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局部应用水蛭素对兔耳皮瓣静脉淤血影响的实验性研究

作　者: 韩寅
导　师: 廖毅
学　校: 泸州医学院
专　业: 外科学
关键词: 水蛭素皮瓣静脉淤血兔凝血酶
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：通过建立兔耳淤血皮瓣模型探讨局部注射水蛭素对淤血皮瓣的影响。方法：健康普通大耳白兔18只,雌雄不拘,体重(2200±200g),随机分为3组：1个对照组(A组：注射生理盐水组)和2个治疗组(B组：低分子肝素治疗组；C组：水蛭素治疗组),每组6只,实验前晚停止喂饲,按0.2 mg/kg体重、2%戊巴比妥钠右耳缘静脉注射麻醉,麻醉后侧卧位,固定四肢,消毒铺无菌巾。在左耳背部设计宽为3cm、长为6cm的、以含耳中央血管、神经为蒂(蒂宽1cm)的轴型皮瓣。在光学放大镜下,分离耳中央静脉和神经,并于蒂部切断并结扎,一并结扎其他旁支静脉,创面用5-0丝线结扎止血。制成以耳中央动脉为唯一血供1cm宽的蒂部为唯一静脉回流途径的静脉淤血皮瓣模型。治疗组分别在术后即刻,术后第1、2、3天距皮瓣蒂部1cm处三等分点上均匀注射水蛭素(1U/1ml/皮瓣)或低分子肝素(625IU/1ml/皮瓣),对照组同法给予等量(1ml)生理盐水,皮瓣用5-0丝线原位缝合。术后观察皮瓣颜色,表面毛发脱落情况,血肿形成情况,皮瓣存活率,分别于术后1、3、5、7天取皮瓣远端皮下组织病理切片观察皮瓣毛细血管内血栓形成情况,中性粒细胞附壁及红细胞聚集情况,酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测组织内TXB2水平。术后第3、5天皮瓣远端组织病理切片显微镜下计数5个视野下微细血管数量,对比各组切片中微血管数量差异。结果：1大体观察：术后第1天3组皮瓣远端均出现不同程度的组织肿胀淤血,但淤血范围及程度空白对照组较水蛭治疗组和肝素治疗组明显,呈暗紫色,周缘可见较多渗出。术后第2天各组皮瓣淤血肿胀均达到高峰。术后第3天水蛭素治疗组和肝素治疗组皮瓣远端的淤血肿胀开始逐渐消退,空白对照组皮瓣远端的淤血肿胀进一步加重,局部毛发脱落,皮瓣周缘可见较多的组织液渗出。术后第7天水蛭素治疗组和肝素治疗组皮瓣基本愈合良好。空白对照组皮瓣淤血组织界限分明,淤血处皮瓣毛发脱落,质硬,深黑色濒临坏死。2各组皮瓣成活率比较：肝素治疗组及水蛭素治疗组成活面积百分比分别为(92.33±1.67)%与(94.83±1.91)%,均比空白对照组(77.93±1.18)%高,有显著性差异(P<0.01),水蛭素治疗组与肝素治疗组皮瓣成活率相当,差异无统计学意义(P>0.05)。3组织学观察：HE染色光镜下观察水蛭素治疗组和肝素治疗组术后第1、3天,真皮内毛细血管及微静脉内可见不同程度红细胞聚集。皮下未见血栓形成,术后第5、7天毛细血管及微静脉内红细胞聚集消散。空白对照组术后第1、3天。真皮内毛细血管及微静脉内大量红细胞聚集,单核及中性粒细胞附壁。术后第5、7天可见红细聚集变性含铁血黄素释放染成淡黄色,皮下微静脉血栓形成。4微血管计数取各试验组第3、5天病理切片,随机计数5个显微镜视野下微血管数量取其均值作为该标本的微血管数,并分别与空白组比较,第3天水蛭素治疗组和肝素治疗组微血管数分别为6.9±0.5和6.5±0.8,空白对照组为6.4±0.9,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。第5天水蛭素治疗组和肝素治疗组微血管数分别为11.7±0.8和10.9±1.1,空白对照组为5.3±0.9,其与水蛭素组和肝素组比较差异有统计学意义(P<0.05)。5 TXB2检测术后第3天,水蛭素治疗组和肝素治疗组TXB2含量分别为24.23±1.36和25.24±1.50与空白对照组30.97±1.45相比,其差异有统计学意义(P<0.01),术后第5天水蛭素治疗组和肝素治疗组TXB2含量分别为22.09±0.51和24.39±0.71与空白对照组37.21±1.10比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。余各组相互比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：本试验通过局部注射水蛭素能够有效缓减兔耳淤血皮瓣的淤血肿胀,明显减轻了皮瓣内毛细血管和微静脉内红细胞聚集、中性粒细胞附壁、减少血栓形成,并抑制了皮瓣中TXB2的生成,有效的提高了皮瓣的成活率。

全文目录

中文摘要  3-6
英文摘要  6-9
前言  9-12
材料与方法  12-17
结果  17-24
讨论  24-33
结论  33-34
参考文献  34-37
缩略词表  37-38
致谢  38-39
水蛭及水蛭素在临床应用的进展(综述)  39-49

局部应用水蛭素对兔耳皮瓣静脉淤血影响的实验性研究

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