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MP治疗ASCI后细胞凋亡情况及相关机制的实验研究

作　者: 陈飚
导　师: 林宏生
学　校: 暨南大学
专　业: 外科学
关键词: 急性脊髓损伤甲基强的松龙细胞凋亡 Caspase 机制
分类号: R651.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：观察甲基强的松龙(methylprednisolone MP)治疗急性脊髓损伤(acute spinal cord injury ASCI)后细胞凋亡(apoptosis)情况,探讨MP在治疗ASCI过程中有无抗细胞凋亡的作用；通过检测与细胞凋亡密切相关的因子Caspase-3、6、8、9的活性,进一步分析MP治疗ASCI的相关机制。方法：1.采用改良Allen’s法建立ASCI动物模型,将实验动物随机分为假手术组(S组)12只、单纯损伤组(C组)36只与MP治疗组(T组)36只,分别于损伤后不同时间点用Rivlin斜板试验和BBB评分法观察、测评各组脊髓运动神经功能,对比各组间差异；2.分别于损伤后8h,24h,72h,7d,14d和28d处死动物取脊髓标本,HE染色观察各组病理学改变情况；3. TUNEL法检测各组脊髓标本细胞凋亡情况；4.检测各组相关凋亡分子Caspase-3、6、8、9的活性,分析各组之间有无差异。结果：1.术后两组斜板临界角度值和BBB评分值随时间点延长均逐渐升高,在各时间点的斜板临界角度值及BBB评分值,T组均比C组高,损伤后7天及之后各时间点,两组对比有统计学意义(P<0.05),损伤后14天和28天时,T组和C组有显著差异(P<0.01)。2. HE染色病理学观察,S组脊髓组织在各时间点未见明显异常；损伤后8h、24h及72h脊髓组织结构紊乱,可见不同程度出血、神经细胞水肿、坏死,灰质中空泡形成,炎症细胞浸润,T组与C组无明显区别。损伤后7天、14天及28天,T组脊髓组织恢复较C组良好,整体损伤程度轻。3. TUNEL法细胞凋亡检测,S组未发现凋亡阳性细胞,C组及T组在损伤后8h可见阳性细胞,24h达到高峰,3d仍较多,术后7d渐渐减少,14d及28天时阳性细胞数明显降低。两组对比,在损伤后8h、24h、3d及7d四个时间点,T组阳性细胞明显少于C组,有统计学意义(P<0.05),14天及28天时无统计学意义(P>0.05)。4. Caspase-3、6、8、9活性检测,S组各Caspase的活性都很低,而Caspase-9因活性太低而难以检测到,C组和T组在损伤后8h活性增加,24h达到高峰,3天时仍较高,损伤后7天各活性下降,14天及28天时明显降低。两组对比,损伤后8h、24h、3d及7d,T组各Caspase活性明显低于C组,有统计学意义(P<0.05)。14天及28天无统计学意义(P>0.05)。结论：1.MP治疗急性脊髓损伤动物模型后可明显提高脊髓神经运动功能；2.MP可减轻继发性脊髓损伤：3.MP在治疗急性脊髓损伤中具有抗细胞凋亡作用；4.MP通过抑制Caspase-3、6、8、9的活性,从而发挥抗细胞凋亡作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
目录  8-9
1 前言  9-16
  1.1 急性脊髓损伤机制  9-13
  1.2 脊髓损伤治疗现状  13-15
  1.3 本实验设计目的及意义  15-16
2 实验一 MP治疗ASCI后脊髓神经运动功能、组织病理学改变及细胞凋亡情况  16-43
  2.1 研究目的  16
  2.2 实验材料  16-17
  2.3 实验方法  17-23
  2.4 统计学分析  23
  2.5 结果  23-29
  2.6 讨论  29-33
  2.7 结论  33-34
  2.8 附图  34-43
3 实验二 MP治疗ASCI后相关凋亡分子Caspase-3,6,8,9活性的测定  43-56
  3.1 研究目的  43
  3.2 实验材料  43
  3.3 实验方法  43-47
  3.4 统计学分析  47
  3.5 结果  47-52
  3.6 讨论  52-55
  3.7 结论  55-56
4 英文缩略词  56-57
5 参考文献  57-63
6 发表论文  63
7 参与的科研项目与学术活动  63-64
8 致谢  64

MP治疗ASCI后细胞凋亡情况及相关机制的实验研究

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