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内生真菌混合发酵产鬼臼毒素的研究

作　者: 刘星
导　师: 黄建新
学　校: 西北大学
专　业: 微生物学
关键词: 鬼臼毒素内生真菌混合发酵优化
分类号: S567.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 93次
引　用: 2次
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内容摘要

鬼臼毒素（Podophyllotoxin）是一种木酚素类化和物,因具有显著的抗肿瘤、抗病毒活性,在医药领域具有重要的应用价值。但天然资源有限,无法满足日益增长的市场需求。研究发现桃儿七等植物的内生真菌具有产生鬼臼毒素的能力,因而采用真菌发酵来获得鬼臼毒素,为解决鬼臼类抗癌药物短缺提供新途径。本研究利用本实验室获得的两株产鬼臼毒素的内生真菌:STQ菌株和Ty-x菌株,采用混合发酵的手段来提高鬼臼毒素的产量。通过研究获得混合发酵生产鬼臼毒素的相关参数数据,为实现大规模生产奠定基础。对鬼臼毒素产生真菌STQ菌株和Ty-x菌株的混合发酵培养基及发酵条件进行优化研究。结果表明:优化后的发酵培养基组成为:1%淀粉、1%蔗糖、1.5%豆饼粉、0.15%酵母膏、0.075%K₂HPO₄、0.075%NaCl。采用优化发酵培养基,STQ和Ty-x菌株以2:1配比,接种量5%（v/v）,初始pH6.5,装瓶量70ml/250ml,28℃、180r/min培养7d,STQ和Ty-x菌株混合发酵的生物量和鬼臼毒素的含量比发酵培养基的生物量和鬼臼毒素的含量分别提高了15.1%和9.8%。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-7
第一章绪论  7-23
  1.1 鬼臼毒素研究概况  7-9
    1.1.1 鬼臼毒素的理化性质  8
    1.1.2 鬼臼毒素的化学结构  8-9
  1.2 鬼臼毒素的应用及作用机制  9-13
    1.2.1 在医药领域的应用  9-12
    1.2.2 在农药领域的应用  12-13
  1.3 鬼臼毒素资源研究现状  13-14
  1.4 鬼臼毒素资源短缺的解决途径  14-17
    1.4.1 化学合成和半合成  14-15
    1.4.2 引种栽培  15
    1.4.3 植物细胞组织培养  15-16
    1.4.4 毛状根转化  16
    1.4.5 植物内生真菌发酵  16-17
  1.5 内生真菌发酵过程中的影响因素  17-19
    1.5.1 种子  18
    1.5.2 培养基  18
    1.5.3 pH值  18
    1.5.4 温度  18-19
    1.5.5 通气和搅拌  19
    1.5.6 泡沫  19
  1.6 微生物混合培养的研究概况  19-21
    1.6.1 混合培养的研究现状  19-20
    1.6.2 混合培养的方式  20
    1.6.3 混合培养的应用  20-21
    1.6.4 混合培养的问题和展望  21
  1.7 本研究的目的、意义和内容  21-23
    1.7.1 研究的目的和意义  21-22
    1.7.2 研究内容  22-23
第二章实验部分  23-42
  2.1 实验材料  23-24
    2.1.1 菌种  23
    2.1.2 主要试剂  23
    2.1.3 主要仪器  23
    2.1.4 培养基  23-24
  2.2 实验方法  24-28
    2.2.1 菌株的培养方法  24-25
    2.2.2 不同初始pH，装液量和接种量对混合培养生物量和鬼臼毒素积累的影响  25
    2.2.3 发酵培养基的成分优化  25-26
    2.2.4 发酵目的产物的分离纯化和检测分析  26-28
  2.3 结果与讨论  28-42
    2.3.1 鬼臼毒素标准品HPLC图谱和标准曲线的绘制  28-29
    2.3.2 STQ菌株和Ty-x菌株单菌培养产物的检测  29-30
    2.3.3 STQ和Ty-x单菌培养生长规律及不同生长时期鬼臼毒素的含量变化  30-32
    2.3.4 STQ和Ty-x相互关系培养测试结果  32
    2.3.5 STQ和Ty-x菌株不同配比混合发酵的生长曲线  32-33
    2.3.6 STQ:Ty-x(2:1)混合培养的生长规律及鬼臼毒素含量的变化  33-34
    2.3.7 不同初始pH对生物量和鬼臼毒素积累的影响  34-35
    2.3.8 装液量对生物量和鬼臼毒素积累的影响  35
    2.3.9 接种量对生物量和鬼臼毒素积累的影响  35-36
    2.3.10 培养基组分的设计与优化  36-41
    2.3.11 优化发酵培养基的验证  41-42
小结  42-43
参考文献  43-49
攻读硕士学位期间取得的学术成果  49-50
致谢  50

内生真菌混合发酵产鬼臼毒素的研究

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