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急性肝衰竭大鼠肝组织iNOS和VEGF的表达及氨基胍的干预作用

作　者: 朱海超
导　师: 甘建和
学　校: 苏州大学
专　业: 内科学
关键词: 急性肝衰竭诱导型一氧化氮合酶一氧化氮血管内皮生长因子 D-氨基半乳糖内毒素氨基胍
分类号: R575.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:检测急性肝衰竭(ALF)大鼠肝组织NO浓度及iNOS和VEGF的表达,观察氨基胍的干预作用,分析iNOS和VEGF的相关性,探讨其在急性肝衰竭中的意义。方法:60只SD大鼠随机分为6组,每组10只。对照组分为:生理盐水组(NS)和氨基胍组(AG),分别给予NS及AG100mg/Kg腹腔注射。实验组分为肝衰竭模型组和氨基胍干预组,以腹腔注射D-氨基半乳糖/内毒素(D-Galn400mg/Kg+LPS 50μg/Kg),复制大鼠急性肝衰竭模型;肝衰竭模型组分为:D-6组和D-12组,分别在6小时、12小时处死;氨基胍干预组分为:A-6组和A-12组,先腹腔注射氨基胍100mg/Kg,30分钟后给予D-Galn +LPS,分别在6、12小时处死。门静脉采血,检测肝功能;留取肝组织标本,硝酸还原酶法检测肝组织NO,免疫组织化学方法检测iNOS及VEGF;免疫组化阳性产物用图像分析软件行半定量分析。结果:(1)NS组和AG组肝组织匀浆NO浓度分别为(14.39±2.99)μmol/L、(13.39±2.83)μmol/L,t=0.77,Ρ=0.4527。氨基胍干预组和肝衰竭模型组比较,肝组织NO浓度明显降低,6小时分别为(15.79±2.5)3μmol/L、(26.61±7.92)μmol/L,t=3.09,Ρ=0.0109;12小时分别为(30.83±5.08)μmol/L、(48.38±4.18)μmol/L,t=7.70,Ρ<0.001。(2)对照组肝组织iNOS和VEGF无表达,实验组肝组织二者均高表达;氨基胍干预组和肝衰竭模型组比较,iNOS/VEGF表达强度明显降低,其平均灰度值在6小时分别为: 119.18±6.55/135.08±5.37、81.02±5.86/124.33±3.80 , 12小时分别为:151.52±5.87/155.34±5.82、130.71±7.16/145.69±3.35,Ρ均<0.05。(3)iNOS和VEGF的平均灰度值经过Spearman相关分析,秩相关系数r=0.8859,Ρ<0.05。结论:(1)ALF大鼠肝组织NO浓度升高,氨基胍抑制NO的生成;(2)ALF大鼠肝组织iNOS和VEGF均高表达,氨基胍对其表达有抑制作用;(3)iNOS和VEGF的表达存在相关性;(4)急性肝衰竭时,肝组织高表达的iNOS和VEGF可能在肝脏新生血管形成、肝血窦重建及肝细胞再生中有重要意义。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-9
前言  9-11
材料  11-13
  1.1 动物  11
  1.2 主要试剂  11-12
  1.3 主要仪器  12
  1.4 主要溶液配制  12-13
实验方法  13-17
  2.1 大鼠分组、给药方法  13
  2.2 标本留取  13-14
  2.3 血清肝功能检测：苏州大学附属第一医院检验科全自动生化分析仪测定  14
  2.4 硝酸还原酶法法检测肝组织中NO 含量  14-15
  2.5 HE 染色步骤  15
  2.6 免疫组织化学  15-16
  2.7 统计学处理  16-17
结果  17-29
  3.1 动物一般观察  17-18
  3.2 肝脏大体标本  18-19
  3.3 肝功能检测结果  19
  3.4 肝组织总一氧化氮检测  19-20
  3.5 肝组织HE 染色  20-24
  3.6 肝组织INOS 及VEGF 免疫组织化学  24-28
  3.7 VEGF 和INOS 表达相关性  28-29
讨论  29-34
  4.1 ALF 肝组织NO 的浓度及氨基胍的干预作用  29-31
  4.2 ALF 肝组织INOS、VEGF 的相关性及意义  31-34
结论  34-35
参考文献  35-40
综述  40-52
缩略词表  52-53
攻读学位期间公开发表的论文  53-54
致谢  54

急性肝衰竭大鼠肝组织iNOS和VEGF的表达及氨基胍的干预作用

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