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桑黄多糖研究

作　者: 任涛
导　师: 陈霞
学　校: 吉林大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 桑黄 多糖 提取 醇碱水 活性 细胞壁破碎
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 266次
引　用: 1次
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内容摘要


本研究采用醇碱水提取,桑黄子实体多糖,经乙醇沉淀得到粗多糖。以多糖得率为考察指标,选择提取温度、时间、液料比、提取液pH值和提取液中加入乙醇的浓度作为单因素进行了提取工艺的研究,在此基础上通过L9 (33)正交试验,对比热水浸提法、碱水浸提法、醇碱水浸提法,确定最佳提取工艺为最佳提取条件为:提取方法为醇碱水法,提取温度100°C,提取时间4 h,液料比30:1 mL/g,提取液pH值为10,提取液中加入乙醇的浓度为5 %。并对三种溶剂提取的桑黄多糖进行红外检测。经比较,确定提取的多糖类型一致。邻苯三酚自氧化试验及·OH自由基清除试验证明三种溶剂提取的多糖对O2-·和·OH均有清除作用,并且不同溶剂提取的多糖抗氧化效果相近。采用膜分离装置将桑黄多糖按分子量大小分为4个阶段,并进行抗氧化活性比对,发现分子量在50-100 kD的多糖对O2-·清除作用最好。对三种溶剂提取的桑黄多糖抑菌活性进行了研究及比对,结果表明三种溶剂提取的多糖对大肠杆菌以及酿酒酵母均有抑制作用,随多糖浓度的增加抑菌率增加,并且不同溶剂提取的多糖抑菌效果相近。最后针对醇碱水提率高的原因,研究了醇碱水法对细胞壁的破碎效果。采用考马斯亮蓝法比对三种溶剂提取后残渣中蛋白和糖蛋白的提率,发现醇碱水法处理后的残渣蛋白和糖蛋白提率比水和碱水处理后的残渣要高。对残渣多种葡聚糖,进行提取比较,发现醇碱水提后的葡聚糖的提取率提高。对三种溶剂提取多糖后剩余桑黄残渣进行石蜡包埋、切片,光镜观察发现醇碱水提后的残渣,较水提和碱提的残渣,更为松散。对三种溶剂提取多糖后剩余桑黄残渣进行电镜扫描观察发现醇碱水提后的残渣,较水提和碱提的残渣,更为松散,桑黄菌丝直径更小,发生不同程度的弯曲变形。试验表明在提取溶剂中加入碱使得桑黄细胞壁外层甘露聚糖溶解,加入乙醇使得细胞壁中层起支撑和连接作用的蛋白质变构而导致细胞壁更易破碎,因此多糖的得率较蒸馏水、碱水浸提的得率更高。

全文目录


提要  5-9
第一章 前言  9-20
  1.1 桑黄研究进展  9-12
    1.1.1 桑黄形态  9-10
    1.1.2 资源分布  10
    1.1.3 化学成分  10-11
    1.1.4 药用功能  11-12
  1.2 桑黄多糖的研究进展  12-17
    1.2.1 桑黄多糖的简介  12-13
    1.2.2 多糖的提取方法  13
    1.2.3 多糖的分离纯化  13-14
    1.2.4 桑黄多糖的生理活性  14-17
  1.3 中药有效成分的提取及意义  17-18
    1.3.1 中药的有效成分  17
    1.3.2 中草药有效成分提取的意义  17-18
  1.4 中药抑菌研究概述  18-19
    1.4.1 中药有效成分的作用  18
    1.4.2 与其它药物的协同作用  18-19
    1.4.3 药物的配伍影响其抑菌作用  19
  1.5 研究意义  19-20
第二章 桑黃多糖的提取、分离纯化及活性研究  20-40
  2.1 实验材料、药品和仪器  20-22
    2.1.1 实验材料  20
    2.1.2 实验药品  20-21
    2.1.3 实验仪器  21-22
  2.2 实验方法  22-28
    2.2.1 原材料预处理  22
    2.2.2 多糖含量测定标准  22
    2.2.3 桑黄多糖的提取  22-25
    2.2.4 桑黄多糖的红外检测  25
    2.2.5 桑黄粗多糖的分离与纯化  25
    2.2.6 三种溶剂提取的桑黄多糖的抗氧化活性比较  25-27
    2.2.7 三种溶剂提取的桑黄多糖的抑菌活性比较  27-28
  2.3 实验结果与讨论  28-39
    2.3.1 总糖与还原糖测定标准曲线  28-29
    2.3.2 桑黄多糖提取单因素试验  29-33
    2.3.3 桑黄多糖提取正交试验  33
    2.3.4 三种溶剂对桑黄多糖得率的对比试验  33-34
    2.3.5 桑黄多糖的红外检测  34-35
    2.3.6 三种溶剂提取的桑黄多糖的抗氧化活性比较  35-37
    2.3.7 三种溶剂提取的桑黄多糖的抑菌活性比较  37-39
  2.4 结论  39-40
第三章 醇碱对桑黃细胞壁破碎作用的研究  40-49
  3.1 实验材料、药品和仪器  40
    3.1.1 实验材料  40
    3.1.2 实验药品  40
    3.1.3 实验仪器  40
  3.2 试验方法  40-43
    3.2.1 桑黄糖蛋白的提取及含量测定  40-41
    3.2.2 桑黄细胞壁葡聚糖的提取及含量测定  41-42
    3.2.3 三种提取溶剂浸提后桑黄子实体残渣的形态观察  42-43
  3.3 实验结果与讨论  43-47
    3.3.1 小牛血清白蛋白的对照工作曲线  43
    3.3.2 桑黄细胞壁糖蛋白的含量测定  43-44
    3.3.3 桑黄细胞壁葡聚糖的含量测定  44
    3.3.4 三种提取溶剂浸提后桑黄子实体残渣的形态观察  44-47
  3.4 结论  47-49
参考文献  49-56
攻读硕士学位期间发表的学术论文  56-57
摘要  57-59
ABSTRACT  59-61
致谢  61

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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