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益肾通络方抑制实验性肾病综合征大鼠肾组织纤维化的机理研究

作 者: 刘慧萍
导 师: 莫新民;雷久士
学 校: 湖南中医药大学
专 业: 中西结合基础
关键词: 益肾通络方 肾病综合征 纤维化 FN LN 机理研究
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
下 载: 21次
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内容摘要


目的:益肾通络方是临床治疗肾病综合征(NS)的有效验方。本课题以中医药理论为指导,采用现代科学实验研究手段,观察益肾通络方对实验性NS模型大鼠的治疗作用,探讨治疗NS的作用机理,为临床用药提供依据。方法:大鼠尾静脉注射1ml浓度为2.5mg/ml阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA) NS模型,模型成功后与第4周末将大鼠随机分为模型组、益肾通络方高剂量组(高剂组)、益肾通络方中剂量组(中剂组)、益肾通络方低剂量组(低剂组)、阳性对照组(肾炎四味片组),并设空白对照组,分别予以药物干预,治疗4周。每日观察大鼠一般情况,实验第8周末处死动物,切取肾组织,进行组织切片,采用HE染色和Masson染色进行病理形态学观察、采用免疫组织化学方法检测肾组织FNLN的表达。结果:(一)药物对实验大鼠肾组织的修复作用1.肾组织常规HE染色观察:光镜下可见模型组肾小球系膜细胞、系膜基质较正常组明显增加,部分肾小球呈局灶性节段性硬化,近皮质区肾小管上皮细胞坏死脱落,大量肾小管管腔扩张,并有肾小管灶状萎缩,部分小管腔内可见蛋白管型,肾间质纤维化,并可见炎细胞浸润。益肾通络方高、中剂量组以上改变较同期模型组明显减轻。2. Masson染色观察:光镜下可见模型组肾间质大量胶原纤维增生,间质纤维化呈灶状分布。益肾通络方高、中剂量组以上改变较同期模型组明显减轻。(二)药物对实验大鼠肾组织的免疫保护作用免疫组织化学:光镜下观察,纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)表达于肾小管基底膜周围和肾间质,模型组基底膜周围和间质区表达明显增多,且与间质增宽及炎细胞浸润程度一致,益肾通络方高、中剂量组FN、LN表达明显减少结论:益肾通络方能够明显减轻肾组织的病理损害,抑制肾小球系膜细胞、系膜基质的增生,减少FN、LN的沉积。这可能是益肾通络方抑制NS大鼠肾组织细胞外基质(ECM)的增生和积聚,延缓了肾小球硬化和肾间质纤维化的进程保护肾组织的主要机理。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
缩略词表  10-11
引言  11-12
第一部分 材料与方法  12-18
  1.材料  12-13
    1.1 实验动物  12
    1.2 实验条件  12
    1.3 实验药品  12
    1.4 实验试剂  12-13
    1.5 主要仪器  13
  2.方法  13-18
    2.1 抗原制备方法  13-14
    2.2 模型制备方法  14
    2.3 实验分组  14-15
    2.4 给药方法  15
    2.5 观察指标及检测方法  15-17
      2.5.1 肾组织病理形态学检查  15-16
        2.5.1.1 常规HE染色  15
        2.5.1.2 Masson染色  15-16
      2.5.2 肾组织FNLN检测  16-17
        2.5.2.1 FN、LN检测所用试剂  16
        2.5.2.2 FN、LN检测方法  16-17
        2.5.2.3 FN、LN结果判断  17
    2.6 统计学处理  17-18
第二部分 结果与分析  18-27
  1.药物对实验大鼠肾组织的修复作用  18-22
    1.1 HE染色观察  18-20
    1.2 Masson染色观察  20-22
  2.药物对实验大鼠肾组织的免疫保护作用  22-27
第三部分 讨论  27-37
  1.祖国医学对NS的认识  27-29
    1.1 病因病机的理论依据  27-28
    1.2 治则治法依据  28-29
  2.西医对NS的认识  29-32
  3.益肾通络方组方及现代药理研究  32
  4.从形态学方面来探讨益肾通络方作用机理  32-37
    4.1 肾组织常规HE染色影响  33
    4.2 肾组织Masson染色影响  33-34
    4.3 FN、LN的变化  34-37
结论  37-38
致谢  38-39
参考文献  39-42

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