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复合肥对花背蟾蜍胚胎发育及性腺分化的影响

作　者: 马玲
导　师: 陆宇燕
学　校: 沈阳师范大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 花背蟾蜍原始生殖细胞(PGCS) 胚胎发育性腺分化性别比例
分类号: S917.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本文以复合肥作为实验毒物,以常见的花背蟾蜍(Rana Bufo)为实验动物,从形态学观察、显微技术、免疫组织化学染色方面研究了复合肥对花背蟾蜍胚胎发育过程及性腺分化的毒性影响,从而确定复合肥是否具有影响花背蟾蜍生长发育及性腺分化的作用,为建立以两栖动物为指示生物的水生生态环境监测体系提供重要依据。测定了各浓度复合肥对花背蟾蜍各生长指标的亚急性毒性,从而得知长时间低浓度的暴露对蝌蚪生长发育的影响及对性腺的组织学影响,以评价水体环境中复合肥的毒性大小,为水体质量监测提供重要毒性依据；以及用组织学方法观察了花背蟾蜍原始生殖细胞(PGCS)的出现、迁移、生殖嵴的形成及性腺分化；并用免疫组织化学方法,检测了芳香化酶基因在性腺组织的表达情况,探究复合肥对芳香化酶基因表达的影响。实验结果如下：生长亚急性毒性实验结果表明,孵化率、变态时间各组无显著差异；畸形率、死亡率存在显著差异；低、高浓度复合肥均会延缓蝌蚪的生长发育,而且随着浓度的升高对蝌蚪的体重显著增重,体长有显著增长变化。对照组蝌蚪发育至Gonser21期发现原始生殖细胞(PGCS); Gonser23期生殖嵴形成；Gonser27期初生性腔即原始性腺形成；Gonser33期次生性腔形成即向卵巢分化,Gonser38期出现精小囊和精原细胞即向精巢分化；孵化后约63天,大部分蝌蚪完成变态；实验Ⅱ、Ⅳ组蝌蚪的性腺分化特征表现均比对照组迟1-2个Gonser时期,而精巢、卵巢分化完成Gonser时期却和对照组一致。对照组雌雄比例接近1：1,随复合肥浓度的升高雌性逐渐增多。芳香化酶主要定位于卵巢中的卵原细胞及精巢的间质中。无论对照组还是实验组,在蝌蚪性腺分化前,芳香化酶性均无表达。随着性腺分化进程,芳香化酶的活性随复合肥浓度的升高逐渐增强。性腺分化后,卵巢中的芳香化酶活性比精巢中的强。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-7
第一章引言  7-16
  1 目前国内外对化肥污染的研究现状  7-9
    1.1 国内化肥污染现状  7
    1.2 生物监测  7-8
    1.3 化肥污染对两栖动物的影响  8-9
  2 两栖动物性腺分化及性别决定的研究进展  9-15
  3 本文研究内容、目的和意义  15-16
第二章复合肥对花背蟾蜍胚胎发育及性腺分化的影响  16-30
  1 导言  16
  2 材料和方法  16-19
    2.1 材料  16-17
    2.2 方法  17-19
  3 实验结果  19-24
  4 讨论  24-30
    4.1 复合肥对花背蟾蜍生长发育的影响  24-26
    4.2 花背蟾蜍性腺分化的研究  26-28
    4.3 复合肥浓度影响性腺分化的进程及性别比例  28-29
    4.4 P450芳香化酶在花背蟾蜍性腺中的免疫活性定位  29-30
结论  30-31
图版  31-38
参考文献  38-43
简历  43-44
致谢  44

复合肥对花背蟾蜍胚胎发育及性腺分化的影响

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