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不同链长的聚苯乙烯-聚丙烯酸(PS-PAA)球形聚电解质刷与蛋白质相互作用规律研究
作 者: 刘延平
导 师: 徐宏
学 校: 上海交通大学
专 业: 材料科学与工程
关键词: PS-PAA球形聚电解质刷 链长 羧基含量 蛋白质吸附
分类号: O631.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
首先,研究了几种表面不同PAA接枝链长的聚苯乙烯-聚丙烯酸(PS-PAA)球形聚电解质刷在磷酸盐缓冲液(PBS)中对牛血清白蛋白(BSA)的物理吸附,得到了PAA接枝链长对PS-PAA球形聚电解质刷物理吸附BSA的影响规律:在一定链长(25nm)内,随着PAA接枝链长的增加,PS-PAA球形聚电解质刷对BSA的物理吸附降低;当PAA接枝链长增加到一定程度(25nm)时,PS-PAA球形聚电解质刷对BSA的物理吸附达到一个最低值33μg/mg,接枝链长继续增加时,PS-PAA对BSA的物理吸附不再变化。上述实验结果为PS-PAA球形聚电解质刷应用于真实生理环境的表面结构选择提供初步的参考依据。其次,研究了表面不同PAA接枝链长的PS-PAA球形聚电解质刷在PBS中对链霉亲和素(SA)的化学吸附规律。在PBS缓冲液中,通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和碳二亚胺(EDC)活化PS-PAA球形聚电解质刷中PAA链段上的羧基,活化后的羧基通过与SA的氨基形成化学键来实现对SA的化学吸附。然后通过电导酸碱滴定法确定了不同PAA接枝链长的PS-PAA球形聚电解质刷颗粒上的羧基含量,最终分析了羧基含量与PAA接枝链长对PS-PAA球形聚电解质刷在PBS缓冲液中化学吸附SA的影响规律:随着PAA接枝链长和羧基含量的增加,PS-PAA球形聚电解质刷对SA的化学吸附能力逐渐增加,且羧基含量越高时,PS-PAA球形聚电解质刷对SA化学吸附能力增加速度越快。上述研究结果为生物应用PS-PAA球形聚电解质刷的结构设计提供了一定的基础理论依据。最后,初步研究了PS-PAA球形聚电解质刷化学吸附的SA与自由生物素(biotin)的结合活性。首先通过酶竞争抑制法检测了当PS-PAA球形聚电解质刷中SA密度较低时,PAA接枝链长对SA结合biotin活性的影响,结果显示SA密度较低时,PAA接枝链长对SA生物活性无显著影响;然后进一步检测当PAA接枝链长较短(12.5nm)时,PS-PAA球形聚电解质刷中SA的密度对SA结合生物素活性的影响规律,结果表明:当PAA接枝链长较短时(12.5nm),PS-PAA球形聚电解质刷中SA密度对SA与自由生物素的结合活性亦无显著影响。本部分为化学吸附SA的PS-PAA应用于生物医学领域检测应用提供了一定的参考意义。
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全文目录
摘要 3-5 ABSTRACT 5-10 第一章 绪论 10-25 1.1 蛋白质非特异性吸附简介 11-13 1.1.1 蛋白质的非特异性吸附 11 1.1.2 蛋白质非特异性吸附的几种主要作用力 11-13 1.1.3 降低蛋白质非特异性吸附的主要材料 13 1.2 聚电解质刷简介 13-18 1.2.1 聚电解质刷 13-14 1.2.2 聚电解质刷的合成与表征 14-17 1.2.3 聚电解质刷的应用 17-18 1.3 PAA 聚电解质刷 18-23 1.3.1 影响PAA 聚电解质刷伸展的主要因素 18-20 1.3.2 PAA 聚电解质刷与蛋白质的相互作用 20-23 1.4 本文的研究目标、内容及创新性 23-25 1.4.1 本文的主要研究目标和内容 23-24 1.4.2 本文研究的创新性 24-25 第二章 PS-PAA 球形聚电解质刷对BSA 的物理吸附研究 25-42 2.1 引言 25 2.2 实验试剂和仪器 25-26 2.2.1 实验试剂 25-26 2.2.2 主要仪器 26 2.3 样品表征 26-28 2.3.1 样品编号与参数 26-27 2.3.2 PS-PAA 球形聚电解质刷固含量的测定 27-28 2.3.3 PS-PAA 球形聚电解质刷粒度表征 28 2.4 实验方法 28-30 2.4.1 PS-PAA 球形聚电解质刷对BSA 物理吸附曲线的测定 28-29 2.4.2 PS-PAA 球形聚电解质刷对BSA 饱和物理吸附 29-30 2.5 结果与讨论 30-40 2.5.1 PS-PAA 球形聚电解质刷的粒度表征 30-31 2.5.2 PS-PAA 球形聚电解质刷对BSA 的物理吸附实验优化 31-35 2.5.3 PS-PAA 球形聚电解质刷对 BSA 物理吸附曲线的初步测定 35-37 2.5.4 接枝链长对PS-PAA 球形聚电解质刷物理吸附BSA 的影响 37-40 2.6 本章小结 40-42 第三章 PS-PAA 球形聚电解质刷对SA 的化学吸附研究 42-57 3.1 前言 42 3.2 实验试剂和仪器 42-44 3.2.1 实验试剂 42-43 3.2.2 主要实验仪器 43-44 3.3 PS-PAA 球形聚电解质刷的表征 44 3.4 实验方法 44-46 3.4.1 PS-PAA 球形聚电解质刷化学吸附SA 实验条件的优化 44-45 3.4.2 PS-PAA 球形聚电解质刷对 SA 进行化学吸附 45-46 3.5 结果与讨论 46-55 3.5.1 PS-PAA 球形聚电解质刷中羧基含量 46-47 3.5.2 PS-PAA 球形聚电解质刷对SA 化学吸附的条件优化 47-51 3.5.3 PS-PAA 球形聚电解质刷对SA 的化学吸附能力 51-53 3.5.4 接枝链长对PS-PAA 球形聚电解质刷化学吸附SA 能力的影响 53-55 3.6 本章小结 55-57 第四章 PS-PAA-SA 聚合物微球的生物活性评价 57-64 4.1 前言 57 4.2 实验试剂和仪器 57-58 4.2.1 主要实验仪器 57 4.2.2 实验试剂 57-58 4.3 实验方法 58-60 4.3.1 PS-PAA-SA 微球活性评价方法背景的检测 58-60 4.3.2 PS-PAA-SA 微球对自由生物素的结合活性评价 60 4.4 实验结果与讨论 60-63 4.4.1 PS-PAA-SA 微球生物活性评价方法的背景 60-61 4.4.2 PS-PAA-SA 微球对自由生物素的结合活性 61-63 4.5 本章小结 63-64 第五章 全文小结与展望 64-66 参考文献 66-74 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 74-75 致谢 75-79 附件 79
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中图分类: > 数理科学和化学 > 化学 > 高分子化学(高聚物) > 高分子物理和高分子物理化学 > 高聚物的化学性质
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