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正中中缝核注射5，7-二羟色胺对致痫大鼠癫痫发作及学习记忆的影响

作　者: 吕晓钗
导　师: 黄华品
学　校: 福建医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 癫痫 学习记忆 Morris水迷宫 5-羟色胺 5,7-二羟色胺 脑微透析 高效液相-电化学检测
分类号: R742.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


【目的】建立匹罗卡品(PILO)癫痫大鼠模型,于中脑正中中缝核局部微量注射5,7-二羟色胺(5,7-DHT),观察癫痫大鼠痫性发作、中缝核5-羟色胺(5-HT)能神经元数目、海马细胞外5-HT及其代谢产物5-吲哚乙酸(5-HIAA)浓度的变化,探讨脑内5-HT与癫痫的关系;同时评估癫痫大鼠在Morris水迷宫(MWM)实验中的学习记忆能力,探讨癫痫大鼠学习记忆改变的可能机制。【方法】1、实验动物分组:SD大鼠随机分为三组:空白对照组(NS),匹罗卡品组(PILO+NS),匹罗卡品组+5,7-二羟色胺组(PILO+5,7-DHT)。实验第一部分根据注射PILO后是否出现癫痫持续状态(SE)再将PILO+NS组分成:出现SE组(PILO+SE)和未出现SE组(PILO-SE),同时将PILO+5,7-DHT组无发生SE大鼠剔除。2、在脑立体定位仪帮助下,根据Watson《大鼠脑立体定位图谱》,将记录电极置入右侧额叶皮层,微透析引导管置入右侧海马,并于大脑正中中缝核注入5,7-DHT。3、制作PILO癫痫模型:腹腔注射PILO320mg/kg或30mg/kg(16-18h前腹腔注射LiCl 127mg/kg),然后30min内连续观察大鼠是否有痫性发作,根据Racine分级,发作级数达到IV级及IV级以上并持续时间>30min时判定为SE。4、利用视频脑电图观察癫痫大鼠急性期、潜伏期、慢性期癫痫发作及皮层脑电变化。5、运用MWM实验行定位航行实验和空间探索实验,测评大鼠空间学习记忆能力。6、运用色氨酸羟化酶标记的免疫组化法观察大鼠中缝核5-HT能神经元数目。7、利用脑微透析结合高效液相(HPLC) -电化学检测(ECD)技术动态监测海马细胞外5-HT、5-HIAA的浓度变化。【结果】1、造模成功率、死亡率:大鼠予以5,7-DHT(PILO+5,7-DHT组)处理后PILO造模成功率、死亡率均增高(P<0.05)。2、行为学变化:腹腔注射PILO后,点燃大鼠出现急性期、潜伏期、慢性期三期行为学改变;在慢性期,PILO+5,7-DHT组大鼠自发性发作频率较出PILO+SE组明显增高(P<0.05),而PILO-SE组大鼠,在慢性期并没有观察到自发性发作。3、脑电图改变:急性期:点燃大鼠可见癫痫波,多为棘波、棘慢波;潜伏期:脑电图以a波为主,偶可见低波幅快波或棘波、棘慢波;慢性期:出现典型的高波幅棘波、尖波、棘-慢复合波和尖-慢复合波,呈阵发性发放。4、MWM实验测评:与NS组比较PILO+SE组平均逃避潜伏期延长、穿越平台的次数减少、原平台象限停留时间缩短(P<0.05),而与PILO+SE组比较PILO+5,7-DHT组变化不明显(P>0.05)。5、中缝核5-HT能数目:与NS组比较PILO+SE组大鼠中缝核5-HT能神经元数目有所下降(P<0.05),而PILO+5,7-DHT组下降更明显(P<0.01)。6、海马细胞外5-HT、5-HIAA浓度变化:急性期海马细胞外5-HT、5-HIAA的浓度较NS组明显增高(P<0.05),潜伏期逐渐降至正常水平(P>0.05),慢性期低于NS组水平(P<0.05);慢性期PILO+5,7-DHT组海马细胞外液5-HT、5-HIAA水平较PILO+NS组明显降低(P<0.05)。【结论】1、在PILO致痫大鼠模型中建立了稳定的脑微透析技术并进行微透析活体取样,为后期动态监测海马细胞外液5-HT、5-HIAA的浓度变化奠定了基础。2、海马细胞外液5-HT的浓度降低可能是诱发癫痫发作的机制之一,5-HT对癫痫具有抑制作用。3、癫痫发作可引起癫痫大鼠空间学习记忆功能下降,但尚不能认为癫痫大鼠合并认知功能障碍与脑内5-HT水平下降有关。

全文目录


主要英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
前言  10-12
第一部分 正中中缝注射5,7-二羟色胺对匹罗卡品致痫大鼠行为、学习记忆的影响  12-27
  引言  12
  材料和方法  12-18
  结果  18-27
第二部分 正中中缝注射5,7-二羟色胺对匹罗卡品致痫大鼠海马细胞外液5-羟色胺及5-羟吲哚乙酸的影响  27-38
  引言  27
  材料与方法  27-33
  结果  33-38
讨论  38-43
结论  43-44
参考文献  44-47
综述  47-57
  参考文献  54-57
致谢  57

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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑部疾病 > 癫痫
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