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转基因辣椒表达蛋白GAFP的活性测定及抗真菌活性分析

作　者: 李富琴
导　师: 李长福
学　校: 遵义医学院
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 天麻抗真菌蛋白转基因辣椒蛋白表达抗真菌活性
分类号: S641.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 41次
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内容摘要

目的：测定天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因转化“遵椒1号”辣椒中GAFP的的抗真菌活性,获得具有抗真菌能力的辣椒新品种。方法：(1)阳离子交换层析分离纯化转基因辣椒GAFP;(2) SDS-PAGE凝胶电泳鉴定GAFP;(3)微生物稀释分离方法分离室内辣椒病株及野生辣椒病株中的真菌；(4)采用生长速率法分析转基因辣椒GAFP对头状地霉菌、镰刀状霉菌及绿色木霉菌的抗真菌能力,其结果用抑制率(%)表示,作为实验组(A组)；对照组为野生天麻GAFP(B1组)和非转基因辣椒蛋白提取物(B2组)。结果：(1)SDS-PAGE凝胶电泳结果显示转基因辣椒中有GAFP特异条带；(2)从室内辣椒病株及野生辣椒病株中分离出了真菌：头状地霉菌和镰刀状霉菌；(3)转基因辣椒GAFP在0.0125mg/ml,0.025mg/ml, 0.05mg/ml,0.1mg/ml,0.2mg/ml不同浓度下对头状地霉菌,镰刀状霉菌和绿色木霉菌都有不同程度的抑制作用,在0.2mg/ml浓度下对头状地霉菌和镰刀状霉菌的抑制率都超过50%,分别达61.38%和54.52%,对绿色木霉菌的抑制率为45.65%。与空白对照组相比,均有显著性差异(P<0.05)；(4)野生天麻GAFP在0.0125mg/ml, 0.025mg/ml,0.05mg/ml,0.1mg/ml,0.2mg/ml不同浓度下对头状地霉菌,镰刀状霉菌和绿色木霉菌都有不同程度的抑制作用,在0.2mg/ml浓度下对头状地霉菌、绿色木霉菌和镰刀状霉菌的抑制率都超过50%,分别达61.39%,50.19%和54.73%。与空白对照组相比,均有显著性差异(P<0.05)；(5)非转基因辣椒蛋白提取物对头状地霉菌,镰刀状霉菌和绿色木霉菌的抑制作用与空白对照组比较,差异没有显著性。(6)将具有抗真菌能力的转基因辣椒组与野生天麻组进行统计学分析比较,差异没有显著性.结论：转基因辣椒体系中天麻抗真菌蛋白得到成功表达并与野生天麻GAFP具有相似的抗真菌活性。

全文目录

1 论文  4-39
  1.1 缩略词表  4-5
  1.2 中文摘要  5-6
  1.3 英文摘要  6-8
  1.4 前言  8-10
  1.5 材料与方法  10-18
  1.6 结果  18-29
  1.7 讨论  29-35
  1.8 结论  35-36
  1.9 参考文献  36-39
2 综述  39-50
  2.1 正文  39-46
  2.2 参考文献  46-50
3 致谢  50

转基因辣椒表达蛋白GAFP的活性测定及抗真菌活性分析

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