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不同ADF水平日粮对南江黄羊瘤胃发酵和纤维降解菌的影响

作　者: 邹华围
导　师: 王之盛；周安国
学　校: 四川农业大学
专　业: 动物营养与饲料科学
关键词: 日粮纤维 ADF 南江黄羊瘤胃发酵纤维降解
分类号: S827
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本文通过三个实验研究了不同ADF水平日粮对瘤胃发酵和纤维降解菌的影响。首先评价了日粮ADF水平对南江黄羊瘤胃发酵的影响,然后利用尼龙袋法研究了日粮ADF水平对饲料在瘤胃内的降解率的影响,并测定了不同日粮ADF水平对瘤胃微生物区系的影响。实验一用体外产气法研究了不同ADF水平日粮对瘤胃发酵特性的影响。以四只体重一致的(22±1kg),安装永久性瘤胃瘘管的南江黄羊作为瘤胃液供体,试验材料为五个ADF水平目粮(ADF水平分别为14.86%、19.88%、24.52%、28.91%和34.12%)。分别记录0,2,4,6,8,12,24,48和72h的产气量,并测定6h,12h,24h和48h体外培养瘤胃液的pH值,挥发性脂肪酸,氨态氮,微生物蛋白含量和瘤胃四种纤维降解酶活性。结果表明：不同ADF水平日粮对瘤胃发酵和四种瘤胃微生物纤维降解酶活性存在显著影响。瘤胃液pH值随着日粮ADF水平升高而升高。当日粮ADF水平为24.52%时,累积产气量,总VFAs浓度和微生物蛋白浓度最高,NH3-N浓度和乙酸/丙酸最低。瘤胃液中木聚糖酶活性高于其余三种纤维降解酶活性。回归分析表明瘤胃中木聚糖酶活,羧甲基纤维素酶活和微晶纤维素酶活与日粮ADF水平间存在显著二次相关关系,并且当日粮ADF含量为26.16%时,木聚糖酶活性最高；当日粮ADF水平为25.05%时,羧甲基纤维素酶活性最高；而当日粮ADF水平为25.43%时,微晶纤维素酶活性最高。实验二选取4只体况良好,带有永久性瘤胃瘘管的南江黄羊,用尼龙袋法测定了五个ADF水平日粮(ADF水平分别为14.86%、19.88%、24.52%、28.91%和34.12%)在南江黄羊瘤胃内的降解率。研究结果表明,不同ADF水平日粮的DM、OM、CP、NDF及ADF的瘤胃降解率差异显著。回归分析结果表明饲料DM在瘤胃内的降解率与日粮ADF水平间存在极显著二次相关关系,饲料OM、CP和NDF在瘤胃内的降解率与日粮ADF水平存在显著二次相关关系。并且当日粮ADF水平为25.61%时饲料DM降解率最大；日粮ADF水平为25.21%时饲料OM降解率最大；ADF水平为25.78%时饲料粗蛋白降解率最大：而当ADF水平为25.49%时,饲料NDF具有最大瘤胃降解率。实验三用DGGE法和RT-PCR法研究了不同ADF水平日粮(ADF水平分别为14.86%、19.88%、24.52%、28.91%和34.12%)对南江黄羊瘤胃细菌菌群和纤维降解菌数量的影响。研究结果表明,不同日粮ADF水平对南江黄羊瘤胃细菌多样性和相似性存在影响,当日粮ADF水平为24.52%时,瘤胃液中细菌种类和数量最多。日粮ADF水平对瘤胃纤维降解菌拷贝数影响显著,产琥珀酸拟杆菌、黄色瘤胃球菌和白色瘤胃球菌拷贝数与日粮ADF水平都存在显著二次相关关系。回归分析表明当日粮中ADF水平为25%时产琥珀酸拟杆菌拷贝数浓度最大；当日粮ADF水平为25.14%时白色瘤胃球菌拷贝数浓度最大；而当日粮中ADF含量为24.35%时,黄色瘤胃球菌拷贝数最多。综上所述,不同ADF水平日粮能够显著影响瘤胃发酵特性,饲料瘤胃降解率和瘤胃纤维降解菌数量。当日粮ADF水平为24.35%-26.16%,南江黄羊瘤胃瘤胃内环境稳定,利于瘤胃纤维降解菌生长,使得瘤胃微生物纤维降解酶活性和饲料瘤胃降解率最高。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
专业名词缩写符号  10-11
目录  11-14
1 前言  14-15
2 文献综述  15-24
  2.1 瘤胃细菌组成  15
  2.2 瘤胃微生物纤维降解机制  15-17
    2.2.1 瘤胃纤维降解菌  15-17
    2.2.2 纤维在瘤胃内的降解过程  17
  2.3 日粮纤维对瘤胃正常功能及纤维降解的影响  17-21
    2.3.1 日粮纤维的定义  17-18
    2.3.2 日粮纤维对瘤胃发酵的影响  18-20
      2.3.2.1 日粮纤维对瘤胃pH值的影响  18-19
      2.3.2.2 日粮纤维对氨氮浓度的影响  19
      2.3.2.3 日粮纤维对VFAs的影响  19-20
      2.3.2.4 日粮纤维对微生物蛋白合成的影响  20
    2.3.3 日粮纤维对瘤胃纤维素降解的影响  20-21
    2.3.4 日粮纤维对瘤胃细菌菌群的影响  21
  2.4 DGGE法和RT-PCR法在瘤胃微生物生态系统中的应用  21-23
    2.4.1 PCR-DGGE法在瘤胃微生物多态性研究中的应用  21-22
    2.4.2 实时荧光定量PCR技术在瘤胃微生物中的应用  22-23
  2.5 本研究的目的意义与主要研究内容  23-24
    2.5.1 存在的问题  23
    2.5.2 本研究的目的意义与主要研究内容  23-24
      2.5.2.1 目的  23
      2.5.2.2 意义  23
      2.5.2.3 内容  23-24
3 试验研究  24-59
  3.1 不同ADF水平日粮对南江黄羊瘤胃发酵的影响  24-37
    3.1.1 材料与方法  24-27
      3.1.1.1 试验动物  24
      3.1.1.2 试验日粮  24-25
      3.1.1.3 产气与体外培养实验  25-26
      3.1.1.4 测定指标及方法  26-27
      3.1.1.5 数据统计  27
    3.1.2 结果与分析  27-33
      3.1.2.1 产气量  27-28
      3.1.2.2 不同ADF水平日粮对瘤胃pH的影响  28-29
      3.1.2.3 不同ADF水平日粮对瘤胃VFAs的影响  29-30
      3.1.2.4 不同ADF水平日粮对NH_3-N浓度的影响  30
      3.1.2.5 不同ADF水平日粮对瘤胃微生物蛋白的影响  30-31
      3.1.2.6 不同ADF水平日粮对瘤胃纤维降解酶活性的影响  31-33
    3.1.3 讨论  33-36
      3.1.3.1 产气量  33-34
      3.1.3.2 不同ADF水平日粮对瘤胃pH的影响  34
      3.1.3.3 不同ADF水平日粮对瘤胃VFAs的影响  34
      3.1.3.4 不同ADF水平日粮对瘤胃NH3-N浓度的影响  34-35
      3.1.3.5 不同ADF水平日粮对瘤胃MCP的影响  35
      3.1.3.6 不同ADF水平日粮对瘤胃纤维素降解酶活性的影响  35-36
    3.1.4 小结  36-37
  3.2 不同ADF水平日粮对南江黄羊饲料瘤胃降解率的影响  37-44
    3.2.1 材料与方法  37-38
      3.2.1.1 试验材料  37
      3.2.1.2 试验动物与试验设计  37-38
      3.2.1.3 试验方法  38
      3.2.1.4 测定指标及方法  38
    3.2.2 数据统计  38-39
    3.2.3 结果与分析  39-43
      3.2.3.1 不同ADF水平日粮干物质在南江黄羊瘤胃内的降解率  39
      3.2.3.2 不同ADF水平日粮有机物在南江黄羊瘤胃内的降解率  39-40
      3.2.3.3 不同ADF水平日粮粗蛋白在南江黄羊瘤胃内的降解率  40-41
      3.2.3.4 不同ADF水平日粮NDF在南江黄羊瘤胃内的降解率  41
      3.2.3.5 不同ADF水平日粮ADF在南江黄羊瘤胃内的降解率  41-42
      3.2.3.6 日粮ADF水平与饲料瘤胃降解率回归分析  42-43
    3.2.4 讨论  43
    3.2.5 小结  43-44
  3.3 不同ADF水平日粮对南江黄羊瘤胃细菌菌群的影响  44-59
    3.3.1 试验材料与方法  44-47
      3.3.1.1 试验材料  44
      3.3.1.2 试验动物  44
      3.3.1.3 试验设计  44
      3.3.1.4 总DNA提取  44
      3.3.1.5 DGGE法检测瘤胃细菌菌群变化  44-45
      3.3.1.6 RT-PCR法测定瘤胃纤维降解菌  45-47
      3.3.1.7 数据统计  47
    3.3.2 结果与分析  47-57
      3.3.2.1 总DNA的提取及PCR扩增  47-48
      3.3.2.2 瘤胃液细菌多样性的差异  48
      3.3.2.3 瘤胃细菌的相似性分析  48-49
      3.3.2.4 瘤胃内三种纤维降解菌DNA的提取及质量检测  49-50
      3.3.2.5 荧光定量标准品的制备  50-51
      3.3.2.6 荧光定量标准曲线的制作  51-53
      3.3.2.7 三种功能菌的定量结果  53-57
    3.3.3 讨论  57-58
      3.3.3.1 不同ADF水平日粮对瘤胃细菌菌群的影响  57
      3.3.3.2 不同ADF水平日粮对瘤胃纤维降解菌的影响  57-58
    3.3.4 小结  58-59
4 总体讨论与结论  59-62
  4.1 总体讨论  59-60
  4.2 整体结论和建议  60-62
    4.2.1 全文结论  60-61
    4.2.2 创新点  61
    4.2.3 后续研究展望  61-62
参考文献  62-72
致谢  72

不同ADF水平日粮对南江黄羊瘤胃发酵和纤维降解菌的影响

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