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白囊耙齿菌的液体发酵及其多糖抗肿瘤活性的研究

作　者: 赵兴红
导　师: 滕利荣；逯家辉
学　校: 吉林大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 白囊耙齿菌 多糖 热水浸提 超声提取 体外抗肿瘤活性
分类号: S567.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 167次
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内容摘要


白囊耙齿菌是我国药用真菌中的一种,但是关于它的发酵生产和药用研究国内外进行的均很少。本论文是在对白囊耙齿菌大量实验研究的基础上,首先以菌丝体干重为主要考察对象,通过单因素试验、Plackett-Burman设计试验、最陡爬坡试验和中心组合设计试验优化出最佳的培养基配方;进一步采用单因素试验优化了起始pH值、种龄、接种量、装液量、转速、培养温度、培养时间等摇瓶发酵条件。然后,在单因素试验的基础上采用响应面分析法分别优化了胞内多糖的热水浸提条件和超声波提取条件,比较其优缺点。最后,初步研究了白囊耙齿菌多糖的体外抗肿瘤活性。

全文目录


内容提要  4-10
第一章 绪论  10-25
  1.1 药用真菌液体发酵的研究进展  10-15
    1.1.1 药用真菌液体发酵概况  11-12
    1.1.2 药用真菌液体发酵的优势  12
    1.1.3 药用真菌液体发酵条件的控制与优化  12-15
  1.2 药用真菌多糖的研究进展  15-18
    1.2.1 真菌多糖的定义  15
    1.2.2 真菌多糖的提取和分离纯化  15-16
    1.2.3 真菌多糖的生物活性  16-18
  1.3 真菌多糖的抗肿瘤作用  18-21
    1.3.1 真菌多糖的体外抗肿瘤作用  19-20
    1.3.2 真菌多糖的体内抗肿瘤作用  20
    1.3.3 抗肿瘤免疫真菌多糖类药物的开发利用现状  20-21
  1.4 白囊耙齿菌的研究进展  21-23
    1.4.1 白囊耙齿菌的生物学特征  21-22
    1.4.2 白囊耙齿菌的药理作用  22-23
  1.5 立题意义  23
  1.6 本文的主要研究内容  23-25
第二章 白囊耙齿菌摇瓶发酵条件的研究  25-55
  2.1 引言  25
  2.2 材料与仪器  25-27
    2.2.1 菌株  25
    2.2.2 培养基  25-26
    2.2.3 药品与试剂  26-27
    2.2.4 仪器设备  27
  2.3 实验方法  27-32
    2.3.1 培养方法  27-28
    2.3.2 菌丝体干重测定方法  28
    2.3.4 白囊耙齿菌胞内多糖的提取  28
    2.3.5 白囊耙齿菌胞内多糖含量的测定  28-29
    2.3.6 实验设计  29-32
  2.4 结果与讨论  32-53
    2.4.1 蒽酮-硫酸标准曲线  32-33
    2.4.2 有机氮源种类对白囊耙齿菌发酵的影响  33-34
    2.4.3 碳源种类对白囊耙齿菌发酵的影响  34-36
    2.4.4 金属阳离子种类对白囊耙齿菌发酵的影响  36-37
    2.4.5 无机氮源对白囊耙齿菌发酵的影响  37
    2.4.6 Plackett-Burman设计试验结果  37-38
    2.4.7 最陡爬坡试验  38-39
    2.4.8 培养基的响应面分析法  39-43
    2.4.9 验证实验  43
    2.4.10 起始pH值对白囊耙齿菌发酵的影响  43-45
    2.4.11 种龄对白囊耙齿菌发酵的影响  45-46
    2.4.12 接种量对白囊耙齿菌发酵的影响  46-48
    2.4.13 装液量对白囊耙齿菌发酵的影响  48-49
    2.4.14 培养温度对白囊耙齿菌发酵的影响  49-50
    2.4.15 转速对白囊耙齿菌发酵的影响  50-51
    2.4.16 培养时间对白囊耙齿菌发酵的影响  51-53
  2.5 本章小结  53-55
第三章 白囊耙齿菌胞内多糖提取工艺的研究  55-74
  3.1 引言  55
  3.2 材料与仪器  55-57
    3.2.1 菌株  55-56
    3.2.2 培养基  56
    3.2.3 药品与试剂  56-57
    3.2.4 仪器设备  57
  3.3 实验方法  57-59
    3.3.1 深层发酵的培养方法  57
    3.3.2 菌丝体干粉的制备  57
    3.3.3 提取液中多糖含量的测定  57-58
    3.3.4 提取胞内多糖的单因素试验  58
    3.3.5 响应面分析法优化提取工艺  58
    3.3.6 验证实验  58
    3.3.7 提取次数对多糖得率的影响  58-59
  3.4 结果与讨论  59-72
    3.4.1 白囊耙齿菌胞内多糖热水浸提条件的探索  59-66
    3.4.2 白囊耙齿菌胞内多糖超声提取条件的探索  66-72
  3.5 本章小结  72-74
第四章 白囊耙齿菌多糖体外抗肿瘤活性的研究  74-91
  4.1 引言  74-75
  4.2 材料与仪器  75-76
    4.2.1 细胞株  75
    4.2.2 96孔细胞培养板  75
    4.2.3 药品与试剂  75-76
    4.2.4 仪器设备  76
  4.3 实验方法  76-78
    4.3.1 样品的制备  76-77
    4.3.2 细胞完全培养液的配制  77
    4.3.3 细胞培养方法  77
    4.3.4 细胞生长抑制实验  77-78
  4.4 结果与讨论  78-89
    4.4.1 白囊耙齿菌多糖对肿瘤细胞体外增殖的影响  78-83
    4.4.2 不同提取方法胞内多糖抗肿瘤活性的比较  83-89
  4.5 本章小结  89-91
第五章 研究成果与展望  91-93
  5.1 本文的主要研究成果  91-92
  5.2 后续研究展望  92-93
参考文献  93-98
攻读硕士期间发表论文  98-99
致谢  99-100
摘要  100-102
Abstract  102-104

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 药用作物 > 菌类
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