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山东地区禽白血病发病鸡群的流行病学调查及致病特性的研究

作　者: 杨凤
导　师: 刘思当
学　校: 山东农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 禽白血病流行病学血清学病理学病原学
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

禽白血病(avian leucosis, AL)是指由反转录病毒科甲型反转录病毒属禽白血病病毒引起的以禽类造血组织中某些细胞成分过度增生为主的一类可传染的肿瘤性疾病,其病毒可划分为A-J 10个亚群,本病以垂直和水平传播两种方式在世界各国鸡群中广泛流行,引起鸡死亡或消瘦、生长和发育不良,同时引起机体抵抗力下降和免疫抑制,成为危害养禽业的主要疾病之一。至目前为止,无任何可预防和治疗的药物。为减轻该病毒对养鸡业的危害,探索合适的预防和治疗方法成为生产上亟待解决的问题。1.山东地区禽白血病发病鸡群血清及棉拭子ELISA检测结果表明:山东地区鸡群P27抗原及ALV抗体均有阳性, P27抗原平均阳性率为19.36%;ALV-A/B、ALV-J及REV抗体平均阳性率分别为9.29%、5.18%、13.77%,个别鸡呈现抗体双阳性,说明部分鸡群可能存在ALV-A/B和ALV-J 2种或3种病毒同时感染。各品系鸡群抗体阳性率不尽相同,海兰鸡从祖代到商品代,其P27抗原阳性率、ALV-J、ALV-A/B抗体阳性率逐渐升高。检测结果表明山东地区鸡群普遍存在ALV感染,某些引进的祖代鸡群也不例外,其中以ALV-J为主,ALV-A和ALV-B同时存在,且存在与MDV、REV的混合感染。病理学诊断证明:肿瘤类型主要为髓细胞瘤(27/41)、血管瘤或血管内皮细胞瘤(7/41)、纤维肉瘤(2/41)、平滑肌肉瘤(2/41)及马立克氏病(5/41),其中许多病例为多种组织起源的混合肿瘤,如髓细胞及血管混合瘤。发病鸡群主要是商品鸡群和父母代鸡群,海兰褐祖代鸡群也有发病。病鸡主要由ALV-J感染所致,病鸡均表现骨髓髓系细胞灶状或弥漫性增生,严重时骨髓可完全被这种髓细胞取代。PCR检测结果显示,41份病料中有33份为ALV-J阳性(80.49%);22份为MDV阳性(53.66%);两者共感染率高达43.9 %;从疑似病例分离到的17株ALV-J病毒gp85基因的同源性为94.0%~100%,与ALV-J原型株HPRS-103 gp85基因同源性为94.3%~98.7%;与其它已发表的分离毒株ALV-J gp85基因的同源性较低(84.4~96.8%)。血液常规指标检测中,海兰蛋鸡白细胞总数、淋巴细胞总数、血小板总数、血小板平均体积及血小板压积均低于健康对照组,且差异显著,而红细胞总数、血红蛋白含量及血红蛋白浓度与对照组差异不显著。调查结果表明,目前山东地区鸡群均存在ALV感染,其中以ALV-J为主,ALV-A和ALV-B同时存在,且存在与MDV、REV的混合感染,病鸡主要由ALV-J感染所致主要表现髓细胞瘤和血管瘤,不同鸡群分离的ALV-J毒株存在一定的变异。2.中国特有品种-芦花鸡鸡群在240日龄时出现13.24%的ALV-AB抗体阳性率,未检测到ALV-J抗体,REV抗体在120日龄时出现阳性,且阳性率随日龄增加而升高;P27阳性率从34.21%-66.18%不等;开产前后鸡群开始出现肿瘤性疾病,一直持续至240日龄,死亡率达32%,120-190日龄为死亡高峰期;剖检病鸡可见内脏器官普遍肿大,肝、脾、肾表面及切面有大小不等的灰白色肿瘤样结节,部分病鸡坐骨神经肿胀;组织学检查,肿瘤组织为浸润性生长的多形态淋巴样细胞构成,符合MD的病变特征;PCR检测16份肿瘤病料中有14份为ALV-J阳性(87.5%),13份MDV阳性(81.25%),2份为REV阳性(12.5%), ALV-J与MDV、REV混感率分别为68.8%(11/16)、12.5%(2/16),三重感染率为6.3%(1/16)。该芦花鸡群存在ALV-J、MDV和REV的共感染,但主要表现MD肿瘤性疾病,在肿瘤病例中存在严重的ALV-J免疫耐受性感染。血液常规指标检测中,中国特有品种芦花鸡红细胞总数、血红蛋白含量、血红蛋白浓度均低于对照组,且差异显著;淋巴细胞总数高于对照组,且差异显著;血小板总数、血小板平均体积、血小板压积均低于对照组,且差异极显著,而白细胞总数与对照组差异不显著。检测结果表明,目前山东地区鸡群包括中国地方品种芦花鸡均存在ALV感染,其中以ALV-J为主,ALV-A和ALV-B同时存在,且存在与MDV、REV的混合感染;病鸡主要由ALV-J感染所致,不同品系商品鸡群主要表现髓细胞瘤和血管瘤,并见其它组织肿瘤,芦花鸡则主要表现马立克氏病病变;自不同鸡群分离的ALV-J毒株存在一定的变异。

全文目录

中文摘要  9-11
Abstract  11-13
引言  13-33
  1.1 概述  13-14
  1.2 病原学  14-23
    1.2.1 分类  14-15
    1.2.2 形态学  15-16
    1.2.3 病毒基因组结构  16-18
    1.2.4 病毒囊膜基因及受体  18-19
    1.2.5 病毒复制  19-20
    1.2.6 ALV 对理化因素的抵抗力  20
    1.2.7 ALV 的培养特性  20
    1.2.8 ALV 的致病机制  20-23
  1.3 流行病学  23-24
    1.3.1 传播  23-24
    1.3.2 感染特征  24
    1.3.3 流行特点  24
  1.4 临诊症状及病理变化  24-26
  1.5 诊断与检测  26-30
    1.5.1 临床诊断  26-27
    1.5.2 实验室诊断  27-30
  1.6 防制  30-32
    1.6.1 对种鸡群的净化  30-31
    1.6.2 核心群净化  31
    1.6.3 祖代父母代以下鸡场的生物安全措施  31
    1.6.4 弱毒疫苗的污染问题  31-32
  1.7 血液常规指标检测  32
  1.8 本研究的目的和意义  32-33
2 材料和方法  33-45
  2.1 材料  33-36
    2.1.1 试验仪器  33-34
    2.1.2 试验材料和试剂  34-36
    2.1.3 试验地点  36
  2.2 方法及检测指标  36-45
    2.2.1 被检样品背景及来源  36-37
    2.2.2 病理学检测  37-38
    2.2.3 血清及棉拭子ELISA 检测  38-40
    2.2.4 聚合酶链反应(PCR)检测  40-42
    2.2.5 DH5a 感受态细胞的制备  42-43
    2.2.6 胶回收产物与T 载体连接以及连接产物的转化  43
    2.2.7 质粒DNA 的提取  43-44
    2.2.8 重组质粒的酶切和PCR 鉴定  44
    2.2.9 序列测定和结果分析  44-45
    2.2.10 ALV 对鸡血液学指标的影响  45
3 结果  45-57
  3.1 ELISA 检测结果  45-47
    3.1.1 山东地区禽白血病发病鸡群  45-46
    3.1.2 芦花鸡群  46-47
  3.2 病理学检测  47-52
    3.2.1 临床症状及剖检病变  47-49
    3.2.2 病理组织学观察  49-52
  3.3 病毒学检测  52-56
    3.3.1 PCR 检测  52-53
    3.3.2 PCR 产物序列测定  53-56
  3.4 血液常规指标的检测  56-57
    3.4.1 海兰蛋鸡  56
    3.4.2 芦花鸡  56-57
4 讨论  57-60
  4.1 山东地区禽白血病发病鸡群  57-58
  4.2 中国特有地方品种-芦花鸡群  58-60
5 结论  60-61
6 参考文献  61-71
致谢  71-72
个人简介及攻读学位期间发表论文  72-73
硕士学位论文内容简介及自评  73

山东地区禽白血病发病鸡群的流行病学调查及致病特性的研究

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