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牛早期胚胎发育差异表达基因的研究

作　者: 栗雪冰
导　师: 仓明
学　校: 内蒙古大学
专　业: 动物学
关键词: 胚胎发育基因表达单胚mRNA差异显示实时定量PCR
分类号: Q78
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

为了了解牛早期胚胎发育的分子机制,建立牛胚胎在早期发育的特定阶段基因表达变化的模式,探讨体外胚胎发育的分子机理,进行了以下方面的研究：首先,通过体外受精的方法获得体外培养的牛早期胚胎,以8细胞胚胎和囊胚为实验材料,利用单个胚胎mRNA差异显示方法,筛选在牛体外培养胚胎中8细胞期胚胎和囊胚表达不同的基因片段,共筛选到11条差异表达的片段。将这些片段的测序结果与GenBank比对,发现有7个片段与已知的功能基因或调控基因序列具有较高的相似性,这些基因分别为CALM1、HMG2L1、IK、LYAR、RPL31、RIMS2和TRM112L基因；一条片段为未知功能基因,另外3条片段在GenBank中无相似序列。为了鉴定差异显示法所检测到的基因片断,采用RT-PCR法检测了筛选到的7个功能基因在早期胚胎中的表达情况,结果表明：在牛8细胞胚胎和囊胚中未能检测到HMG2L1、IK的mRNA表达；而CALM1、LYAR、RIMS2、RPL31、TRM112L等基因的mRNA在两个时期均有表达；然后,应用实时定量PCR方法对差异基因在牛8细胞胚胎和囊胚中的mRNA相对表达量进行了检测,发现RPL31, LYAR, TRM112L, RIMS2基因在牛8细胞期胚胎中mRNA的相对表达量分别是囊胚期胚胎的3.2倍,46倍,50倍和540倍。

牛早期胚胎发育差异表达基因的研究

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