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NRP1在胃癌组织中的表达及抑制胃移植瘤生长的实验研究

作　者: 彭阳
导　师: 吴小翎
学　校: 重庆医科大学
专　业: 内科学
关键词: 胃癌组织神经纤毛蛋白1(NRP1) 胃癌细胞小干扰RNA(SiRNA)
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的检测NRP1在人胃癌中的表达情况;设计NRP1小干扰RNA质粒;通过RNA干扰技术探讨神经纤毛蛋白1(neuropilin 1 NRP1)对裸鼠胃癌移植瘤生长抑制的影响。方法通过免疫组化SP法测定NRP1在人胃癌中的表达及NRP1在正常胃组织中的表达,并用CD34标记血管内皮细胞的数目以测定微血管密度;设计靶向人NRP1基因的发夹状SiRNA(Small interfering RNA SiRNA)序列,合成一对互补的寡核苷酸,退火后克隆至质粒pGenesil-1.1,通过酶切分析和DNA测序鉴定重组质粒;把人胃癌细胞SGC7901注入裸鼠右臀部皮下以构建移植瘤模型;成瘤后注入重组质粒至裸鼠皮下并观察裸鼠一般情况并测定裸鼠移植瘤的重量及体积;病理切片观察肿瘤组织及血管生长情况;免疫组化方法观察裸鼠移植瘤中NRP1的表达情况及微血管密度。结果人胃癌组织中NRP1的表达及微血管密度显著高于正常胃组织,具有统计学意义(P<0.05);酶切分析及测序鉴定证实目的寡核苷酸片段被克隆到质粒pGenesil-1.1中;实验组裸鼠移植瘤的重量及体积小于对照组(P<0.05);病理切片示实验组肿瘤细胞坏死较对照组明显;免疫组化方法显示实验组裸鼠移植瘤中肿瘤细胞NRP1的表达及微血管密度低于对照组(P<0.05)。结论胃癌中NRP1的表达较正常组织高,NRP1的表达增多和微血管密度增加相关;通过SiRNA-NRP1抑制裸鼠胃癌移植瘤中NRP1的表达,可影响裸鼠移植瘤中血管的生成,最终抑制肿瘤的生长。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-14
第一部分 NRP1 在胃癌中的表达及其与肿瘤生长增殖的关系  14-19
  1 材料与方法  14-16
  2 实验结果  16-19
第二部分 NRP1 小干扰RNA 质粒的构建  19-26
  1 材料与方法  19-24
  2 实验结果  24-26
第三部分 RNAi 抑制NRP1 蛋白的表达对裸鼠胃癌移植瘤生长抑制的实验研究  26-32
  1 材料和方法  26-29
  2 实验结果  29-32
第四部分讨论  32-35
全文总结  35-36
参考文献  36-39
附图  39-43
文献综述  43-49
  参考文献  46-49
致谢  49-50
攻读学位期间发表的学术论文  50

NRP1在胃癌组织中的表达及抑制胃移植瘤生长的实验研究

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