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猕猴桃胚乳培养与倍性变异的研究

作　者: 赵丹丹
导　师: 刘永立
学　校: 浙江大学
专　业: 园艺学
关键词: 猕猴桃胚乳培养植物生长调节剂愈伤组织不定芽不定根倍性变异
分类号: S663.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本实验已以“早金”猕猴桃种子胚乳作为外植体,研究了影响猕猴桃胚乳培养的一系列条件。并以“海沃德”、“早金”猕猴桃胚乳为材料,研究了植物生长调节剂、暗培养、继代时间、秋水仙碱等对胚乳培养过程中染色体倍性的影响。其结果如下：1.以“早金”猕猴桃种子胚乳作为外植体,接种于含蔗糖20g/L,琼脂粉5g/L,pH值5.8的1/2MS培养基上,置于温度为25℃,16/8h光周期的培养室中培养。采用NAA(0,1,2mg/L),2,4-D(0,0.5,1.0 mg/L)和BA(0.5,1,3mg/L)组合讨论不同植物生长调节剂组合对猕猴桃胚乳愈伤组织形成的影响。结果显示：2,4-D对“早金”胚乳愈伤组织形成的诱导作用大于NAA；1mg/L 2,4-D+lmg/L6-BA的植物生长调节剂组合对胚乳愈伤组织的诱导率最大。采用NAA(0,0.1,0.5μmol/L)和BA(O,1,5,10μmol/L)组合讨论不同植物生长调节剂种类及浓度对胚乳愈伤组织中器官形成的影响。结果显示：0.1μmol/L NAA+5μmol/L BA的植物生长调节剂组合对胚乳愈伤组织不定芽的诱导率最大；0.5μmol/L NAA+Iμmol/L BA的植物生长调节剂组合对不定根的诱导率最大。2.以“海沃德”、“早金”猕猴桃胚乳为材料,研究了植物生长调节剂、暗培养、继代时间等对胚乳培养过程中染色体倍性的影响。结果表明：在添加0.2pmol/L NAA+5μmol/L 6-BA的培养基上可以获得更多的3C愈伤组织,高浓度的6-BA可以提高胚乳培养中愈伤组织细胞的加倍率；不经暗培养的与经过7天暗培养愈伤组织相比3C的愈伤组织细胞含量减少,倍性变异更丰富；同一来源的胚乳培养愈伤组织倍性变异率随着时间的增长而提高；与愈伤组织相比胚乳再生植株倍性变异的丰富性下降。3.以“海沃德”、“早金”猕猴桃胚乳为材料,研究了秋水仙碱处理时间、浓度对胚乳培养过程中染色体倍性的影响。结果表明：“海沃德”和“早金”猕猴桃胚乳愈伤组织细胞的染色体加倍率均随着秋水仙碱浓度的升高和处理时间的增加而逐渐提高；用0.05%秋水仙碱处理48h可以在“海沃德”和“早金”胚乳培养中获得更多3C细胞；用0.1%的秋水仙碱处理“海沃德”胚乳愈伤组织24h诱导多倍体再生植株效果最好。

全文目录

致谢  6-7
摘要  7-8
Abstract  8-13
第一章文献综述  13-22
  1.1 猕猴桃胚乳培养研究进展  13-16
    1.1.1 植物胚乳培养的发展  13-14
    1.1.2 猕猴桃胚乳培养  14
    1.1.3 影响植物胚乳培养的主要因素  14-16
      1.1.3.1 基因型  14
      1.1.3.2 胚乳的发生类型和发育程度  14-15
      1.1.3.3 培养基成分  15-16
  1.2 猕猴桃体细胞无性系变异研究进展  16-22
    1.2.1 体细胞无性系变异的机理  16-17
    1.2.2 影响体细胞无性系变异的因素  17-18
    1.2.3 体细胞无性系变异发生的调节  18-19
    1.2.4 猕猴桃无性系变异的检测  19-20
    1.2.5 应用前景  20-22
第二章猕猴桃胚乳培养的研究  22-32
  2.1 材料和方法  22-23
    2.1.1 植物材料  22-23
    2.1.2 试验设计  23
    2.1.3 培养条件  23
    2.1.4 数据统计  23
  2.2 结果与分析  23-30
    2.2.1 不同植物生长调节剂组合对猕猴桃胚乳愈伤组织形成的影响  23-25
    2.2.2 植物生长调节剂对胚乳愈伤组织中器官形成的影响  25-29
      2.2.2.1 植物生长调节剂对"早金"胚乳愈伤组织不定芽形成的影响  25-27
      2.2.2.2 植物生长调节剂对"早金"胚乳愈伤组织不定根形成的影响  27-29
    2.2.3 不同猕猴桃品种间器官形成的差异比较  29-30
      2.2.3.1 不同猕猴桃品种间不定芽分化率的差异  29-30
      2.2.3.2 不同猕猴桃品种间不定根分化率的差异  30
  2.3 讨论  30-32
第三章猕猴桃胚乳培养中倍性变异的研究  32-43
  3.1 材料和方法  32-34
    3.1.1 植物材料  32-33
    3.1.2 倍性鉴定  33
      3.1.2.1 缓冲液配制  33
      3.1.2.2 鉴定方法  33
    3.1.3 实验设计  33-34
      3.1.3.1 植物生长调节剂组合和配比  33
      3.1.3.2 暗培养处理  33-34
      3.1.3.3 继代时间  34
      3.1.3.4 猕猴桃胚乳培养愈伤组织、不定根、再生植株倍性的鉴定及比较分析  34
  3.2 实验结果及分析  34-40
    3.2.1 植物生长调节剂对猕猴桃胚乳培养中细胞倍性的影响  34-36
    3.2.2 暗培养处理对猕猴桃胚乳培养中细胞倍性的影响  36-38
    3.2.3 继代时间对猕猴桃胚乳培养中细胞倍性的影响  38-39
    3.2.4 猕猴桃胚乳培养愈伤组织、不定根以及再生植株倍性分析  39-40
  3.3 讨论  40-43
第四章秋水仙碱诱导胚乳愈伤组织多倍体  43-51
  4.1 材料和方法  43-44
    4.1.1 植物材料  43
    4.1.2 倍性鉴定  43-44
      4.1.2.1 缓冲液配制  43
      4.1.2.2 鉴定方法  43-44
    4.1.3 实验设计  44
      4.1.3.1 秋水仙碱处理对处理对猕猴桃胚乳愈伤组织培养中细胞倍性的影响  44
      4.1.3.2 秋水仙碱处理对猕猴桃胚乳培养再生植株倍性的影响  44
  4.2 实验结果及分析  44-48
    4.2.1 秋水仙碱处理对处理对猕猴桃胚乳愈伤组织培养中细胞倍性的影响  44-47
    4.2.2 秋水仙碱处理对猕猴桃胚乳培养再生植株倍性的影响  47-48
  4.3 讨论  48-51
附图  51-56
参考文献  56-59

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