用的技术。它可以利用多肽模拟蛋白抗原与抗体结合,进而研究抗体识别的抗原表位。本研究拟应用多肽阵列研究非小细胞肺癌患者血清中的p53自身抗体,筛选p53自身抗体识别的抗原决定簇序列,探讨识别不同表位的p53抗体对非小细胞肺癌患者的分期和预后的意义。方法利用点合成技术(SPOT synthesis technique)在纤维素膜上合成覆盖p53蛋白全部序列的多肽阵列(p53 peptide array),合成方式为叠瓦式合成,即相邻多肽链重叠N个氨基酸。分别用ELISA、Western blot和多肽阵列检测非小细胞肺癌患者和健康对照者血清中的p53自身抗体,确定p53自身抗体识别的抗原决定簇序列。结果将包含p53蛋白全部序列的重叠肽段合成到纤维素膜上,每个点对应12肽多肽链,相邻点之间重叠9个氨基酸。ELISA检测84例非小细胞肺癌患者和30例健康对照者血清中的p53自身抗体,21例肺癌患者p53抗体为阳性,阳性率为25%,健康对照者均为阴性。多肽阵列研究发现,14例肺癌患者p53抗体为阳性,阳性率16.67%,而且不同患者p53自身抗体识别某些共同的抗原表位(common epitopes);30例健康对照者均为阴性。p53重组纯蛋白的Western blot实验检测ELISA方法筛出的21例p53抗体阳性的肺癌血清标本,其中14例在与p53蛋白相同的分子量处出现阳性条带,与多肽阵列检测结果相同;而另外7例p53抗体阳性的血清以及p53抗体阴性的血清均无阳性条带。结论多肽阵列不仅可以用来检测肺癌患者血清中的自身抗体,还可以筛选这些自身抗体识别的抗原表位。初步研究发现,肺癌患者血清中的p53自身抗体识别某些共同的抗原表位,这些表位位于p53蛋白重要的功能区内,因此推测这些抗体可能会影响p53蛋白的生物学功能。而且,识别不同表位的p53抗体对非小细胞肺癌患者的分期和预后有不同的意义,有待于进一步研究。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
论文  9-44
  前言  9-11
  材料与方法  11-22
  结果  22-33
  讨论  33-39
  结论  39-40
  参考文献  40-44
综述  44-55
英文缩写注释表  55-56
致谢  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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