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小檗碱抗Ang Ⅳ诱导的血管平滑肌细胞增殖与PPARα-NO信号通路关系研究

作　者: 王全华
导　师: 蒋青松
学　校: 重庆医科大学
专　业: 药理学
关键词: 血管平滑肌细胞 血管紧张素IV 小檗碱 过氧化物酶体增殖物激活受体-α 一氧化氮
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的:利用大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）培养,研究血管紧张素Ⅳ（angiotensinⅣ,AngⅣ）在VSMCs增殖中的作用,以及过氧化物酶体增殖物激活受体-α（peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα）/一氧化氮（nitric oxide,NO）信号通路的变化;并采用中药黄连主要活性成分小檗碱（berberine,BBR）进行干预,探讨BBR的作用及该作用与PPARα/NO信号通路的关系。方法:体外培养大鼠VSMCs,以吸光度值(A490)和总蛋白含量为VSMCs增殖指标。Real time RT-PCR和Western blot方法分别检测mRNA和蛋白水平的表达,比色法和硝酸还原法分别检测一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS）活性和NO浓度。结果:AngⅣ(0.01、0.1、1 nmol·L-1)使A490与总蛋白含量表达均明显增加（P<0.01）,促进VSMCs增殖,其中以AngⅣ0.1 nmol·L-1作用最为明显。而PPARαmRNA和蛋白的表达、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS） mRNA的表达均降低（P<0.05）,同时使NOS活性和NO浓度下降（P<0.01）。PPARα激动剂非诺贝特（fenofibrate,FF）与NO前体L-精氨酸（L-arginine,L-arg）均可明显抑制AngⅣ诱导的VSMCs增殖,提高PPARα和eNOS的表达,使NOS活性和NO浓度增加（P﹤0.05）。而其阻断剂MK 886与NOS抑制剂NG-硝基-L-精氨酸-甲酯（NG-nitro-L-arginine-methyl ester, L-NAME）可分别使FF与L-arg的上述作用得到阻断（P﹤0.05）。BBR具有与FF及L-arg相似的作用,可抑制AngⅣ诱导的VSMCs增殖,在10μmol·L-1～100μmol·L-1呈浓度依赖性性,并可激活PPARα/NO信号通路（P<0.05）。MK 886与L-NAME可使BBR的上述作用完全取消（P﹤0.05）。结论: AngⅣ可诱导VSMCs增殖,PPARα/NO信号通路可能参与其中;BBR具有抗AngⅣ诱导VSMCs增殖的作用,该作用可能与其激活PPARα信号通路,同时增加eNOS的表达,最终使NO的释放增加有关。

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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